Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
ГОС. ЭКЗАМЕН ПО БИОЛОГИИ.doc
Скачиваний:
48
Добавлен:
23.08.2019
Размер:
1.81 Mб
Скачать

Биотехнология.

1. Клеточная инженерия. Культивирование органов, тканей, клеток in vitro, использование их в биотехнологии. Питательные среды. Эксплантанты. Тотипотентность растительных клеток. Получение изолированных протопластов. Слияние протопластов.

1902 г. – Габерланд пытался вырастить изолированные листочки на растворе сахарозы. Но знаний было мало, неудачно. Выдвинул гипотезу о тотипотентности соматической раст. кл. (тотум – весь, потенция – сила) – способность сомат. кл. образовать целое раст. с теми же св-ми. Из кусочка можно получить целое растение (вегет. разм.). Эксплант – часть органа или ткани выращ. на пит. среде, или для получения каллуса. Каллус – ткань, возникшая путем неорганизованного деления клетки, без дифференциации. Для большинства раст. взятие экспланта лучше в фазу активного роста. Некоторые раст. лучше образуют побеги в фазу покоя (лилия). А тюльпан – в период сухого хранения. Взятые экспланты стерилизуют: Обрабатывают мылом, в боксе раствором ядовитых в-в (NaClO - гипохлорат, CaClO2, 0,5-0,7% р-р, 15 мин.), препарат ртути 0,1% р-р., пероксидом. Промывают стерильной водой от яд. в-в. Осн. сложность введения в культуру асептика. Можно использовать для стериализации антибиотики (пенициллин). Эксплантами м.б. любые части растения, но корни не берут.

При оздоровлении берут только апек. меристему. Складывают в мешочки, промывают в проточной воде 2 часа. Затем в теплой, с добавлением детергента (ПАВ, ТВИН-20, мыло, шампунь). Далее стериализация в ламинарном боксе. Заливают в стер. стакане р-ми хим. в-в (сулема, диацид, пероксид) – 5-15 мин. Промывают стер. водой 3-5 раз в течении 10 мин. Мешочки достают, вершинки в петри. В мокрой капле, пинцетом, извлекают меристемы (0,1-0,3 мм.). На игле переносят на пит. среду. Ауксины доб. нельзя.

in vitro выращивают на пит. средах. 1) Универсальная Мурасига-Скуга: агар (3,5 гр.), макросоли, CaCl2, микросоли, хелат железа, витамины (В1 – тиамин, В6 – пиридоксин, РР, аскорб. к-та, пантотеновая к-та, фолиевая к-та), глицин, набор а/к, ИУК, сахароза. 2) Среда Гамбурга. 3) Среда Бейца для определенных цветов. В среды вводят минеральные соли с макро- и микроэлементами, витамины, а/к, сахара. Среды бывают жидкие и твердые. Агара 1-5%. Регулируют рН. Иногда вводят природные соединения: кокосовое молоко, гомогенизат банана. Каусообразование вызывает большая доля ауксинов 24Д, 3,6 мг/л. среды. Условия культивирования клеток и тканей in vitro: Температура 20-25 градусов. Для луковичных 16, манстера – 30. Освещение: люминесцентные лампы, ОТ-400 – тепловые лампы. 1-5 килолюкс. Длина дня 15-16 часов (длинный световой день). Для клубнеобразования – короткий день. Низкая и высокая освещенность не желательна, т.к. подавляется рост.

Биотех. – раздел биологии и отраслей производства с использованием живых организмов. Это наука о клеточных и генных методах и технологиях. Значение: 1) в растениеводстве: улучшенные и новые генотипы раст. Нужно накормить человечество, которое растет. К 2050 г. – 10 млрд человек. 2) в жив-ве: трансплонтация эмбрионов. 3) ветеринария: получение вакцин, сывороток, витаминов. Трансгенные кролики (дойные) дают питательное молоко. 4) с/х микробиология: азот-фиксация зерновых культур. Препараты для защиты растений.

