- •Введение
- •Оформление работы:
- •1. Дата.
- •2. Тема: номер и название работы.
- •Организация учебного процесса по биохимии
- •Правила техники безопасности при работе в биохимической лаборатории
- •Тема 1. Реакция среды
- •Работа 1. Определение реакции среды молока и яйца с помощью универсальной индикаторной бумаги
- •Работа 2. Определение реакции среды бесцветных растворов с помощью прибора Михаэлиса
- •Работа 3. Определение рН гомогената мышечной ткани, раствора яичного белка с помощью прибора Михаэлиса Приготовление гомогената из тканей животных
- •Ход опыта
- •Лучи света
- •Матовое стекло
- •Работа 4. Определение рН растворов и биологического материала электрометрическим (потенциометрическим) методом
- •Вопросы для самоподготовки по теме 1
- •Тема 2. Буферные системы
- •Работа 5. Приготовление ацетатного буферного раствора и изучение зависимости величины рН от соотношения компонентов
- •Работа 6. Изучение действия на буферный раствор небольшого количества кислоты
- •Работа 7. Изучение действия на буферный раствор большого количества кислоты
- •Работа 8. Изучение действия небольшого количества щелочи на буферный раствор
- •Работа 9. Изучение действия на буферный раствор большого количества щелочи
- •Работа 10. Влияние разбавления водой буферного раствора на величину его рН
- •Вопросы для самоподготовки по теме 2
- •Тема 3. Коллоидные растворы
- •Работа 11. Получение гидрофобного коллоидного раствора гидроксида железа Fe(oh)3.
- •Работа 13. Диализ коллоидных растворов
- •Работа 14. Изучение механизма коагуляции золя железа
- •Работа 15 . Изучение защитного действия гидрофильных коллоидов (эмульсоидов)
- •Вопросы для самоподготовки по теме 3
- •Tеma 4. Адсорбция и абсорбция
- •Работа 16. Адсорбция органических красок животным углем
- •Работа 17. Определение количества уксусной кислоты, адсорбированной животным углем
- •Вопросы для самоподготовки по теме 4
- •Тема 5. Химия и обмен белков
- •Работа 18. Определение количества белка в гомогенате мышечной ткани, яйце рефрактометрическим методом
- •Работа 19. Определение белка по методу Лоури
- •Работа 20. Разделение смеси аминокислот методом распределительной хроматографии на бумаге
- •Работа 21. Определение количества аминокислот в биоматериале по азоту аминогрупп методом формольного титрования по Серенсену
- •Работа 22. Изучение действия пепсина на переваривание белка
- •Вопросы для самоподготовки по теме 5
- •Тема 6. Ферменты (энзимы)
- •Работа 23. Приготовление раствора фермента -амилазы (кф 3.2.1. 1) слюны
- •Работа 24. Обнаружение в слюне амилазы и определение специфичности ее действия
- •Работа 25. Изучение влияния рН среды на активность амилазы слюны
- •Работа 26. Изучение влияния температуры на активность энзимов
- •Работа 27. Изучение действия активаторов и ингибиторов на активность ферментов
- •Вопросы для самоподготовки по теме 6
- •Тема 7. Углеводы и их обмен
- •Работа 28. Изучение механизма переваривания углеводов и определение активности -амилазы (кф 3.2.1.1.) слюны
- •Работа 29. Обнаружение гликогена в тканях животных
- •Вопросы для самоподготовки по теме 7
- •Тема 8. Липиды и их обмен
- •Работа 30. Изучение растворимости жира
- •Работа 31. Определение кислотного числа жира
- •Работа 32. Определение йодного числа.
- •Работа 33. Исследование эмульгирования жира
- •Работа 34. Изучение механизма переваривания липидов и определение активности панкреатической липазы (кф 3. 1. 1. 3)
- •Работа 35. Реакция обнаружения холестерола в растительном и животном маслах.
- •Вопросы для самоподготовки по теме 8
- •Тема 9. Витамины
- •Работа 36. Обнаружение витамина а в жире
- •Работа 37. Обнаружение витамина д в жире
- •Работа 38. Обнаружение витамина с в биоматериале
- •Вопросы для самоподготовки по теме 9
- •Тема 10. Минеральные вещества и вода
- •Работа 39. Определение количества кальция в молоке и гомогенате мышечной ткани по де Ваарду
- •Работа 40. Определение содержания кальция в молоке и гомогенате мышечной ткани комплексонометрическим методом
- •Работа 41. Определение количества неорганического фосфора в молоке и гомогенате мышечной ткани
- •Вопросы для самоподготовки по теме 10
- •Тема 11. Молоко
- •Работа 42. Определение общей кислотности молока по Тернеру
- •Работа 43 Выделение казеиногена из молока и исследование его свойств.
