- •По клинической лабораторной диагностике
- •По клинической лабораторной диагностике
- •Раздел 1. Организация лабораторной службы. Тема: Организационная структура клинико-диагностической лаборатории.
- •5.1.Организация лабораторной службы.
- •5.2. Приказы и постановления мз рб и нормативных документов, регулирующих деятельность клинической лабораторной службы.
- •Раздел 2. Общеклинические лабораторные исследования. Тема: Исследование физических и химических свойств мочи, микроскопия мочевого осадка.
- •5.1. Исследование физических свойств мочи.
- •5.2. Определение белка в моче
- •5.3. Определение глюкозы в моче.
- •5.4. Определение кетоновых тел в моче.
- •5.5.Определение билирубина в моче(проба Розина).
- •5.6. Качественное определение уробилиновых тел (реакция Флоранса).
- •5.7. Микроскопическое исследование мочи
- •Тема: Исследование мокроты, цереброспинальной жидкости, транссудатов и экссудатов.
- •5.1. Физические свойства мокроты.
- •5.2. Микроскопическое исследование нативных препаратов мокроты.
- •5.3. Исследование окрашенных препаратов мокроты.
- •5.4.Определение физических свойств ликвора
- •5.5.Определение химических свойств ликвора
- •6. Исследование транссудатов и экссудатов
- •Раздел 3. Лабораторные исследования периферической крови. Тема: Общий клинический анализ крови.
- •5.1.Определение концентрации гемоглобина гемиглобинцианидным методом.
- •5.2. Подсчет количества эритроцитов периферической крови.
- •5.3. Определение цветового показателя.
- •5.4. Определение количества лейкоцитов.
- •Тема: Костно-мозговое кроветворение. Морфология клеток крови.
- •5.1. Микроскопическое исследование клеток периферической крови.
- •Раздел 4. Лабораторные исследования системы иммунитета. Тема: Иммунологические лабораторные исследования.
- •5.1. Подготовка биологического материала для иммунологического исследования.
- •Определение количества т-лимфоцитов в реакции розеткообразования с эритроцитами барана (е-рок)
- •5.3. Определение количества в-лимфоцитов методом спонтанного розеткообразования с эритроцитами мыши.
- •5.4.Оценка фагоцитарной активности нейтрофилов по поглощению зимозана.
- •5.5. Определение базальной и стимулированной метаболической активности нейтрофилов в реакции восстановления нитросинего тетразолия (нст-тест ).
- •Раздел 5. Лабораторные исследования системы гемостаза. Тема: Исследование первичного гемостаза.
- •5.1. Определение длительности кровотечения по Дюке.
- •5.2. Подсчет количества тромбоцитов.
- •Тема: Лабораторная оценка коагуляционного гемостаза.
- •5.1. Определение времени свертывания крови по Ли-Уайту.
- •5.2. Определение ачтв (активированного частичного тромбопластинового времени), кефалин-каолинового времени плазмы.
- •5.3. Протромбиновое время (пв), протромбиновый индекс (пи), протромбиновое отношение (по), международное нормализованное отношение (мно).
- •5.4. Тромбиновое время.
- •5.5. Определение концентрации фибриногена а в плазме.
- •5.6. Определение фибриногена в.
- •5.7. Этаноловый тест.
- •Раздел 6. Биохимические исследования сыворотки крови.
- •5.1. Определение общего белка в сыворотке (плазме) крови биуретовым методом (Кингслея—Вейксельбаума)
- •5.2.Определение содержания альбумина в сыворотке (плазме) крови по реакции с бромкрезоловым зеленым
- •5.3. Определение мочевины в сыворотке крови и моче ферментативным методом
- •5.4. Определение креатинина в сыворотке крови и моче по цветной реакции Яффе (метод Поппера и соавт.)
- •5.5. Кинетический вариант определения креатинина
- •5.1. Колориметрический динитрофенилгидразиновый метод исследования активности аминотрансфераз в сыворотке крови (по Райтману, Френкелю)
- •5.2. Кинетический метод определения активности АсАт
- •5.3. Кинетический метод определения активности АлАт
- •5.4. Определение активности щелочной фосфатазы
- •5.5.Определение активности а-амилазы методом Каравея (микрометод).
- •Тема: Лабораторные исследования углеводного обмена и липидов.
- •5.1. Определение общих липидов в сыворотке крови по цветной реакции с сульфофосфованилиновым реактивом.
- •5.2. Определение общего холестерина сыворотки крови, основанный на реакции Либермана—Бурхардта (метод Илька).
- •5.3. Определение уровня холестерина липопротеинов высокой плотности (α-холестерина).
- •5.4. Определение уровня триглицеридов.
- •5.5.Определение содержания глюкозы ферментативным методом
- •5.1. Определение содержания билирубина колориметрическим диазометодом Йендрашика—Клеггорна—Грофа
- •Раздел 7. Аналитическая надежность и контроль качества клинических лабораторных исследований. Тема: Внутрилабораторный контроль качества.
- •5.1. Внутрилабораторный контроль качества воспроизводимости результатов.