Протопласты – растительные кл. без клеточной целлюлоз. стенки. Получают из каллусной или суспензионной культуры, используя ферментный метод. Ферм.: гемицеллюлаза, пектидаза. рН=5,4-6,2. В р-ре сахарозы. Эту культуру промывают на центрифуге от ферментов и получают протопласты. Протопласты выращивают на среде Б5-Гамбурга, Ногато и Токебе, Мурасига-Скуга. рН=5,6. Плотность засева – в 1 мл. от 3 тыс. до 10 тыс. штук. Можно высадить в расплавленный агар, в агар-среде протопласты синтезируют кл. стенку, делятся и образуют эмбриоиды. Культивирование проточное или цикличное. Иноклиум (трансплант) – часть суспензионной культуры, используемая для пересадки в свевжую среду. Протопласты можно смешать – это будет соматическая гибридизация (парасексуализация). Слияние стимулирует полиэтилгликоль (ПЭГ). 3 кап. на 1 мл. суспензии кл. Образуются соматические гибриды – цибриды. 1978 – Малкерс провел первую сомат. гибридизацию, сливая протопласт картофеля и томата. Одно ядро ликвидируется (картофель ликвидир-ся). Есть внеядерные ДНК (протопласты, хлоропласты, митохондрии). Некоторые св-ва остаются. Томат + морковь = л. как у моркови.

2. Клональное микроразмножение и оздоровление растений. Индукция развития пазушных меристем. Микрочеренкование побегов, сохраняющих апикальное доминирование. Регенерация растений из каллусов. Этапы клонального микроразмножения растений. Культура апикальных меристем для получения свободного от патогенов посадочного материала. Криосохранение и банк клеток растений.

Клональное микроразмножение растений in vitro. С давних пор существует вегет. способ размн. Клон (отпрыск, побег, черенок) – отпрыски растений размн. неполовым путем и они не являются индивидуумами, а лишь частью клона материнской особи и идентичны ей и между собой. Этапы клон. микроразмн.: 1) Выбор раст. донора. Взятие у него экспланта. Культивирование in vitro. Эксплантами м.б. любые части растения, но корни не берут. 2) Собственно микроразмн. 3) Укоренение стеблей, депонирование растений, растения содержат при низкой температуре на свету. 4) Высадка в грунт, теплицу, подращивание, реальзация.

Размножение активацией пазушных меристем. Снимают апикальное доминирование, добавленирем в среду цитокининов, которые приводят к образованию пазушных побегов. Их отделяют и укореняют (2-х этапное получение растений), или культивируют дальше.

Размножают: картофель, томат, огурцы, свекла, роза, гвоздики, папоротник, туя, можжевельник, яблоня, слива, вишня, виноград, крыжовник. Размножение растений индукцией адвентивных почек. Адвентивные почки – возникшие из клеток и тканей растений, обычно их не образующие. Получают из любых органов листа, высаживают на среду где цитокининов больше чем ауксинов. Размножают: томат, лук, тюльпаны, гладиолусы, чеснок,. Сажаем в колбу нарезанные части листа. Корней не будет. Микрочеренкование in vitro побега, сохраняющего апикальное доминирование. Черенкуют, укореняют. Питательная среда ИУК. Работу проводят в ламинарном боксе где дует стерильный воздух (0,4 м/с). За 30 мин. до работы включить продувку и УФЛ. В бокс поставить спиртовку, спички, 2 флакона 70 и 96% спиртом и стакан для маточных растений. Инструменты: скальпель, пинцет. Чашка-петки. Протереть спиртом, сесть в бокс, нарезать, посадить, подписать, накрыть колпачком, резинкой, в штатив. Размножают: картофель, виноград, плодовые, семечковые.

