- •По клинической лабораторной диагностике
- •По клинической лабораторной диагностике
- •Раздел 1. Организация лабораторной службы. Тема: Организационная структура клинико-диагностической лаборатории.
- •5.1.Организация лабораторной службы.
- •5.2. Приказы и постановления мз рб и нормативных документов, регулирующих деятельность клинической лабораторной службы.
- •Раздел 2. Общеклинические лабораторные исследования. Тема: Исследование физических и химических свойств мочи, микроскопия мочевого осадка.
- •5.1. Исследование физических свойств мочи.
- •5.2. Определение белка в моче
- •5.3. Определение глюкозы в моче.
- •5.4. Определение кетоновых тел в моче.
- •5.5.Определение билирубина в моче(проба Розина).
- •5.6. Качественное определение уробилиновых тел (реакция Флоранса).
- •5.7. Микроскопическое исследование мочи
- •Тема: Исследование мокроты, цереброспинальной жидкости, транссудатов и экссудатов.
- •5.1. Физические свойства мокроты.
- •5.2. Микроскопическое исследование нативных препаратов мокроты.
- •5.3. Исследование окрашенных препаратов мокроты.
- •5.4.Определение физических свойств ликвора
- •5.5.Определение химических свойств ликвора
- •6. Исследование транссудатов и экссудатов
- •Раздел 3. Лабораторные исследования периферической крови. Тема: Общий клинический анализ крови.
- •5.1.Определение концентрации гемоглобина гемиглобинцианидным методом.
- •5.2. Подсчет количества эритроцитов периферической крови.
- •5.3. Определение цветового показателя.
- •5.4. Определение количества лейкоцитов.
- •Тема: Костно-мозговое кроветворение. Морфология клеток крови.
- •5.1. Микроскопическое исследование клеток периферической крови.
- •Раздел 4. Лабораторные исследования системы иммунитета. Тема: Иммунологические лабораторные исследования.
- •5.1. Подготовка биологического материала для иммунологического исследования.
- •Определение количества т-лимфоцитов в реакции розеткообразования с эритроцитами барана (е-рок)
- •5.3. Определение количества в-лимфоцитов методом спонтанного розеткообразования с эритроцитами мыши.
- •5.4.Оценка фагоцитарной активности нейтрофилов по поглощению зимозана.
- •5.5. Определение базальной и стимулированной метаболической активности нейтрофилов в реакции восстановления нитросинего тетразолия (нст-тест ).
- •Раздел 5. Лабораторные исследования системы гемостаза. Тема: Исследование первичного гемостаза.
- •5.1. Определение длительности кровотечения по Дюке.
- •5.2. Подсчет количества тромбоцитов.
- •Тема: Лабораторная оценка коагуляционного гемостаза.
- •5.1. Определение времени свертывания крови по Ли-Уайту.
- •5.2. Определение ачтв (активированного частичного тромбопластинового времени), кефалин-каолинового времени плазмы.
- •5.3. Протромбиновое время (пв), протромбиновый индекс (пи), протромбиновое отношение (по), международное нормализованное отношение (мно).
- •5.4. Тромбиновое время.
- •5.5. Определение концентрации фибриногена а в плазме.
- •5.6. Определение фибриногена в.
- •5.7. Этаноловый тест.
- •Раздел 6. Биохимические исследования сыворотки крови.
- •5.1. Определение общего белка в сыворотке (плазме) крови биуретовым методом (Кингслея—Вейксельбаума)
- •5.2.Определение содержания альбумина в сыворотке (плазме) крови по реакции с бромкрезоловым зеленым
- •5.3. Определение мочевины в сыворотке крови и моче ферментативным методом
- •5.4. Определение креатинина в сыворотке крови и моче по цветной реакции Яффе (метод Поппера и соавт.)
- •5.5. Кинетический вариант определения креатинина
- •5.1. Колориметрический динитрофенилгидразиновый метод исследования активности аминотрансфераз в сыворотке крови (по Райтману, Френкелю)
- •5.2. Кинетический метод определения активности АсАт
- •5.3. Кинетический метод определения активности АлАт
- •5.4. Определение активности щелочной фосфатазы
- •5.5.Определение активности а-амилазы методом Каравея (микрометод).
- •Тема: Лабораторные исследования углеводного обмена и липидов.
- •5.1. Определение общих липидов в сыворотке крови по цветной реакции с сульфофосфованилиновым реактивом.
- •5.2. Определение общего холестерина сыворотки крови, основанный на реакции Либермана—Бурхардта (метод Илька).
- •5.3. Определение уровня холестерина липопротеинов высокой плотности (α-холестерина).
- •5.4. Определение уровня триглицеридов.
- •5.5.Определение содержания глюкозы ферментативным методом
- •5.1. Определение содержания билирубина колориметрическим диазометодом Йендрашика—Клеггорна—Грофа
- •Раздел 7. Аналитическая надежность и контроль качества клинических лабораторных исследований. Тема: Внутрилабораторный контроль качества.
- •5.1. Внутрилабораторный контроль качества воспроизводимости результатов.
- •Тема: Коллоквиум. Составление аналитического лабораторного заключения.
