- •Введение
- •Оформление работы:
- •1. Дата.
- •2. Тема: номер и название работы.
- •Организация учебного процесса по биохимии
- •Правила техники безопасности при работе в биохимической лаборатории
- •Тема 1. Реакция среды
- •Работа 1. Определение реакции среды молока и яйца с помощью универсальной индикаторной бумаги
- •Работа 2. Определение реакции среды бесцветных растворов с помощью прибора Михаэлиса
- •Работа 3. Определение рН гомогената мышечной ткани, раствора яичного белка с помощью прибора Михаэлиса Приготовление гомогената из тканей животных
- •Ход опыта
- •Лучи света
- •Матовое стекло
- •Работа 4. Определение рН растворов и биологического материала электрометрическим (потенциометрическим) методом
- •Вопросы для самоподготовки по теме 1
- •Тема 2. Буферные системы
- •Работа 5. Приготовление ацетатного буферного раствора и изучение зависимости величины рН от соотношения компонентов
- •Работа 6. Изучение действия на буферный раствор небольшого количества кислоты
- •Работа 7. Изучение действия на буферный раствор большого количества кислоты
- •Работа 8. Изучение действия небольшого количества щелочи на буферный раствор
- •Работа 9. Изучение действия на буферный раствор большого количества щелочи
- •Работа 10. Влияние разбавления водой буферного раствора на величину его рН
- •Вопросы для самоподготовки по теме 2
- •Тема 3. Коллоидные растворы
- •Работа 11. Получение гидрофобного коллоидного раствора гидроксида железа Fe(oh)3.
- •Работа 13. Диализ коллоидных растворов
- •Работа 14. Изучение механизма коагуляции золя железа
- •Работа 15 . Изучение защитного действия гидрофильных коллоидов (эмульсоидов)
- •Вопросы для самоподготовки по теме 3
- •Tеma 4. Адсорбция и абсорбция
- •Работа 16. Адсорбция органических красок животным углем
- •Работа 17. Определение количества уксусной кислоты, адсорбированной животным углем
- •Вопросы для самоподготовки по теме 4
- •Тема 5. Химия и обмен белков
- •Работа 18. Определение количества белка в гомогенате мышечной ткани, яйце рефрактометрическим методом
- •Работа 19. Определение белка по методу Лоури
- •Работа 20. Разделение смеси аминокислот методом распределительной хроматографии на бумаге
- •Работа 21. Определение количества аминокислот в биоматериале по азоту аминогрупп методом формольного титрования по Серенсену
- •Работа 22. Изучение действия пепсина на переваривание белка
- •Вопросы для самоподготовки по теме 5
- •Тема 6. Ферменты (энзимы)
- •Работа 23. Приготовление раствора фермента -амилазы (кф 3.2.1. 1) слюны
- •Работа 24. Обнаружение в слюне амилазы и определение специфичности ее действия
- •Работа 25. Изучение влияния рН среды на активность амилазы слюны
- •Работа 26. Изучение влияния температуры на активность энзимов
- •Работа 27. Изучение действия активаторов и ингибиторов на активность ферментов
- •Вопросы для самоподготовки по теме 6
- •Тема 7. Углеводы и их обмен
- •Работа 28. Изучение механизма переваривания углеводов и определение активности -амилазы (кф 3.2.1.1.) слюны
- •Работа 29. Обнаружение гликогена в тканях животных
- •Вопросы для самоподготовки по теме 7
- •Тема 8. Липиды и их обмен
- •Работа 30. Изучение растворимости жира
- •Работа 31. Определение кислотного числа жира
- •Работа 32. Определение йодного числа.
- •Работа 33. Исследование эмульгирования жира
- •Работа 34. Изучение механизма переваривания липидов и определение активности панкреатической липазы (кф 3. 1. 1. 3)
- •Работа 35. Реакция обнаружения холестерола в растительном и животном маслах.
- •Вопросы для самоподготовки по теме 8
- •Тема 9. Витамины
- •Работа 36. Обнаружение витамина а в жире
- •Работа 37. Обнаружение витамина д в жире
- •Работа 38. Обнаружение витамина с в биоматериале
- •Вопросы для самоподготовки по теме 9
- •Тема 10. Минеральные вещества и вода
- •Работа 39. Определение количества кальция в молоке и гомогенате мышечной ткани по де Ваарду
- •Работа 40. Определение содержания кальция в молоке и гомогенате мышечной ткани комплексонометрическим методом
- •Работа 41. Определение количества неорганического фосфора в молоке и гомогенате мышечной ткани
- •Вопросы для самоподготовки по теме 10
- •Тема 11. Молоко
- •Работа 42. Определение общей кислотности молока по Тернеру
- •Работа 43 Выделение казеиногена из молока и исследование его свойств.
- •Работа 44. Определение редуктазы молока
- •Работа 45. Определение количества лактозы в молоке с помощью рефрактометра
- •Вопросы для самоподготовки по теме 11
- •Рекомендуемая литература.