Все вегетативно размн. растения накапливают внутриклеточных паразитов. Следовательно снижается качество, урожайность, сохранность на 50%. 1949 г. французы установили, что апикальная меристема у вирусных растений (0,1-0,3 мм) не содержит вирусов. А в других клетках их содержится сотни штук. Перемещаются по проводящим тканям. А т.к. в меристемах нет проводящих тканей, они их не поражают. Посадка оздоровленного материала повышает урожайность на 40-60% (300%). Урожай с 1 га и пораженность: Голландия - 346 ц., 0,1; Франция – 333 ц., 0,33; Германия – 250 ц, 0,5; ПК – 90-100 ц. Сильно заражены сады в Молдавии (на 80% снижен урожай), вишня – 35-96%, слива – 5-95%, картофель 25-88%. Первые оздор. раст. получили во Франции – георгины, нарциссы, картофель. Использование термо- и химиотерапии при оздоровлении от вирусных болезней. Термо-: применяется критическая для растений температура, которая снижает конц. вирусов и увелич. безвирусную зону в верхушечной меристеме. Это позволяет увеличить размер экспланта, и увел. % приживаемости in vitro. Режимы: 1) для клубней, 37-38 град., круглосут., освещ. 1-1,5 кЛюкса, влаж. 80-90%. Продолж. 10-20 сут. 2) Растения в горшках, 37-38 град, 4-6 кЛюксов, вл: 90-95%, 15-25 сут. 3) Растения in vitro, темпер. вверху проб. 40-41 град, внизу 37-38 град. (поставить низ в воду), 10-20 сут. Свободная от вирусов зона увел. в апексе до 0,25-0,5 мм. Химиотерапия – основывается на доб. в пит. среду в-в ингибиторов вирусов. Для раст. безвредна. Применяют РНК-азу (панкреатич. рибонуклеаза). Доб. на поверх. среды 0,01 % р-р, после стериализуют. Увел-ся на 30-40%, приживаемость на 10-35%, выход здор-х раст. в 2 раза. Антибиотики.

Биотехнология оздоровления картофеля. Этапы: 1) подготовка клубней, хемотерапия, проращивание (1-2 см. ростки), проверка на вирусы методом ИФА. 2) взятие эксплантов: верх. ростки, их стерилизуют и вычленяют меристемы. 3) размножение меристем, потомство проверяют на отсутствие вирусов электр. микроскопом или ИФА. Здоровые размн. микрочеренкованием, а больные выбраковывают. 4) при накоплении in vitro их пересаживают в почву, подращивают и высаживают в теплицы. Проверка ИФА. 5) ускоренное размн. всеми доступными способами ( черенкование побегов, деление клубней). 6) размножение тепличных клонов в полевых условиях. 7) поддержание коллекции сортов in vitro. Уборка: за 10 дней скашивают ботву (кожура будет плотней), копают, закладывают клубни каждого мешка в отдельный мешочек. Хранят при 1-3 град., влаж.: 85%. Весной клубни просматривают, в случае обнаружения больных клубней, бракуют весь мешок. Остальные высаживают в поле (питомник размножения).

Оздоровление древесно-кустарниковых растений. (Роза). Древ.-куст. породы имеют большое значение в озеленении. Перспективные методы размн. новых сортов, гибридов, устойчивых к болезням, эстетичны, солее- и газоустойчивы. Древ. культур более 200 видов. Этапы: 1) введение в культуру in vitro. 2) индукция морфогенеза. 3) ризогенез. 4) пересадка регенератов в субстрат. Для клонирования экспланты брать у молодых деревьев. У 100-летней сосны приживаемость – 2 экспланта, у 5-летней – 98. Финны восст. леса из in vitro. Роз – 25 тыс. сортов и форм. В пит. Дельбарда берут маточные раст. из теплицы, срезают молодые побеги, разрезают на части, стерилизуют в 70% этаноле 1 мин, 20 мин. в 7% гипохлорите кальция. Промывают в 3 порциях стерильной воды и из почек вычленяют меристемы, купол., высаживают в среду. Через 20 дней высаж. в свежую среду. Через 5 пересадок образуются конгломераты с 5 веточками, укореняют. Высаживают в контейнер 7-8 см. Высаживают под пленку. Через 8-9 мес. получают посад. материал. Особенности: среда Мурасига-Скуга, почку лучше срезать клином. 25-28 град., длин. день (16 ч.). Перед укоренением выдержать неделю при темп. 5 град.