- •Тема: Коллоквиум. Составление аналитического лабораторного заключения.
- •Общие положения
- •Меры предосторожности при оказании медицинской помощи, обслуживании больных, работе с биоматериалом.
- •Мероприятия при ранениях, контактах с кровью, другими биологическими материалами пациентов.
- •Регистрация аварий и наблюдение за пострадавшими
- •Кирпиченок Людмила Николаевна,Скребло Елена Иосифовна, Шилин Владимир Евгеньевич, Тихон Татьяна Владимировна
- •Практикум по клинической лабораторной
- •Диагностике
- •Учебно-методическое пособие
5.1. Определение длительности кровотечения по Дюке.
Принцип метода: Определяется длительность кровотечения из капилляров (артериол и венул) кожи, возникшего в результате строго дозированного ее прокола.
Ход исследования:
На ногтевой фаланге безымянного пальца (между ногтевым ложе и суставом) наносится укол стерильным ланцетом глубиной не менее 3 мм. Сразу после прокола включают секундомер. Выступающие самостоятельно капли крови промокают фильтровальной бумагой через каждые 15-30 с, не прикасаясь ею к ранке. Секундомер останавливают в момент прекращения вытекания крови.
Это исследование можно проводить, используя прокол кожи ниже наружного края мочки уха. Мочку уха согревают между пальцами в течение одной минуты, протирают спиртом и вновь согревают теплом настольной лампы до полного высыхания спирта. Стерильным копьем производят прокол кожи у нижнее наружного края мочки уха глубиной 3,5мм. Сразу же после прокола включают секундомер, растягивают края ранки, не касаясь ее. Выступающие капли крови промокают через каждые 15-30 с фильтровальной бумагой, не прикасаясь ею к ранке. Секундомер останавливают в момент прекращения вытекания крови. Для большей точности тест выполняется дважды на обеих мочках ушей.
В норме продолжительность кровотечения не превышает 5 мин (в среднем 2-4 мин.)
Клиническое значение.
Удлинняется при вазопатиях (в том числе лекарственных) тромбоцитопениях и тромбоцитопатиях.
5.2. Подсчет количества тромбоцитов.
Принцип метода: основан на определении количества тромбоцитов, встречающихся при подсчете 1000 эритроцитов в окрашенных мазках крови. Обязателен последующий перерасчет количества тромбоцитов в 1 л крови, исходя из содержания в этом объеме количества эритроцитов.
Реактивы.
1. Раствор сульфата магния (140 г/л). 2. Раствор этилендиа-минтетраацетата натрия (60 г/л ЭДТА). Применяют реактив 1 или 2.
Ход исследования.
Капилляр Панченкова промывают одним из указанных реактивов. Затем набирают в него 25 делений (до метки 75) этого реактива и переносят на дно серологической пробирки. Кровь из пальца берут тем же капилляром до метки «О» (К) и перемешивают ее с реактивом. Параллельно берут кровь для подсчета эритроцитов. Из смеси крови с раствором сульфата магния или с раствором ЭДТА готовят тонкие мазки. Высушивают их на воздухе, подписывают, фиксируют и окрашивают краской Романовского в течение 1—2 ч при использовании сульфата магния и 30—40 мин при использовании раствора ЭДТА. Окрашенный мазок микроскопируют с иммерсионной системой (окуляр 7 или 10, объектив 90). Тромбоциты окрашиваются в розовато-фиолетовый цвет, имеют вид округлых образований размером 2—4 мкм.
Подсчет количества тромбоцитов в тонких местах препарата производят следующим образом: в каждом поле зрения считают число эритроцитов и тромбоцитов, передвигая мазок до тех пор, пока не будут просчитаны 1000 эритроцитов. Для удобства счета и большей точности следует пользоваться специальным окуляром с уменьшенным полем зрения.
При отсутствии такого окуляра используют ограничитель поля зрения (по Фонио), для чего в окуляр вкладывают кружок из черной бумаги с отверстием по центру в форме ромба. Ограничитель поля зрения вставляют в окуляр, предварительно сняв верхнюю линзу. Затем снова навинчивают верхнюю линзу и вставляют окуляр в тубус микроскопа. В ограниченном поле зрения должно быть видно около 50 эритроцитов. Сосчитав 1000 эритроцитов, суммируют общее количество встретившихся тромбоцитов, после чего производят перерасчет количества тромбоцитов на число эритроцитов в 1 л крови.
Пример расчета. На 1000 эритроцитов подсчитано 60 тромбоцитов. Количество эритроцитов в 1 л крови составляет 4,0 х 109. Количество тромбоцитов в 1 л крови равно:
60×4,0×1012 = 240,0 × 109 / л
1000
Практически количество тромбоцитов в 1 л крови равно числу сосчитанных в мазке тромбоцитов, умноженному на цифру эритроцитов в миллионах и на 109 (60 х 4,0 х 109 = 240,0 х 109/л).
Клиническое значение.
Норма тромбоцитов в периферической крови здоровых людей 180,0—320,0 х 109/л. Допускаются пределы колебания числа тромбоцитов 150,0—450,0 х 109/л.