Работа 22. Изучение действия пепсина на переваривание белка
Пепсин - это простой белок-фермент М. м. 35000, который вырабатывается главными (фундальными) клетками дна сычуга жвачных животных, железистого желудка птиц и желудка моногастричных животных в виде пепсиногена (профермент) М. м. 42000). От последнего под действием НСl (или ранее образованного пепсина) отщепляется полипептид-блокатор, и он превращается в активный фермент пепсин, который при рН 1,5 - 2,5 (создает НС1) разрушает пептидные связи ( — СО — NH — ) белков в желудке. Пепсин гидролизует белки мышц, молока, яиц, крови, растительные белки (исключение составляют роговые белки-кератины и некоторые другие) до высоко- и низкомолекулярных полипептидов незначительных количеств аминокислот.
Ход опыта
Налить в 3 пробирки по 3 мл 0,01 М раствора НСl, а в 4-ю — 3 мл дистиллированной воды. В 1-ю пробирку внести белок кератин (несколько кусочков шерстинок), а в остальные по равному небольшому кусочку белка фибрина. Затем в 1, 2 и 4-ю пробирки прилить по 1 мл 0,2% раствора пепсина, а в 3-ю - 1 мл дистиллированной воды.
Все пробирки поставить для инкубации в водяную баню или термостат при 37 — 40C. По истечении 30 — 40 мин пробирки вынуть и посмотреть, что произошло в них с белком. Пробы можно встряхнуть.
Задание: 1. Выполнить опыт.
2. Отметить пробирку, где произошло растворение (гидролиз) белка. Сделать вывод - почему?
3. Указать, в каких пробирках белок не растворился и почему?
4. Объяснить роль НСl в процессе гидролиза белка.
5. Написать схему гидролиза белка.
6. Как назвать кератин и фибрин по отношению действия на них пепсина?
Вопросы для самоподготовки по теме 5
1. Белки. Понятие. Классификация по строению, происхождению в природе и организме, функции.
2. Свойства и биороль белков. Представители, пример.
3. Гидролиз протеинов и протеидов и его продукты (начальные, промежуточные и конечные), примеры.
4. Классификация аминокислот: биологическая (незаменимые и заменимые), химическая (кислые, щелочные, нейтральные), структурная (ациклические, циклические) – понятия, примеры.
5. Структура белковых молекул и основные связи в них между аминокислотами (примеры в виде схем-формул).
6. Специфичность белков, понятие, значение в биологии и практике.
7. Нуклеиновые кислоты. Понятие, виды, роль.
8. Нуклеотиды и нуклеозиды. Понятие и отличие по строению и роли. Примеры.
9. ДНК. Химсостав, строение (развернутая схема-формула фрагмента), роль. Принцип комплементарности в построениии молекулы ДНК. Пример.
10. РНК. Химсостав, строение (развернутая схема-формула фрагмента). Виды РНК.
11. Матричная (информационная) РНК. Понятие, химсостав, строение (развернутая схема-формула фрагмента), действующая структурная формула, синтех мРНК и биороль. Виды и роль триплетов (кодонов).
12. Транспортная (т) РНК. Понятие, химсостав, строение (развернутая схема-формула фрагмента), действующая структурная форма, синтез тРНК и биороль. Адапторный участок тРНК (антикодон, антитриплет), понятие, строение, роль. Акцепторный участок тРНК, понятие, строение, роль.
13. Рибосомальная (р) РНК. Понятие, химсостав, строение (развернутая схема-формула фрагмента), синтез рРНК и ее биороль.
14. Синтез ДНК и различных РНК. Механизм (изобразить через схемы-формулы) и значение этих процессов.
15. Синтез белка в клетке. Этапы (изобразить через схемы-формулы) и значение этих процессов.
16. Мутации нуклеиновых кислот и белков. Понятие, принципы, генномодифицированные продукты.
17. Биологическая ценность белков, азотистый баланс (понятие, виды).
18. Механизм переваривания белков у животных и человека. Ферменты, их действие, продукты гидролиза.
19. Нормо-, гипо- и гиперпротеинемия (понятия, причины, обнаружение). Последствия и возможные пути устранения гипо- и гиперпротеинемии.
20. Превращения аминокислот в клетках (промежуточный обмен), виды, роль.
21. Дезаминировапие аминокислот (понятие, виды, схемы, ферменты, роль).
22. Декарбоксилирование аминокислот (понятие, схема, ферменты, роль).
23. Переаминирование аминокислот (понятие, схема, ферменты, роль).
24. Гниение белков и при хранении мяса, молока, яиц (на примере триптофана, фенилаланина, тирозина, цистеина). Схема и роль процесса. Обезвреживание образующихся при этом ядов.
25. Утилизация пуриновых и пиримидиновых оснований (синтез мочевой, кислоты, аллантоина и других веществ). Схемы и роль процессов.
26. Пути обезвреживания избытка аммиака в организме животных и человека (синтез мочевины, образование амидов аминокислот и др.). Схемы, место протекания и роль процессов.