Диагностика вирусов при оздоровлении. Серологическая р-ция (раньше). Основана на р-ции агглютинации. Капелька сока + капелька антигенов = если образуются хлопья, то есть в соке вирусы. При слабой зараженности можно и не определить. Сейчас имеет значение диагностика вирусов. Методы: 1) электр. микроскопия. 2) серологический. 3) ИФА: прямой, непрямой, элиз-отест, сендвич-метод, твердый, изотопный, флуоресцентный (ФИФА). В основе ИФА 2 реакции: 1) иммунная – взаим-е антитела с антигеном. 2) ферментная – исп-ся фермент пероксидаза, которая разрушает пероксид до воды и О. Если к этому О доб-ть в-во, при добавлении кот. изм-ся окраска, то можно визуально определить эту реакцию. Освещают, в каких ячейках положительный результат, там вирусы. Оценивают результаты на приборах – унискан, или визуально. Для определения вирусов раст. выпускают наборы. Производительность анализа при компьютерном обесп. – 1000 за смену, а при ручной -600. Антитела получают микроклональным размн. Кролику вводят вирус х картофеля, на вирус обр-ся антитела, их берут и выращивают in vitro.

Антигены – возбудители инфекций (вирусы). Субстрат – пероксид, гидрохинон. Гидрохинон при окислении приобретает коричневую окраску. Конъюгат – антитело, которому пришивается метка. Метка – фермент пероксидаза (из хрена).

Криосохранение – хранение при темп. жидкого азота (-196). В кл. прекращается обмен в-в, но сохр. все св-ва, не происходит молек. изменения. «-» фоновая радиация – убивает некоторые составные части молекулы (10% нарушений возникнет лишь через 32 тыс. лет). После разморозки кл. сохр. способность к морфогенезу. ВИР (всерос. инст. раст-ва) хранит семена в банках. Кл. готовят: 1) медл. замор-е. 2) сверхбыстрое замор-е. Фактор гибели кл. – образование льда (рвет кл.), обр-ся при темп. (-20 / -60), при -100 прекращается образование льда. Важно проскочить район темпер. с образованием льда. Избегают образование льда добавлением криопротектора – сахара, этиленгликоль – повышает вязкость. Обычно применяют смесь. Меристематические кл. лучше выживают после хранения в ж. азоте; суспенз. культуры риса, моркови, кукурузы, сах. тростника; эмбрионы табака, белладонны; каллусные ткани. Сохраняют кровь человека для последующего клонирования. Выращивание органов.

3. Генетическая инженерия. Этапы получения ГМО. Получение растений с повышенной продуктивностью. Повышение устойчивости растений к стрессам, низким температурам. Получение растений, устойчивых к болезням, вредителям и ядохимикатам. Виды векторов. Векторы на основе Ti- и Ri-плазмид агробактерий. Биобезопасность.

Генная инженерия – когда в гены хозяина вшиваются другие гены, или вышивается ген. Масло рапса очень горькое, вырезаем ген, который кодирует к-ту. Созданы сорта рапса, которые заменяют солярку. Конструирование ДНК (на примере плазмиды). Центрифугирование 4-6 ч., 20 тыс. оборотов. Получают плазмиды кишечной палочки – 1) ДНК разрезаем ферментом (рестриктаза) по липким концам. Ищет последовательность ААТТ и режет через эти основания. Фермент надо удалить в воде, центрифугой. 2) берем ген, который надо пришить. Пришиваем другими ферментами в ДНК (лигаза), она сшивает по липким концам. 3) Получаем гибридную (рекомбинантную) ДНК. Отмывка фермента центрифугированием. Получение инсулина на основе методов генной инженерии.Получают плазмиды кишечной палочки – 1) ДНК разрезаем ферментом (рестриктаза) по липким концам. Ищет последовательность ААТТ и режет через эти основания. Фермент надо удалить в воде, центрифугой. 2) берем ген ДНК человека, который надо продуцирует инсулин. Пришиваем лигазой в ДНК, она сшивает по липким концам. 3) Получаем гибридную (рекомбинантную) ДНК. Отмывка фермента центрифугированием.

