Дополнительный материал к занятию Методы диагностики сифилиса Выявление возбудителя

Для обнаружения возбудителя в материале из сифилидов, полученном из пораженных участков наружных половых органов, заднего прохода, кожи и слизистой оболочки полости рта, а также инфицированных лимфатических узлов, применяют:

1) микроскопию в тёмном поле;

2) реакцию прямой иммунофлюоресценции (для образцов из поражений в полости рта или из других очагов, где возможна контаминация трепонемами-комменсалами);

3) полимеразную цепную реакцию (ПЦР).

Серологические тесты на сифилис подразделяются на:

а) нетрепонемные тесты: реакция микропреципитации с кардиоли- пиновым антигеном (РМП), тест ВДРЛ (VDRL - Venerеal Disease Research Laboratory), тест быстрых плазменных реагинов (РПР) и их варианты.

б) трепонемные тесты: реакция пассивной гемагглютинации (РПГА), реакция иммунофлюоресценции (РИФ), иммуноферментный анна- лиз (ИФА), реакция иммобилизации бледных трепонем (РИТ), иммуноблоттинг (Western blot).

в) специфические тесты для определения антител класса IgM к T.pallidum: 19S IgM-РИФ-абс., ИФА и иммуноблоттинг для определения IgM-антител к T. pallidum.

Для скрининговых (отборочных) обследований населения на си- филис следует использовать:

1) реакцию микропреципитации (РМП) или РПР/ВДРЛ в сочетании с РПГА;

2) ИФА на IgG или суммарные трепонемоспецифические иммуног- лобулины;

3) РИФ-абс. или IgM-ИФА при подозрении на первичный сифилис.

В случае если какой-либо из скрининговых тестов окажется положи- тельным, используют любой из специфических подтверждающих трепонемных тестов:

1) РПГА, ИФА, РИФабс (или другой трепонемный тест, например, РПГА, если ИФА используется как скрининговый метод; ИФА, если в ка- честве скринингового используется РПГА);

2) иммуноблоттинг на IgG к T.pallidum, если подозреваются ложно- положительные результаты РПГА или РИФ.

Для контроля эффективности лечения используют РМП, РПР или ВДРЛ в количественном варианте.

Техника взятия крови для серологических реакций на сифилис

Кровь для исследования на РСК, РИФ и РИТ берут из локтевой вены натощак шприцем или одной иглой (самотёком). Шприц и игла должны быть после стерилизации промыты изотоническим раствором натрия хло- рида (нельзя промывать водой, спиртом, кислотами, щелочами). В чистую сухую пробирку забирают 5–7 мл крови. Кровь для исследования экспресс-методом берут из пальца или из локтевой вены.

При необходимости для исследования в отдалённых лабораториях можно вместо крови пересылать сухие сыворотки. Для этого на следующий день после взятия крови сыворотку отделяют от сгустка. Затем набирают 1 мл сыворотки в шприц и выливают её в виде двух отдельных кружков на полоску писчей бумаги, вощаной бумаги или целлофана. На полоске бумаги с высушенной при комнатной температуре сывороткой надписываются фамилия, имя, отчество больного, возраст, дата взятия крови. Бумага свёртывается в виде аптечного пакетика для порошка. Пакетики вкладываются в конверт вместе с сопроводительным списком фамилий и указанием предполагаемого диагноза. Конверт немедленно отправляется почтой или нарочным в ближайшую серологическую лабораторию, занимающуюся серодиагностикой сифилиса. Срок годности сыворотки для южных окраин России не более 5 дней, для остальной части – 10 дней.

О способе взятия капель крови на бумагу для агглютинации при лептоспирозе

Кровь из пальца в количестве 10-15 капель берут на полоску фильтровальной бумаги, высушивают при комнатной температуре и по почте отправляют в лабораторию. В лаборатории высушенные на бумаге капли крови вырезают, измельчают, заливают физиологическим раствором в отношении 1:10 с последующим разведением до титра. Высушенная кровь сохраняет антитела не менее месяца.