Работа 44. Определение редуктазы молока

Редуктазная проба используется (наряду с другими) для определения качества молока и служит показателем наличия в нем бактерий, содержащих редуктазу. Этот энзим обладает способностью с помощью реакции восстановления обесцвечивать метиленовую синь (МС). По скорости обесцвечивания МС судят об активности фермента и, следовательно, о количестве содержащихся в молоке микробов: чем их больше, тем быстрее происходит обесцвечивание и наоборот.

Определено, что если обесцвечивание происходит в течение 20 мин и ранее, то в 1 мл молока содержится 20 млн. бактерий. Такое молоко очень плохого качества.

Обесцвечивание в течение от 20 мин до 2 ч указывает на содержание от 4 до 20 млн. бактерий в 1 мл молока. Это плохое молоко.

Обесцвечивание в течение 2 - 2,5 ч свидетельствует о содержании от 500 тыс. до 4 млн. бактерий. Такое молоко расценивается как удовлетворительное.

Хорошее молоко содержит бактерий меньше 500 тыс./мл, которые обесцвечивают МС не раньше 5,5 ч.

Микробы в молоко могут поступать при болезнях, в т. ч. молочной железы, несоблюдении санитарии при доении, хранении и транспортировке молока.

Ход опыта

В пробирку налить 1 мл раствора МС (5 мл насыщенного раствора МС в 195 мл дистиллированной воды) и 20 мл молока. Перемешать, залить слоем вазелинового масла или закрыть пробкой (для создания анаэробных условий) и поставить в водяную баню при 38°С. Отметить время, в течение которого произошло обесцвечивание молока.

Задание: 1. Выполнить опыт.

2. Определить количество бактерий в 1 мл молока.

3. По этому показателю сделать заключение о качестве молока.

4. В случае плохого качества молока указать предполагаемые причины этого явления и возможные пути их устранения.

Работа 45. Определение количества лактозы в молоке с помощью рефрактометра

Лактоза - основной сахар молока, его содержание в среднем у коровы 4,9%, козы - 4,4% и кобылы - 6,5%. Дисахарид состоит из остатков D-глюкозы и D-галактозы.

Сущность метода заключается в нахождении коэффициента преломления обработанного специальным методом молока и определении количества лактозы.

Ход опыта

В пробирку поместить 5 мл сыворотки молока и добавить 5-6 капель 4% раствора СаСl₂. Закрыть. Перемешать содержимое. Поставить в кипящую водяную баню. По истечении 10 мин охладить водопроводной водой.

Взять 1 каплю сыворотки и поместить на нижнюю призму рефрактометра. Определить коэффициент преломления и, пользуясь таблицей, рассчитать количество лактозы.

Задание: 1. Выполнить анализ.

2. Определить коэффициент преломления, а по нему - количество лактозы в молоке подопытного животного.

3. В случае отклонения содержания лактозы от ее нормы для этого животного указать предполагаемые причины.

4. Написать структурную формулу лактозы.

Количество лактозы (%) в зависимости от коэффициента преломлений (пД)

Количество лактозы (%) в зависимости от коэффициента преломлений (пД)

пД	Лактоза	пД	Лактоза	пД	Лактоза
1,3390	3,01	1,3404	3,70	1,3418	4,38
1,3391	3,06	1,3405	3,72	1,3419	4,44
1,3392	3,11	1,3406	3,77	1,3420	4,49
1,3393	3,16	1,3407	3,82	1,3421	4,54
1,3394	3,21	1,3408	3,87	1,3422	4,59
1,3395	3,26	1,3409	3,93	1,3423	4,64
1,3396	3,31	1,3410	3,98	1,3424	4,69
1,3397	3,36	1,3411	4,03	1,3425	4,74
1,3398	3,46	1,3412	4,08	1,3426	4,79
1,3399	3,47	1,3413	4,13	1,3427	4,84
1,3400	3,52	1,3414	4,18	1,3428	4,89
1,3401	3,57	1,3415	4,23	1,3429	4,95
1,3402	3,62	1,3416	4,28	1,3430	5,00
1,3403	3,67	1,3417	4,33	1,3431	5,05