Этапы технологии получения ГМО: 1) поиск и удаление нужного гена из организма донора. 2) клонирование гена. 3) встраивание гена в вектор трансформации растения. 4) трансформация растительной клетки (плазмида, протопласт, каллусная ткань). 5) образование каллусной ткани путем размножения клетки и получения побегов, которые потом укореняют. 6) получение целых растений. 7) проверка ГМР на продуктивность и биобезопасность.

Повышение продуктивности растений - Методами ГИ получены растения с высоким содержанием белка, жира, сахаров. Зерно злаковых бедно лиз-, три-, тре-. Получена трансгенная кукуруза, обогащенная лиз-. рапсовое масло без беруновой к-ты. Для увеличения продуктивности пришивают гены С4-фотосинтеза к С3-фотосинтезу (только на свету). получен рис (ген из кукурузы). Пришиты гены, контролирующие количество хлоропластов и хлорофилла А и В. В раст. томата, картофеля пришит ген СПС (сахаро-фосфат-селитетазы) из кукурузы. У этих растений улучшен метаболизм. Получены гвоздики и хризантемы с нетрадиционной окраской цветков за счет образования антоцианов.

Получение устойчивых к стрессовым воздействиям. Засуха, переувлажнениние, высокая или низкая температуры, кислое рН – стрессы, снижающие урожайность. Стрессовый ответ – синтез в растении, м.о. молекулярных в-в – осмопротекторов (пролин, глицинбеталин). Из Е.coli получен ген синтеза пролина, его перенесли в газонные травы. Табак – переносит высокую конц. солей.

Получение устойчивых к насекомым. На сегодня такая устойчивость достигается единственным способом - внедрением генов из другой почвенной бактерии Bacillus thuringiensis (Вt). Такие растения часто называют по первым буквам латинского названия этой бактерии (Bt-кукуруза, Bt-хлопок). В начале прошлого века в природе найдены Вас. thyringiensis. При спорообразовании образуют кристалл токсина (яда), который убивает насекомых. Белок в кишечнике насекомого, под действием пищеварительных факторов превращается в яд – прототоксин (энтомотоксин). Выращивают бациллу, получают споры. Используют как биологический препарат (через 3 дня смерть). Из генома бациллы выделен ген Bt-2. Он интегрируется в геном растения методом агробактериальной трансформации (табак, томат, картофель, соя, рис, брокколи). Получены ГМР с тройной устойчивостью: гербицидам, вирусам, насекомым.

Получение картофеля устойчивого к колорад. жуку: Берем дохлые личинки колорад. жука, погибшие от энтомотоксина. Выделяем и сажаем в пит. среду. Отбор колоний по черным гранулам. Отобранные выращивает в пит. среде. Выделяем из бактерий плазмиды, несущие ген энтомотоксина. Плазмиды режут рестриктазой на 4 части. Каждую часть пришивают к плазмидам E.coli. Выращивают E.coli, отбирают по черным гранулам колонии. Выделяют рекомбинантные плазмиды. Переносят на Ти-плазмиду. Рекомб. Ти-плазмида (селективный ген, ген энтомотоксина, Т-область, Вир-область). Агроб. с Ти-плазмидами добавляют к растениям в стерильных условиях. Регенерируют на среде с цитокининами и антибиотиками. Конамицин убивает клетки, трансформированные кл. устойчивы к канамицину. Отбор. Размножение. Проверка.

