Глава 21

СОЗДАНИЕ УСЛОВИЙ АСЕПТИКИ И МЕТОДЫ СТЕРИЛИЗАЦИИ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ В ТЕХНОЛОГИИ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ФОРМ

Наряду с лекарственными формами, которые гото­вятся с соблюдением санитарных условий, имеется осо­бая группа лекарственных форм, изготовляемых в ус­ловиях асептики с последующей стерилизацией. Это растворы для инъекций, глазные капли, препараты для новорожденных и детей до 1 года. Для первых трех групп соблюдение условий асептики и стерилизация обусловлены способом их введения или особенностями организма новорожденных: инъекционных растворов — нарушением защитных барьеров организма (кожа, слизистые оболочки), глазных препаратов — повышен­ной чувствительностью слизистой оболочки глаза к микроорганизмам, препаратов для новорожденных — низкой сопротивляемостью организма к инфицирова­нию. Необходимость асептического изготовления ле­карственных форм с антибиотиками связана с разру­шением их ферментами микроорганизмов, попавших в лекарственные формы, и, следовательно, потерей эф­фективности.

Особые требования, предъявляемые к стерильным и асептически изготовляемым лекарственным фор­мам, нашли отражение в нормативно-технической до­кументации. Это фармакопейные статьи: «Formae me- dicamentorum pro injectionibus», «Guttae ophthalmi- cae», «Aqua pro injectionibus», частные статьи и приложения к ГФ XI: «Стерилизация», «Проверка сте­рильности», «Проверка ка микробиологическую чисто­ту», «Испытание на пирогенность», приказы Минздра­ва СССР № 573 от 30.11.62 г., № 1029 от 12.11.74'г., № 1026 от 19. 10. 82 г., № 581 и № 582 от 30. 04. 85 г., № 33—2/18—9 от 30. 12.86 г. (см. главу «Государст­венное нормирование»), .а также ряд инструкций.

Общим для технологии всех этих лекарственных форм является изготовление их в условиях асептики.

Асептика — это определенный режим работы, комп­лекс организационных мероприятий, позволяющий свести к минимуму возможность попадания микроор­ганизмов в лекарственные препараты на всех этапах технологического процесса. Для обеспечения асептики необходимо учитывать источники микробной контами­нации лекарственных препаратов. К ним относятся помещение, воздух, вспомогательные и упаковочные материалы, лекарственные вещества, а также рабо­тающий персонал. Создание асептических условий представляет собой неразрывную цепь обязательных мероприятий, дополняющих друг друга. Ошибка, до­пущенная на одном этапе, может свести на нет всю проделанную работу. Соблюдение этих условий обяза­тельно для приготовления всех стерильных лекарствен­ных форм, в том числе и подвергаемых стерилизации. Стерилизация не разрушает пирогенные вещества, ко­торые представляют собой или убитые микробные клетки, или продукты метаболизма микроорганизмов. Асептические условия приобретают особо важное зна­чение при изготовлении тех лекарственных форм, кото­рые не переносят термическую стерилизацию.

Создание асептических условий достигается изго­товлением лекарственных препаратов в специально оборудованном асептическом блоке, комнате, изолиро­ванной от других помещений аптеки, или в настольном боксе с использованием стерильных вспомогательных материалов и посуды.

В приказе Минздрава СССР № 581 от 30.04.85 г. от­ражены необходимые санитарные требования при изго­товлении лекарственных препаратов в асептических условиях.

Требование к помещению. В комнате .для изготов­ления лекарственных препаратов в асептических усло­виях необходимо поддерживать безупречную чистоту. Ее следует мыть теплой водой с мылом или моющими средствами, разрешенными приказом Минздрава СССР №581 от 30.04.85 г., производить дезинфекцию и систематически удалять пыль. Комната должна быть оборудована приточно-вытяжной вентиляцией. Перед входом в асептический блок должны быть положены резиновые коврики, которые ежедневно моют теплой водой и смачивают дезинфицирующим раствором (3 % раствор фенола или 1 % раствор формалина). Комна­та не должна загромождаться предметами, не имею­щими отношения к выполнению производственных процессов. В последние годы считают целесообразным в крупных аптеках иметь асептические комплексы, сос­тоящие из ряда помещений, рационально сообщаю­щихся между собой, что позволяет последовательно проводить технологические процессы. Комплексы включают моечную, стерилизационную для посуды, ас­систентскую (асептическую), фасовочную (асептичес­кую), стерилизационную для лекарственных препара­тов и контрольно-маркировочную .комнаты. В ряде аптек используют боксы с ламинарным потоком сте­рильного воздуха, столы монтажные пылезащитные ил-и наряду с использованием бактерицидных ламп в асеп­тическую комнату проводят, нагнетание стерильного воздуха.

