Работа 29. Обнаружение гликогена в тканях животных

Гликоген - животный полисахарид, состоит из остатков глюкозы. В качестве энергетического (в основном) материала он откладывается в запас в органах и тканях. Самое большое его количество находится в печени (2-10%), которая счи­тается депо гликогена, и мышцах (0,5-2%). Его распад происходит путем фосфоролиза (преимущественно в клетках) и гидролиза (в пищеварительном тракте). В последнем слу­чае из гликогена образуются декстрины и мальтоза. Раствор йода окрашивает гликоген в красно-бурый цвет различной интенсивности и оттенков.

Ход опыта

В центрифужную пробирку (предварительно взвешена!) поместить 2 г печени, взятой у только что убитого животного (гликоген быстро подвергается ферментативному расщепле­нию), и залить ее 2 мл 60% раствора КОН. Поставить на 1 ч в кипящую водяную баню, перемешивая периодически ее со­держимое стеклянной палочкой. Затем пробирку вынуть из бани, охладить водопроводной водой, влить в нее 10 мл эта­нола и поместить в емкость со льдам на 20-30 мин. Выпав­ший осадок гликогена отделить путем центрифугирования при 3000 об/мин в течение 5-10 мин. Надосадок слить, а осадок растворить в 2 мл 15% раствора КОН, добавить в него 10 мл этанола, вновь охладить и отделить также центрифугированием. Надосадок слить. Пробирку с осадком гликогена взвесить и, вычтя из (полученного показателя первоначальный вес пробирки, найти массу гликогена. После этого проделать качественную реакцию на гликоген, для чего осадок растворить в 5 мл дистиллированной воды и добавить к нему 1 каплю 1% раствора йода.

Задание: 1. Выполнить опыт.

2. Выделить гликоген из печени и сделать вывод о его количестве в ткани этого органа.

3. Подтвердить наличие гликогена по реакции с йодом.

Вопросы для самоподготовки по теме 7

1. Основные углеводы (моно-, ди- и полисахариды), встречающиеся в организме, а также используемые в кормлении животных и питании человека (глюкоза, фруктоза, галактоза, мальтоза, лактоза, сахароза, крахмал, гликоген, клетчатка, гемицеллюлоза, лигнин, пектин). Их строение и роль в организме.

2. Переваривание и всасывание углеводов в организме животных и человека желудком (реакции, ферменты). Усвоение клетчатки, лигнина, пектина.

3. Химизм и энергетика спиртового, уксусно-кислого, пропионово-кислого, масляно-кислого, лимонно-кислого брожения. Условия протекания, возбудители.

4. Химизм и энергетика разложения клетчатки, древесины, лигнина и пектиновых веществ. Условия и возбудители.

5. Химизм и энергетика аэробного дыхания (окисление лактата, ацетата, пропионата, бутирата, этанола).

Тема 8. Липиды и их обмен

К липидам относятся природные органические соединения, нерастворимые в воде, а растворимые в неполярных органических растворителях (хлороформе, эфире, бензоле и др.).

Липиды выполняют в организме важнейшие биологические фун­кции: они входят в состав клеточных мембран, играют важную роль в функционировании нервной системы, являются запасными веществами, в форме которых депонируется метаболическое топливо, выполняют защитную роль. Некоторые из этих веществ выполняют функции светочувствительных пигментов, гормонов и т.д.

Липиды подразделяются по химическому строению на следую­щие группы:

1. Жирные кислоты. 2. Триацилглицеролы. З. Воска.

4. Фосфоглицериды: а)фосфатидилэтаноламин; б) фосфати- дилхолин; в) фосфатидилсерин; г) фосфатидилинозитол; д) кардио- липин. 5. Сфинголипиды: а) сфингомиелин; б) цереброзиды; в) ган- глиозиды. 6. Терпены, стеролы и их эфиры с жирными кислотами.

Триацилглицеролы (нейтральные жиры)

Жиры – сложные эфиры глицерина и высокомолекулярных жирных кислот.

В состав жиров входят многочисленные предельные (или насыщенные) и непредельные (или ненасыщенные) жирные кислоты. Среди предельных кислот чаще встречаются стеариновая (С₁₇Н₃₅СООН) и пальмитиновая (С₁₅Н₃₁СООН). Из непредельных жирных кислот основная роль принадлежит олеиновой (С₁₇Н₃₃СООН), линолевой (С₁₇Н₃₁СООН) и линоленовой (С₁₇Н₂₉СООН), большое физиологическое значение имеет также арахидоновая (С₁₉Н₃₁СООН) кислота. Непредельные жирные кислоты характеризуются наличием двойных связей: в молекуле олеиновой кислоты содержится одна двойная связь, в молекуле линолевой – две, линоленовой – три, арахидоновой – четыре. Благодаря наличию двойных связей непредельные кислоты отличаются высокой реакционной способностью. Линолевая, линоленовая и арахидоновая (так называемые полиненасыщенные) кислоты не синтезируются в организме человека и животных должны поступать с пищей или кормом. Недостаток этих кислот в пище вызывает серьёзные нарушения обмена веществ, исчезающие при потреблении продуктов, в состав которых входят непредельные жирные кислоты. Поэтому указанные соединения относят к веществам, обладающим витаминным действием (витамин F). Линолевая и линоленовая кислоты содержаться в растительных маслах (льняном, подсолнечном и др.), арахидоновая кислота – в печеночных жирах рыб, сливочном масле, некоторых видах маргарина и свином сале.

В состав масел некоторых тропических растений входят также циклические жирные кислоты (хаульмугровая, гиднокарповая и др.).