Получение устойчивых к грибной, бактериальной и вирусной инфекции. При нападении на раст. фитопатогенов в них вкл. каскад мех. защиты. Синтез токсичных для патогена соединений, или структур-барьеров (лигнина, гликопротеидов), которые прекращают распространение патогенов. В ответ на внедрение грибов образуется фермент хитиназа, глюконаза, который ингибирует развитие грибов. Получены картофель, табак, рис, люцерна, рапс. Животные кл. синтезируют интерферон в ответ на вирус. Антивирусный эффект получен: 1) при введении гена интерферона человека (картофель, табак, турнепс). 2) при введении гена синтеза белкового капсида ВТМ (вирус табачной мозаики). 3) трансформация кл. генами, кодирующие синтез фитоалексинов. В-ва, которые обладают фунгицидным, антимикробным действием (картофель устойчив к фитофторе).

Получение устойчивых к гербицидам биалофос, глифосат, бромоксилин. Применяются гербициды сплошного действия, уничтожающие сорняки и культурные растения. А-группа гербицидов – избирательного действия очень мала (газон, одуванчик). Пр.: Раундап. Трансгены, устойчивые к гербицидам получают вводя гены бактериального или растительного происх-я. Из сорняков выделен ген рвсА, при его введении получают устойчивость к атразину. Из клетки Е.coli получен ген аroА, к гербициду Раундап (глифосат. к-та). Перспективно введение генов кодирующих ферменты, которые разрушают определенный гербицид. Пр.: ген синтеза монооксигеназы разрушает гербицид 2,4Д. А ферм. нитрилаза разрушает гербицид брокксилин.

Перенос генов в кл. и их трансформация (встраивание в геном), осуществляется специф. стр-ми – вектороми. Виды векторов: 1) Биологическая баллистика (для однодольных). Используют суспензионную культуру кл. растения, каллусную ткань, или 5-дневные зародыши, на мельчайчие частицы – Au, вольфрам. Напыление ДНК и бомбардировка из биопушки за счет перепада давления, 10-15% выживут и трансформируются.

Генная пушка. В 1988 г. был предложен другой метод, пригодный для генетической трансформации большинства организмов, включая растения. Он основывается на механическом переносе ДНК сорбированной на микрочастицах твёрдого вещества (изначально золота), которые разгоняются до высоких скоростей с помощью генной пушки (Gene Gun) и выстреливаются в ткани трансформируемого организма. Попадая в клетки, чужеродная ДНК встраивается в хромосомы случайным образом и также наследуется по законам классической генетики. Этим методом удобно трансформировать растения, которые плохо поддаются агробактериальной трансформации. Например, RR-соя.

2) Метод прямого переноса генов в раст.: а) трансформация раст. протопластов и их слияние. б) микроиньекция ДНК (эфф-ть 10-20%). в) электропорация – ДНК проникает через поры в мембране под действ. импульсов высокого напряжения (эл. тока). г) упаковка в липосомы. Специфические тельца, оболочка из фосфолипидов, которые защищают ДНК от разрушения нуклеазами раст. кл.

3) Вектор на основе Ти-плазмиды Agrobacterium tumifaciens – живет в почве, способна передавать часть своих генов из Ти-плазмиды в раст. кл. Кл. размн., образуя опухоли на корнях. Бактериальный рак: У прокариот есть кроме осн. ДНК плазмиды. Гены вшиваются в раст. кл. – это природные св-ва. В плазмиде Т-область и Вир-область. Гены Вир-область кодируют гены Т-области, тащат в растительную кл. и вшивают. При этом маскируют ее. Ag образует опухоль (корончатые галлы), имеет высокую внехромосомную плазмиду Ти-плазмиду (обр. опухоль). Эта плазмида – ест. вектор для переноса, включения и экспрессии ген-информации в растение. В Ти-плазмиде есть гены, кодир-е синтез белков опинов: октопин и нопалин. После заражения часть Ти-плазмиды встр-ся в хромосому раст. кл. Меняет метаболизм, синтезируя опсин. Этот участок называется Т-область, а в раст. кл. Т-ДНК. Т-область занимает 10% Ти-плазмиды и создает гены, отвечающие за образование опухоли, синтез опинов, подавление дифференцировки кл., т.е. гормон незавершенности.