Для обеззараживания воздуха в асептическом бло­ке устанавливают неэкранированные бактерицидные облучатели с мощностью 2—2,5 Вт на 1 м³ объема по­мещения. Облучатели включают на 1—2 ч до начала работы в отсутствие людей. В присутствии персонала могут эксплуатироваться экранированные, бактерицид­ные облучатели, которые устанавливаются на высоте 1,8—2,0 м от пола. Экранированные облучатели должны быть мощностью 1 Вт на 1 м³ помещения. Уборка асептического блока с использованием дезин­фицирующих средств проводится не реже 1 раза в смену. Асептический блок отделяется от остальных по­мещений аптеки шлюзами. Лица, изготавливающие ле­карственные препараты в асептических условиях, при входе в шлюз надевают специальную обувь, моют и дезин­фицируют руки, надевают стерильный халат, 4-слойную марлевую повязку, шапочку (при этом волосы тща­тельно убирают) и бахилы. Санитарную одежду сте­рилизуют и хранят в закрытых биксах не более 3 сут, используют один раз.

Лекарственные средства хранят в стерильных штангласах.

Стерильный вспомогательный материал хранят в закрытом виде не более 3 сут. Вскрытые материалы могут использоваться'в течение 24 ч. Срок хранения сте­рильной посуды (баллонов), используемой для приго­товления и фасовки лекарственных препаратов в асепти­ческих условиях, составляет не более 24 ч.

Особая роль принадлежит вопросам личной гигиены персонала, осуществляющего изготовление лекарствен­ных препаратов в асептических условиях. Главное — это способ обработки рук: тщательное мытье и обра­ботка дезинфицирующими растворами хлоргексидина, хлорамина и др.

Другим важным условием является предваритель­ная стерилизация жидких дисперсионных сред (раст­ворителей), лекарственных и вспомогательных веществ, вспомогательных и упаковочных материалов (посуды, фильтров, ваты и др.), что детально отражено в при­казе Минздрава СССР № 581 от 30. 04. 85 г.

Инъекционные лекарственные формы должны быть апирогенны. Пирогенными веществами (греч. руг — огонь, лат. generatio — рождение) называют продукты жизнедеятельности и распада микроорганизмов, погиб­шие микробные клетки. По химическому составу пиро- генные вещества представляют собой высокомолеку­лярные соединения липополисахаридной природы с м. м. до 8 ООО ООО с размером частиц от 50 нм до 1 мкм. В основном это фосфолипидополисахаридный комп­лекс, адсорбированный на белковом носителе. Уста­новлено, что пирогенные вещества образуют в основ­ном грамотрицательные бактерии.

Впрыскивание раствора, содержащего пирогенные вещества, вызывает пирогенный эффект (повышение температуры тела, лихорадочное состояние). Наиболее резкие пирогенные реакции наблюдаются при внутри- сосудистых, спинномозговых и внутричерепных инъек­циях. В данном случае отмечается падение артериаль­ного давления, озноб, повышение температуры тела, цианоз, рвота, понос, т. е. практически страдают все органы и системы организма.

Пирогены — термостабильные вещества. Об этом свидетельствует то, что они разрушаются только при нагревании в суховоздушных стерилизаторах при тем­пературе 250 °С в течение 30 мин. При воздействии пара под давлением (температура 120°С) в раство­рах с pH 8,0 пирогены разрушают только за 5 ч, а в растворах с pH около 3,2 — за 2 ч. Следовательно, освободиться от пирогенных веществ в воде и инъек­ционных растворах термической стерилизацией прак­тически невозможно. Пирогенные вещества проходят также через фарфоровые бактериальные фильтры. От­сюда ясна важность строжайшего соблюдения асепти­ческих условий изготовления инъекционных лекарст­венных препаратов на всех этапах, независимо от последующей стерилизации.