- •Работа 44. Определение редуктазы молока
- •Работа 45. Определение количества лактозы в молоке с помощью рефрактометра
- •Вопросы для самоподготовки по теме 11
- •Рекомендуемая литература.
Работа 30. Изучение растворимости жира
Растворимость - это способность частиц растворяемого вещества распределяться среди молекул растворителя, зависит от многих факторов: природы растворяемых веществ и растворителя, температуры, давления, примесей и т. д. Показателем растворимости является прозрачность раствора, его равномерная окраска и др. В организме универсальный растворитель - вода.
Ход опыта
В три пробирки внести по 5 капель подсолнечного масла. В 1-ю прилить 2 мл воды, во 2-ю - 2 мл этанола, в 3-ю -2 мл хлороформа. Смесь в пробирках хорошо встряхнуть и отметить растворимость жира.
Задание: 1. Выполнить опыт.
2. Определить (указав на наиболее характерный признак в чем жир хорошо растворим, в чем плохо, а в чем совсем нерастворим.
3. Где свойство растворимости жира в определенных растворителях можно использовать в практике товароведа-эксперта?
Работа 31. Определение кислотного числа жира
Кислотное число свидетельствует о содержании в жире свободных жирных кислот, которые могут образовываться при его разложении, например, при хранении и т. д. Оно равно количеству мг 0,1 н раствора КОН, пошедшего на нейтрализацию свободных жирных кислот в 1 г жира.
Ход опыта
В две колбочки налить по 1 г подсолнечного масла разного срока хранения, добавить по 10 мл смеси спирта с эфиром (1:2) и хорошо перемешать. Внести в каждую по 3 капли 0,1% раствора фенолфталеина и быстро оттитровать 0,1 н раствором КОН до розовой окраски, не исчезающей 1 мин.
Кислотное число определить по формуле:
где Кч - кислотное число;
а - количество мл 0,1 н раствора КОН, используемого на титрование пробы;
5,6 - количество мг КОН, содержащихся в 1 мл 0,1 н раствора КОН;
в - коэффициент поправки на 0,1 н раствора КОН;
с - навеска жира, мг.
Задание: 1. Выполнить опыт.
2. Определить кислотное число 1 и 2-й колб и сделать заключение, какое масло хранилось более длительно.
3. Написать реакцию нейтрализации любой жирной кислоты гидроксидом калия.
Работа 32. Определение йодного числа.
Йодным числом называют количество граммов йода, которое может прореагировать со 100 г жира.
Это число позволяет оценить степень непредельности жира, обусловленную наличием в нём глицеридов, кислоты которых содержат двойные связи, способность его к окислению, восстановлению и другим реакциям. Чем больше в жире ненасыщенных жирных кислот, тем выше его йодное число.
Йодное число некоторых жиров и масел колеблется в следующих пределах: говяжий – 27-47, бараний – 31-46, свиной – 46-66, подсолнечное масло – 129-136, конопляное масло – 145-162, льняное масло – 175-201.
Принцип метода. Определение йодного числа основано на реакции присоединения иода по месту разрыва двойных связей у ненасыщенных жирных кислот, которая протекает количественно по схеме:
R -CH=CH-R+I2+HOH R-CH-CH-R+HI
I OH
Непрореагировавший йод оттитровывают тиосульфатом натрия.
Ход опыта.
В одну колбу (опытная проба) помещают 0,1 г подсолнечного масла (отвешивают на аналитических весах) , в другую (контрольная проба) – 0,1 мл воды и добавляют из бюретки по 5 мл хлороформа.
После растворения навески масла в колбу добавляют пипеткой (точно!) по 10 мл 0,1н. спиртового раствора йода, закрывают их пробками, перемешивают содержимое, встряхивают и выдерживают в тёмном месте.
Через 5 мин пробы титруют при постоянном взбалтывании 0,1 н. раствором тиосульфата натрия сначала до появления светло-желтого окрашивания, а затем, добавив 1мл 1%- ного раствора крахмала, - до исчезновения синего окрашивания.
Йодное число (х,г) вычисляют по формуле:
( b-a )●K●0,01269●100
Х =
С
где b – объем 0,1 н. раствора тиосульфата натрия, израсходованного на титрование контрольной пробы, мл;
a – объем 0,1 н. раствора тиосульфата натрия, израсходованного на титрование опытной пробы, мл;
К – коэффициент поправки на титр 0,1 н. раствора тиосульфата натрия
0,01269 – количество граммов иода, эквивалентное 1 мл 0,1 н. раствора тиосульфата натрия;
100 – коэффициент перерасчета на 100 граммов;
с – навеска жира, г.
Задание: 1. Выполнить опыт.
2. Написать реакцию галогенирования олеиновой, линолевой, лионоленовой и арахидоновой кислот.