5.6. Качественное определение уробилиновых тел (реакция Флоранса).

Анализ мочи на уробилиновые тела проводится по назначению врача. Уробилин в моче определяют по реакции Флоранса.

Принцип метода: качественные пробы (проба Флоранса, реакция Богомолова и др.) основаны на ускорении окисления уробилиногена путем прибавления окислителя.

Подготовка пробы.

• При наличии в моче большого количества белка его удаляют.

• Определение производят в профильтрованной моче слабокислой реакции.

• Билирубин препятствует определению уробилина, поэтому его удаляют. Вначале прибавляют к моче 1—2 капли настойки йода, которая окисляет уробилиноген в уробилин, затем к 8 мл мочи прибав­ляют 2 мл раствора хлорида кальция (100 г/л), приливают 2 мл раствора аммиака (100 г/л), подкисляют несколькими каплями уксусной кислоты, мочу фильтруют. Определение уробилина производят в фильтрате.

Ход исследования:

К 10 мл профильтрованной мочи добавляют 3—6 капель концентрированной серной кислоты. Содержимое пробирки перемешивают и прибавляют 3—4 мл эфира. Пробирку закрывают резиновой пробкой, затем осторожно перемешивают. В другую пробирку наливают 2 мл концентрированной хлористоводородной кислоты, на которую наслаивают эфирную вытяжку из первой пробирки. При наличии уробилина на границе двух сред образуется розово-фиолетовое кольцо. В моче здорового человека проба Флоранса положительна, у новорожденных уробилиноген в моче не определяется. Исчезновение уробилина из мочи на длительное время при одновременном увеличении билирубина в крови указывает на неблагоприятное течение заболевания. Такая картина может иметь место при пе­реходе хронического гепатита в цирроз печени, при желтой ат­рофии печени, при злокачественных новообразованиях, сопро­вождающихся желтухой.

Клиническое значение.

Верхняя граница нормы уробилиногена в моче около 17 мкмоль/л (10 мг/л). В клинической практике определение уробилинурии имеет значение для выявления поражений паренхимы печени, особенно в случаях, протекающих без желтух; для дифференциальной диагностики желтух (при механической желтухе уробилинурии нет).

5.7. Микроскопическое исследование мочи

Микроскопическое исследование осадка мочи проводят ори­ентировочным методом при общем анализе и количественно для более точной оценки степени лейкоцитурии и гематурии, подсчетом форменных элементов в камере Горяева.

Подготовка осадка мочи для микроскопирования.

Мик­роскопическому исследованию подлежит первая утренняя порция мочи. После предварительного перемешивания берут 10 мл мочи, центрифугируют 10 мин при 1500 об/мин. Затем центрифужную пробирку с мочой резким движением опрокидывают, быстро сливают надосадочную жидкость в пустую банку. Переводят пробирку в исходное положение, осадок хорошо перемешивают, каплю помещают на предметное стекло и осторожно прикрывают покровным стеклом.

Ход исследования:

Вначале материал рассматривают при малом увеличении (окуляр 7—10, объектив 8), конденсор при этом опускают, несколько суживают диафрагму, затем препарат детально изучают при большом увеличении (окуляр 10,7; объектив 40).

П росмотр препарата проводят по общепринятой схеме:

На малом увеличении можно обнаружить клетки, цилиндры, яйца паразитов и крупные кристаллы. Элементы осадка делятся на организованные (эпителий, элемен­ты крови, цилиндры) и неорганизованные (соли).

Эпителий

плоский - большие (в 3 - 4 раза больше лейкоцитов), широкие полигональные клетки с одним ядром и мелкозернистой цитоплазмой. Встречаются группами и пластами.

переходный - клетки различной формы и размера, имеют желтоватую окраску, содержат довольно крупное ядро. В нормальной моче встречаются единичные экземпляры.

почечный - небольшие округлые или четырехугольные клетки с признаками дегенеративных изменений в цитоплазме (зернистость, вакуолизация), часто располагающиеся виде групп и цепочек. В нормальной моче не обнаруживается.

Клиническое значение

Эпителиальные клетки слущиваются со слизистой мочевыводящих путей. Большого диагностического значения не имеют. При воспалительных процессах, травмах, прохождении мочевого камня их количество может увеличиваться.

Лейкоциты

Лейкоциты обнаруживаются в моче в виде небольших зернистых клеток правильной округлой формы серого цвета. Лейкоциты в моче представлены, в основном, нейтрофилами и содержатся в нормальной моче в небольшом количестве: у мужчин от 0 до 3 лейкоцитов, у женщин – от 0 до 5 в поле зрения.

Лейкоцитурия – от 6 до 20 и более лейкоцитов в поле зрения Пиурия – от 60 до 100 и более лейкоцитов в поле зрения.

Клиническое значение

Лейкоцитурия наблюдается при воспалительных процессах в почках и мочевыводящих пу­тях. При некоторых состояниях внешний вид лейкоцитов может меняться. При нефротическом синдроме, например, лейкоциты могут уменьшаться в размерах, при пиелонефритах (щелочная реакция, низкая плотность) - увеличиваться. При циститах лейкоциты часто бывают деформированы.