- •Общие положения
- •Меры предосторожности при оказании медицинской помощи, обслуживании больных, работе с биоматериалом.
- •Мероприятия при ранениях, контактах с кровью, другими биологическими материалами пациентов.
- •Регистрация аварий и наблюдение за пострадавшими
- •Кирпиченок Людмила Николаевна,Скребло Елена Иосифовна, Шилин Владимир Евгеньевич, Тихон Татьяна Владимировна
- •Практикум по клинической лабораторной
- •Диагностике
- •Учебно-методическое пособие
5.5. Определение концентрации фибриногена а в плазме.
Принцип метода. Образовавшийся после свертывания плазмы фибрин быстро высушивается и по его массе определяется концентрация фибриногена в плазме. Количество образовавшегося фибрина эквивалентно содержанию фибриногена в плазме.
Ход исследования.
К 1 (0,5) мл исследуемой плазмы последовательно добавляют 0,1 (0,05) мл раствора тромбопластина и 0,1 (0,05) мл 0,45 М (5%) раствора хлорида кальция. Смесь инкубируют на водяной бане при + 37°С 10 мин, после чего образовавшийся сгусток переносят на обеззоленный бумажный фильтр и просушивают другим фильтром до тех пор, пока на фильтре не перестанут определяться следы влаги. Затем высушенный фибрин взвешивают на торсионных весах.
Нормальное значение массы сгустка 9-15 мг.
Для определения концентрации фибриногена в г/л массу сгустка фибрина умножают на экспериментально установленный коэффициент 0,222. В норме содержания фибриногена - 2-4 (1,75 -3,75) г/л.
Клиническое значение.
Дает информацию о количестве основного коагуляционного субстрата.
5.6. Определение фибриногена в.
Принцип метода:фибриноген В - промежуточный продукт превращения фибриногена в фибрин. Появляется при внутрисосудистой активации свертывания крови. Прибавление к сыворотке раствора β - нафтола при наличии в ней фибриногена В приводит к выпадению последнего в виде нитей, гранул или сгустка.
Ход исследования.
В две пробирки наливают по 1 (0,5) мл цитратной плазмы. В первую пробирку (контроль) добавляют 5 (3) капель 50% этилового спирта, а во вторую (опыт) - 5 (3) капель 2% спиртового раствора β - нафтола. Пробирки встряхивают и оставляют на 10 мин при комнатной температуре. Спустя 10 мин отмечают результат реакции.
Клиническое значение.
В плазме здоровых людей проба с β - нафтолом отрицательная. При положительной реакции на фибриноген В в пробирке с β - нафтолом выпадает осадок в виде грубых хлопьев, а при резко положительной реакции образуется сгусток. Положительный тест на фибриноген В указывает на внутрисосудистую активацию свертывающей системы крови. Однако определение фибриногена В не является специфическим тестом, так как β - нафтол осаждает не только фибрин-мономерные комплексы, но и другие измененные белки. Поэтому тест нередко бывает положительным при выраженных диспротеинемиях, гиперфибриногенемиях воспалительного характера. В последнее время этот тест используется реже в связи с его малой чувствительностью и специфичностью.
5.7. Этаноловый тест.
Принцип метода. Появление желеобразной массы (сгустка) в плазме при добавлении 50% раствора этанола свидетельствует о наличии несвертывающихся тромбином комплексов фибрин-мономеров с продуктами деградации фибриногена и фибрина (ПДФ). Точность концентрации 50% раствора этанола очень важна и должна проверяться спиртометром. Этанол разводится дистиллированной водой.
Ход определения.
0.4 мл богатой тромбоцитами плазмы переносят в силиконированную охлажденную пробирку и добавляют 0,15 мл 50% раствора этанола. Пробирку встряхивают и включают секундомер. Через 10 мин (при комнатной температуре или на холоде при +4°С) учитывают результат реакции.
Клиническое значение.
В норме этаноловый тест отрицателен. Положителен, при появлении желеобразного сгустка свидетельствующего о налияии не свертывающихся тромбином комплексов фибрин-мономеров с ПДФ.
ЛИТЕРАТУРА:
Аналитические и диагностические аспекты практической коагулологии (методические рекомендации) / Гродн. гос. мед. ин-т; под ред. Ю.В.Киселевского. - Гродно, 1997. - 80 с.
Баркаган З.С. Геморрагические заболевания и синдромы. - М.: Медицина,1988. - 526 с.
Баркаган Л.З. Нарушение гемостаза у детей. – М.: Медицина, 1993. – 176 с.
Фред Дж. Шиффман Патофизиология крови – М.–СПб.: Невский Диалект, 2000. - 448 с.
Шевченко Ю.Л., Жибурт Е.Б. Безопасное переливание крови. – СПб.: Питер, 2000. – 308 с.
Камышников В.С. Справочник по клинико-биохимической лабораторной диагностике. – Мн.: Беларусь, 2000. - в 2 т.
Камышников В.С. Техника лабораторных работ (учебник для фельдшеров-лаборантов), Минск, «Белорусская наука». 2001, 380 с.
Карпищенко А.И. Медицинские лабораторные технологии. – СПб.: Интер-Медика, 1999. - в 2 т.