Факторы, влияющие на точность анализа

1. Применение для сжигания кислоты низкой плотности.

2. Неполное сжигание.

3. Насыщение воздуха лаборатории аммиаком.

4. Внесение недостаточного количества 40 %-ного раствора NaOH в отгонную колбу перед отгонкой аммиака.

5. Недостаточное количество 0,01 н. раствора H₂SO₄ в колбе для улавливания аммиака.

Рефрактометрический метод определения белка (гост 25179-90)

Рефрактометрический метод основан на измерении показателей преломления молока и безбелковой молочной сыворотки, полученной из того же образца молока, разность между которыми прямо пропорциональна массовой доле белка в молоке.

Подготовка к измерениям

Навеску 40,0 г хлористого кальция помещают в колбу, вместимостью 1000 см³, приливают к ней 500 см³ воды и перемешивают до полного растворения соли. Содержимое колбы нагревают до температуры 20 + (-)2⁰С и доводят водой до метки.

Техника определения:

1) Наливают в 3 флакона по 5 см³ молока, добавляют по 6 капель раствора 4%-ного раствора хлористого кальция. Флаконы закрывают пробками, и содержимое их перемешивают путем переворачивания флаконов. Помещают флаконы в водяную баню, наливая в баню воду так, чтобы ее уровню достигал половины высоты флаконов. Баню закрывают, помещают на электроплитку, доводят воду в бане до кипения и кипятят не менее 10 мин. Не открывая бани, сливают горячую воду через отверстия на крышке, наливают в баню холодную воду и выдерживают в ней не менее 2 мин.

2) Открывают баню, извлекают флаконы и разрушают белковый сгусток путем энергичного встряхивания флаконов. Флаконы помещают в центрифугу и центрифугируют не менее 10 мин. Образовавшуюся прозрачную сыворотку отбирают пипеткой и наносят на измерительную призму рефрактометра 1-2 капли. Закрывают измерительную призму осветительной. Наблюдая в окуляр рефрактометра, специальным корректором убирают окрашенность границы света и тени. Для улучшения резкости границы измерение проводят через 1 мин после нанесения сыворотки на призму, так как за это время из пробы удаляется воздухи и лучше смачивается поверхность осветительной призмы. Проводят по шкале «Белок» не менее 3 наблюдений. Удаляют сыворотку с призмы рефрактометра, промывают ее водой и вытирают фильтровальной бумагой.

3) Помещают на измерительную призму 2 капли исследуемого молока и проводят по шкале «Белок» не менее 5 наблюдений, так как резкость границы света и тени у молока хуже, чем у сыворотки. Вычисляют средние арифметические результатов наблюдений для сыворотки и молока.

Обработка результатов

Массовую долю белка в молоке (XI) в процентах вычисляют по формуле: Х₁=Х₂ – Х₃, (3)

где Х2 – среднее арифметическое значение результатов наблюдений по шкале «Белок» для молока, %;

ХЗ – среднее арифметическое значение результатов наблюдений по шкале «Белок» для сыворотки, %.

Предел допустимой погрешности результата измерений составляет +(–) 0,1 % массовой доли белка при доверительной вероятности 0,90 и расхождении между двумя параллельными определениями не более 0,1 % массовой доли белка.

За окончательный результат измерения принимают среднее арифметическое, значение результатов двух параллельных вычислений массовой доли белка, округляя результат до второго десятичного знака.

Задание:

1 Отобрать 200 мл молока и выделить из него казеин сычужным ферментом и раствором кислоты для последующего обнаружения белков альбумина и глобулина.

2 Определить общее количество белка методом формольного титрования.

Контрольные вопросы

1) Какие белки вы знаете ?

2) Написать формулу реакции, происходящей при взаимодействии казеина с молочной кислотой, образующейся при естественном скисании молока ?

3) Какие принципы используются при определении белков в молоке различными способами ?

4) Каково действие сычужного фермента на молоко ?

2.4 Определение содержание жира в молоке

Цель занятия: изучить методы определения жирности молока.

Кислотный метод определения жира в молоке (ГОСТ 5867-90)

Метод основан на выделении жира из молока под действием концентрированной серной кислоты и изоамилового спирта с последующим центрифугированием и измерении объема выделившегося жира в градуированной части жиромера.

Аппаратура, материалы и реактивы

Жиромеры (бутирометры) стеклянные исполнения 1-6, 1-7; пробки резиновые для жиромеров; пипетки вместимостью 5,10, 10,77 см³; дозаторы для отмеривания серной кислоты и изоамилового спирта вместимостью 1 и 10 см³; центрифуга с частотой вращения ее менее 1000 с^-1 и не более 1100 с^-1; баня водяная; штатив для жиромеров; термометры ртутные стеклянные с диапазоном измерений от 0 до 100⁰С, с ценой деления 1,0^оС; весы лабораторные 4-го класса точности; ареометр общего назначения с диапазоном измерения от 700 до 2000 кг/м³; часы песочные на 5 мин по нормативно-технической документации или секундомер; кислота серная или кислота серная техническая; спирт изоамиловый; вода дистиллированная.