Эритроциты

В норме не обнаруживаются, допускаются единичные эритроциты в препарате. Находящиеся в мочевом осадке эритроциты в зависимости от относительной плотности и рН могут выглядеть по-разному. Не измененные эритроциты желтоватого цвета содержат гемоглобин, а измененные (выщелоченные) бесцветные, имеют вид одноконтурных или двухконтурных колец. Сморщенные эритроциты обнаруживаются при высокой плотности мочи, выщелоченные эритроциты - при длительном их пребывании в кислой моче и при низкой относительной плотности.

Выделение эритроцитов с мочой называют гематурией. Если эритроциты обнаружива­ются макроскопически - это макрогематурия, если только микроскопически - микрогематурия. Ложная гематурия – это когда к моче примешивается кровь из половых органов.

Клиническое значение

Появление в моче измененных эритроцитов имеет важное ди­агностическое значение, так как они чаще всего почечного происхождения и встречаются при нефритах, туберкулезе почек и других тяжелых поражениях этого органа. Неизмененные эритроциты более характерны для поражения мочевыводящих путей - цистит, мочекаменная болезнь, уретрит.

Цилиндры

Хорошо выявляются и сохраняются только в кислой моче. Цилиндры являются белковыми слепками с внутренней поверхности дистальных канальцев почек и имеют цилиндрическую форму. Образуются из свернувшегося белка секретируемого эпителием дистальных канальцев и слущиваясь, попадают в мочу.

Различают цилиндры:

гиалиновые - нежные, бледные, почти прозрачные образования, прямые и извитые, концы их закруглены или неправильно обломаны;

восковидные - очень толстые, короткие с желтоватым оттенком воска, хорошо контурированы;

зернистые - короткие широкие, состоят из зерен различной величины, имеют темный, часто желто-коричневый цвет;

эпителиальные - имеют четкие контуры, состоят из клеток почечного эпителия;

эритроцитарные - желтого цвета, состоят из массы эритроцитов.

цилиндроиды – ложные цилиндры это образования цилиндрической формы, органического и неорганического происхождения, имеющие внешнее сходство с истинными цилиндрами. Они отличаются тем, что не имеют продольной исчерченности, контуры их неправильные, а концы раздваиваются.

Если поверхность цилиндра плотно покрыта эритроцитами, лейкоцитами, эпителиальными клетками, то такие цилиндры называются соответственно – эритроцитарные, лейкоцитарные, эпителиальные. Если налипшие элементы подверглись дегенеративному распаду, то любой из выше перечисленных цилиндров может стать зернистым.

Клиническое значение

В норме в суточной моче могут быть единичные гиалиновые цилиндры. Встречаются в большом количестве уже при небольшой протеинурии, обнаруживаются практически при любой почечной патологии. Восковидные цилиндры встречаются при хронических заболеваниях почек со значительной протеинурией, например, при нефротическом синдроме.

Слизь

В нормальной моче не встречается. Появляется при заболеваниях мочевы­водящих путей - уретритах, простатитах, циститах.

Бактерии

Нормальная моча бактерий не содержит, но после длительного стояния в ней могут появиться непатогенные микроорганизмы: Bacterium ureae, Micrococcus ureae, Sarcina ureae. Патологического значения они не имеют. При воспалении почек и мочевыводящего тракта в моче могут содержаться патологенные бактерии (стафилококки, стрептококки, кишечная палочка), паразиты (трихомонады, острицы, эхинококк), дрожжи.

Кристаллы солей

В кислой моче встречаются:

кристаллы мочевой кислоты - разнообразной формы (ромбической, шестигранной, в виде бочонков, брусков и др.), красно-бурого или желтовато-бурго цвета, макроскопически в осадке мочи имеют вид золотистого песка;

ураты - аморфные мочекислые соли - мелкие желтоватые, часто склеенные группами зернышки, макроскопически имеют вид плотного кирпично-розового осадка;

оксалаты - бесцветные кристаллы в форме почтовых конвертов;

сернокислая известь – ввиде тонких, бесцветных игл или розеток;

В щелочной и нейтральной моче встречаются:

фосфаты - аморфные массы солей сероватого цвета (мелкозернистые), макроскопически – осадок белого цвета;

трипельфосфаты - бесцветные яркие кристаллы в виде гробовых крышек или длинных призм;

мочекислый аммоний - желтые непрозрачные шары с шипами на поверхности.

Клиническое значение

Большое количество кристаллов мочевой кисоты обнаруживают при пневмонии, лейкозах, тяжелой почечной недостаточности, но неявляется признаком подагры или мочекаменной болезни. Ураты обнаруживаются при лихорадке, большой потере жидкости, лейкозах. Фосфаты иногда встречаются в нормальной моче, но чаще при ревматизе и хлорозе. Триппельфосфаты обнаруживаютмя во всех случаях защелачивания мочи: при приеме ратительной пищи, щелочных минеральных вод, восалении мочевого пузыря, при длительном стоянии мочи. Мочекислый аммоний может входить в состав почечных камней.