4. Работа студента на практическом занятии

   1. 1. Ознакомление с правилами работы в микробиологической лаборатории.

2. Усвоение таксономического положения микробов. Начертите в тетради таблицу «Место микробов среди других живых существ».

3. Приготовление и окраска препаратов из бактериальных культур. Внимательно проследите за демонстрацией преподавателем техники приготовления и окраски препаратов. Приготовьте мазки-препараты из культур стафилококка и кишечной палочки; окрасьте простым способом – водным фуксином и метиленовым синим. Ознакомьтесь с наиболее употребительными красителями, применяемыми в микробиологической практике.

4. Микроскопирование и зарисовка окрашенных мазков-препаратов различных форм бактерий. Внимательно проследите за демонстрацией преподавателем техники микроскопии; самостоятельно промикроскопируйте и зарисуйте мазки–препараты различных форм бактерий: круглые (стафилококк, сарцина, стрептококк), палочковидные бактерии (стрептобацилла), извитые (вибрион).

5. Изучение методов тёмнопольной, фазово-контрастной и люминесцентной микроскопии. Повторите устно принципы микроскопии, ознакомьтесь с люминесцентной тёмнопольной и фазово-контрастной микроскопией.

1. Занятие 2

СЛОЖНЫЕ МЕТОДЫ ОКРАСКИ

При микробиологической диагностике многих болезней приходится применять сложные методы окраски не только специалистам - микробиологам, но и лечащим врачам, в особенности в экстренных случаях. Для того чтобы правильно выбрать подходящий для каждого случая способ окраски и правильно оценить полученные результаты необходимо не только научиться окрашивать препараты, но и хорошо продумать и понять принципы сложных методов окраски. На практике наиболее часто применяют способы окраски по Граму в модификации Синёва и по Цилю-Нильсену.

1. Цель самоподготовки

После самостоятельного изучения темы студент должен знать принцип и технику сложных методов окраски.

2. Исходный уровень знаний

Для усвоения материала темы необходимо вспомнить основные формы бактерий и этапы приготовления мазков-препаратов.

3. Цель занятия

1. Усвоить, что сложные методы окраски служат для дифференциации микробов между собой

2. Освоить метод окраски бактерий по Граму в модификации Синёва и по Цилю-Нильсену.

3. Найти различия в структуре и химическом составе грамположительных и грамотрицательных бактерий.

4. Ознакомиться с основными методами сложной окраски, применяемыми для выявления структурных элементов бактерий.

5. План изучения темы

1. Понятие о сложных методах окраски.

2. Принцип и техника окраски по Граму в модификации Синёва.

3. Принцип и техника окраски по Цилю-Нильсену.

4. Методы окраски: по Ожешко, по Бурри–Гинсу, по Нейссеру.

7. После изучения темы студент должен уметь

1. Готовить фиксированные препараты из культур микроорганизмов, растущих на плотных питательных средах.

2. Окрашивать препараты методами Грама (в модификации Синёва) и Циля-Нильсена.

3. Дифференцировать микроорганизмы по морфологическим, тинкториальным свойствам и интерпретировать полученные результаты.

8. Контрольные вопросы

Кто и когда впервые увидел и описал микроорганизмы? Назовите основные этапы развития микробиологии. Назовите фамилии учёных, с работами которых связано начало развития первых трёх этапов. Назовите фамилию первого микробиолога («охотника за микробами») в России. Назовите фамилию учёного, впервые разработавшего метод предохранительных прививок против оспы. Луи Пастер: назовите его основные открытия в области микробиологии; какой метод предложен им для предупреждения нагноений ран? Какие вакцины им получены? Роберт Кох: основные его открытия в области микробиологической техники и возбудителей болезни. И.И. Мечников: основные открытия в области иммунологии. Назовите фамилии выдающихся русских учёных-микробиологов и иммунологов: первооткрыватель вирусов; основатель первой в России школы микробиологов; учёный, впервые в России получивший пенициллин; иммунолог, автор вирусо–генетической теории происхождения злокачественных опухолей.

Для чего нужны сложные методы окраски? Назовите методы окраски, позволяющие: дифференцировать бактерии на две группы по структуре клеточной стенки; выявлять кислотоустойчивые микробы; выявлять споры; выявлять зёрна волютина; выявлять капсулы. Как производится окраска по Граму в модификации Синёва? Сущность окраски по Граму в модификации Синёва: в какой цвет окрашиваются грамположительные бактерии? Почему? В какой цвет окрашиваются грамотрицательные бактерии? Почему? От чего зависит различное отношение бактерий к окраске по Граму? Отношение бактерий к окраске по Граму в модификации Синёва: кокков, спорообразующих палочек, неспорообразующих палочек, извитых форм (перечислить исключения из правил). Техника окраски по Цилю-Нильсену. Принцип окраски: в какой цвет окрашиваются кислотоустойчивые бактерии, в какой – кислотоподатливые и почему? Какова основная особенность клеточной стенки кислотоустойчивых бактерий?