- •По клинической лабораторной диагностике
- •По клинической лабораторной диагностике
- •Раздел 1. Организация лабораторной службы. Тема: Организационная структура клинико-диагностической лаборатории.
- •5.1.Организация лабораторной службы.
- •5.2. Приказы и постановления мз рб и нормативных документов, регулирующих деятельность клинической лабораторной службы.
- •Раздел 2. Общеклинические лабораторные исследования. Тема: Исследование физических и химических свойств мочи, микроскопия мочевого осадка.
- •5.1. Исследование физических свойств мочи.
- •5.2. Определение белка в моче
- •5.3. Определение глюкозы в моче.
- •5.4. Определение кетоновых тел в моче.
- •5.5.Определение билирубина в моче(проба Розина).
- •5.6. Качественное определение уробилиновых тел (реакция Флоранса).
- •5.7. Микроскопическое исследование мочи
- •Тема: Исследование мокроты, цереброспинальной жидкости, транссудатов и экссудатов.
- •5.1. Физические свойства мокроты.
- •5.2. Микроскопическое исследование нативных препаратов мокроты.
- •5.3. Исследование окрашенных препаратов мокроты.
- •5.4.Определение физических свойств ликвора
- •5.5.Определение химических свойств ликвора
- •6. Исследование транссудатов и экссудатов
- •Раздел 3. Лабораторные исследования периферической крови. Тема: Общий клинический анализ крови.
- •5.1.Определение концентрации гемоглобина гемиглобинцианидным методом.
- •5.2. Подсчет количества эритроцитов периферической крови.
- •5.3. Определение цветового показателя.
- •5.4. Определение количества лейкоцитов.
- •Тема: Костно-мозговое кроветворение. Морфология клеток крови.
- •5.1. Микроскопическое исследование клеток периферической крови.
- •Раздел 4. Лабораторные исследования системы иммунитета. Тема: Иммунологические лабораторные исследования.
- •5.1. Подготовка биологического материала для иммунологического исследования.
- •Определение количества т-лимфоцитов в реакции розеткообразования с эритроцитами барана (е-рок)
- •5.3. Определение количества в-лимфоцитов методом спонтанного розеткообразования с эритроцитами мыши.
- •5.4.Оценка фагоцитарной активности нейтрофилов по поглощению зимозана.
- •5.5. Определение базальной и стимулированной метаболической активности нейтрофилов в реакции восстановления нитросинего тетразолия (нст-тест ).
- •Раздел 5. Лабораторные исследования системы гемостаза. Тема: Исследование первичного гемостаза.
- •5.1. Определение длительности кровотечения по Дюке.
- •5.2. Подсчет количества тромбоцитов.
- •Тема: Лабораторная оценка коагуляционного гемостаза.
- •5.1. Определение времени свертывания крови по Ли-Уайту.
- •5.2. Определение ачтв (активированного частичного тромбопластинового времени), кефалин-каолинового времени плазмы.
- •5.3. Протромбиновое время (пв), протромбиновый индекс (пи), протромбиновое отношение (по), международное нормализованное отношение (мно).
- •5.4. Тромбиновое время.
- •5.5. Определение концентрации фибриногена а в плазме.
- •5.6. Определение фибриногена в.
- •5.7. Этаноловый тест.
- •Раздел 6. Биохимические исследования сыворотки крови.
- •5.1. Определение общего белка в сыворотке (плазме) крови биуретовым методом (Кингслея—Вейксельбаума)
- •5.2.Определение содержания альбумина в сыворотке (плазме) крови по реакции с бромкрезоловым зеленым
- •5.3. Определение мочевины в сыворотке крови и моче ферментативным методом
- •5.4. Определение креатинина в сыворотке крови и моче по цветной реакции Яффе (метод Поппера и соавт.)
- •5.5. Кинетический вариант определения креатинина
- •5.1. Колориметрический динитрофенилгидразиновый метод исследования активности аминотрансфераз в сыворотке крови (по Райтману, Френкелю)
- •5.2. Кинетический метод определения активности АсАт
- •5.3. Кинетический метод определения активности АлАт
- •5.4. Определение активности щелочной фосфатазы
- •5.5.Определение активности а-амилазы методом Каравея (микрометод).
- •Тема: Лабораторные исследования углеводного обмена и липидов.
- •5.1. Определение общих липидов в сыворотке крови по цветной реакции с сульфофосфованилиновым реактивом.
- •5.2. Определение общего холестерина сыворотки крови, основанный на реакции Либермана—Бурхардта (метод Илька).
- •5.3. Определение уровня холестерина липопротеинов высокой плотности (α-холестерина).
- •5.4. Определение уровня триглицеридов.