Недостаток: 1) образуются опухолевые кл., что затрудняет регенерацию целых растений. 2) крупная Ти-плазмида затрудняет адресную вставку гена в нее.

Сейчас сконструированы производные Ти-плазмиды, в кот. остается Т-область, но без ее структурных генов, вместо них вставляют вшиваемые гены растений. Можно пришить до 2-х чужеродных генов.

Позже обнаружен Agrobacterium rhizogenos. При заражении раст. вызывает образование мелких корешков. За это отвечает Ри-прлазмида. Более удобна как ест. природный вектор. Трансформация ею растит. клеток способны к регенерации здоровых растений.

4) Бинарный и промежуточный векторы. Сконструированы на основе Ти-плазмиды. Из нее с помощью рестриктаз вырезают Т-области и вставляют ее в вектор для клонирования в кл. Е.coli. Е.coli размножают. Внутрь Т-области встраивают чужеродный ген и вновь размножают. Полученную рекомбинантную плазмиду Е.coli вводят в агробактерию, несущую полную Ти-плазмиду. В рез-те 2-го кроссинговера Т-область рекомбинацией плазмиды включается в Ти-плазмиду. Испол-ся для передачи гена растению.

Бинарный – агробактерии содержащие 2 разные Ти-плазмиды: 1 – несет Вир-область и обесп. интегрирование в геном раст. кл. Т-области с любыми генами другой Ти-плазмиды.

5) Векторы на основе ДНК вирусов раст. ДНК содерж. вирусы поражающие растения. Таких вирусов 1,5-2%. Берут вирус полосатости кукурузы или вирус мозайки цветной капусты. Имеют одноцепочечную НК. В кл. образуется 10 в 6 степень копий вируса и много НК. У них малый геном и сильный промотр, что обесп. эффективную экспрессию чужеродных генов (но они патогенны). Вирусы не встраиваются в геном растения. Их можно ликвидировать агроинфекцией, а ввести в кл. Ти-плазмиды.

Биобезопасность. Первые генетически модифицированные (или трансгенные) продукты были разработаны американской бывшей военной компанией Монсанто в конце 80-х годов. С 1996г. общая площадь посевных площадей под трансгенными культурами выросла в 50 раз и в 2005г. составила 90 млн га (17% от общей площади). Наибольшее количество посевных площадей засеяно в США, Канаде, Бразилии, Аргентине и Китае. При этом 96% всех посевных площадей принадлежит США. Биобезопасность – защитить человека и цивилизацию от опасных для жизни и здоровья людей биологических в-в, ГМО и полученных из них продуктов. ГМО и продукты из них: вновь полученные сорта, гибриды должны пройти лабораторный и полевой контроль, чтобы не попали мутанты и с низкими качествами. Должна быть Гос. система сортоиспытания, регистрации, что снижает эту опасность. Первое растение для питания в 1997 г. – томат. ГМО могут влиять на репродуктивное здоровье. Мировой терроризм исп. в своих целях биоресурсы. Методы защиты: 1) Санитарно-гигиеническая экспертиза (инст. пит. РАН): опред. хим. состав раст. и ГМО, не ухудшилась ли усвояемость, не вызывает ли аллергию, не токсично, не мутагенно, не канцерогенно. 2) Проводят проверку по действию на почву, вредителей. 3) Медико-биол. оценка пищ. прод. (инст. пит., минздрав, инст. сыворотки). 4) Гос. контроль. Регистрацию ГМО в США осуществляет 3 министерства. В США действует «Национальный центр по биотех.», «Комиссия нац. стратегии по биотех.». Ежегодно на Биотех. тратится 11 млрд. Пытаясь защититься от ГМ-культур многие страны ввели маркировку на продуктах с ГМО, или стали продавать их по очень низкой цене. На Российском рынке ГМ-продукты появились в 90-е годы. В настоящее время в России разрешенными являются 16 сортов ГМ-культур. В России выращивание ГМ-культур официально запрещено, а вот импорт ГМ-продуктов почему-то разрешен.