- •5.5.Определение содержания глюкозы ферментативным методом
- •5.1. Определение содержания билирубина колориметрическим диазометодом Йендрашика—Клеггорна—Грофа
- •Раздел 7. Аналитическая надежность и контроль качества клинических лабораторных исследований. Тема: Внутрилабораторный контроль качества.
- •5.1. Внутрилабораторный контроль качества воспроизводимости результатов.
- •Тема: Коллоквиум. Составление аналитического лабораторного заключения.
- •Общие положения
- •Меры предосторожности при оказании медицинской помощи, обслуживании больных, работе с биоматериалом.
- •Мероприятия при ранениях, контактах с кровью, другими биологическими материалами пациентов.
- •Регистрация аварий и наблюдение за пострадавшими
- •Кирпиченок Людмила Николаевна,Скребло Елена Иосифовна, Шилин Владимир Евгеньевич, Тихон Татьяна Владимировна
- •Практикум по клинической лабораторной
- •Диагностике
- •Учебно-методическое пособие
5.3. Протромбиновое время (пв), протромбиновый индекс (пи), протромбиновое отношение (по), международное нормализованное отношение (мно).
Протромбиновое время.
Принцип метода: определение времени образования сгустка плазмы при добавлении к ней избытка тромбопластина и оптимального количества кальция. Для определения протромбинового времени необходимо использовать тромбопластин, тестированный по международному индексу чувствительности (МИЧ, ISI).
Ход исследования.
Готовят тромбопластин-кальциевую смесь (0,1 мл тромбопластина и 0,1 мл 0,025 моль/л хлористого кальция), прогревают на водяной бане при +37°С в течение 60 с, добавляют к смеси 0,1 мл цитратной плазмы, полученной из венозной крови (9:1). Отмечают время свертывания плазмы с момента добавления последнего ингредиента. Норма 12-15 с.
Протромбиновый индекс (ПИ):
ПВ донора
ПИ = -----------------
ПВ больного
Норма: 0,7 – 1,1
Международное нормализованное отношение (МНО).
Определяют МНО, исходя из протромбинового отношения и МИЧ, который указан для данной серии тромбопластина:
МНО= ПОМИЧ
Протромбиновое отношение (ПО) определяют как отношение протромбинового времени (ПВ) пациента к протромбиновому времени донора. Рассчитывают ПО по формуле:
ПВ больного
ПО = -----------------
ПВ донора
Фирмы - производители наборов и реагентов для определения тестов коагулограммы прилагают таблицы пересчета ПО в МНО в зависимости от МИЧ тромбопластина.
Норма. 0,9-1,2.
Клиническое значение.
ПВ удлинено (ПИ снижен, ПО и МНО повышены) – врожденный дефицтит факторов II, V, VII, X, хронисческие заболевания печени с нарушением функции, дефицит витамина К (холестаз, мальабсорбция, дисбактериоз), лечение антикоагулянтами непрямого действия, гипофибриногенемия (менее 0,5 г/л), дисфибриногенемия и нарушение полимеризации фибрина, ДВС-синдром, присутствие ингибиторов свертывания (ПДФ, гепарин).
ПВ укорочено (ПИ увеличен, ПО и МНО снижены) – состояние гиперкоагуляции, возникает при массивном поступлении тканевого тромбопластина в кровоток (травма, некроз), наблюдается также во время беременности и родов.
5.4. Тромбиновое время.
Принцип метода: определяется время свертывания плазмы исследуемого под влиянием тромбина, активность которого стандартизирована на плазме доноров.
Готовят раствор тромбина, свертывающий плазму здорового человека за 10 - 13 с либо 15-17 с. Более слабые растворы тромбина дают менее точные результаты. Время образования сгустка плазмы обозначается как тромбиновое время.
Ход исследования.
В пробирку вносят 0,1 мл исследуемой плазмы. Прогревают в водяной бане (+37°С) 60 с, затем добавляют 0,1 мл раствора тромбина, отмечают время образования сгустка.
Норма - тромбиновое время доноров.
Клиническое значение.
Удлинение тромбинового времени отмечается при передозировке гепарина, накоплении в плазме крови продуктов деградации фибриногена/фибрина (ПДФ): при ДВС-синдроме, массивных тромбоэмболиях. лечении фибринолитическими препаратами, при некоторых заболеваниях, при выраженной гипофибриногенемии и дисфибриногенемии (молекулярные дефекты фибриногена). Полная несвертываемость по тромбиновому тесту наблюдается сразу же после внутривенного введения большой дозы гепарина и в терминальной стадии острого ДВС-синдрома. Благодаря высокой чувствительности тромбинового времени к гепарину, методику используют для контроля за гепаринотерапией. Ошибочные результаты могут быть получены при исследовании крови, взятой из сосудистого катетера с гепариновым покрытием.