Существующие методы депирогенизации подразде­ляют на химические, физико-химические и энзимати­ческие (последние не пригодны в фармацевтической технологии). К химическим методам относятся нагре­вание в водороде пероксида при 100 °С в течение 1 ч или выдерживание в подкисленном кислотой серной 0,5—1 % растворе калия перманганата в течение 25—30 мин. Этот метод используют для обработки стеклянных соединительных трубок и др. К физико­химическим методам относят пропускание раст­воров через колонки с активированным углем, целлю­лозой, мембранные ультрафильтры. Данный метод удобен при промышленном изготовлении инъекцион­ных растворов.

В связи с опасностью пирогенного эффекта проверке на пирогенность подвергают растворы, вводимые внут­ривенно в объемах 10 мл и-более (ГФ XI). Обязатель­но должны проверяться 5 % раствор глюкозы, изото­нический натрия хлорида, раствор желатина. Один раз в квартал (приказ Минздрава № 573 от 30. 11.62 г.) испытание на пирогенность растворов и воды для инъек­ций в виде изотонического раствора производят с по­мощью биологического метода (ГФ XI), основанного на изменении температуры тела кролика после введе­ния испытуемых объектов. Для этого испытуемый раствор вводят трем здоровым кроликам массой 1,5—

5. кг в ушную вену из расчета 10 мл на 1 кг массы тела кролика. Раствор лекарственного вещества или воду считают апирогенными, если после введения ни у одного из 3 подопытных кроликов ни при одном из трех измерений не наблюдалось повышения температу­ры тела более чем на 0,6 °С по сравнению с исходной температурой тела и в сумме повышение температуры у 3 кроликов не превышало 1,4 °С. Если у одного из двух кроликов температура тела повышается более указанной, испытание повторяют дополнительно на 5 кроликах.

Биологическое испытание на пирогенность, несмотря на специфичность, имеет ряд недостатков, связанных с необходимостью содержания большого количества кроликов (метод экономически дорог) и с индивиду­альной чувствительностью кроликов. В связи с этим в

ГФ XI указано (статья «Определение пирогенности»), что необходимо проверять индивидуальную чувстви­тельность кроликов и для определения пирогенности не разрешается использовать кроликов-альбиносов.

Кроме официального биологического метода испы­тания на пирогенность, за рубежом широко применяют лимулус-тест (лим-тест), основанный на образовании геля при взаимодействии бактериальных пирогенов с лизатом амебоцитов Limulus polyphemus. Во ВНИИФ разработан аналогичный чувствительный, но более простой метод, основанный на способности грамотри- цательных микроорганизмов (основные продуценты пирогенных веществ) образовывать гель в 3 % раство­ре калия гидроксида.

Проводятся также исследования по разработке фи­зико-химических методов анализа пирогенных веществ, преимуществом которых является большая чуёстви- телькость, простота, доступность, сокращение эконо­мических затрат и времени исследований.

Стерилизация (от лат. sterilis — бесплодный) — полное уничтожение в том или ином объекте живых микроорганизмов и их спор. Стерилизация имеет боль­шое значение при изготовлении всех лекарственных форм и особенно инъекционных. В данном случае сле­дует стерилизовать посуду, вспомогательные материа­лы, растворители и готовый раствор. Таким образом, работа по изготовлению растворов для инъекций должна начинаться со стерилизации и стерилизацией заканчиваться. Стерилизация имеет большое значение при создании условий асептики, необходимой как при изготовлении лекарственных форм для инъекций, так и нестерильных лекарственных форм, о чем свидетель­ствуют приказы Минздрава СССР № 581 и № 582 от 30. 04. 85 г.

ГФ XI определяет стерилизацию как процесс умерщ­вления в объекте или удаления из него микроорганиз­мов всех видов, находящихся на всех стадиях разви­тия. Статья «Стерилизация», включенная в ГФ XI, тщательно переработана по сравнению с аналогичной статьей ГФ X. В ее создании принимали участие Всесоюзный научно-исследовательский институт фар­мации, Всесоюзный научно-исследовательский инсти­тут профилактической токсикологии и дезинфекции, Научно-исследовательский институт биофизики" и др. В статью не включены ненадежные методы стерилиза­ции, такие, как кипячение в воде, текучепаровая, имев­шие место в ГФ X.

Сложность проблемы стерилизации заключается, с одной стороны, в высокой жизнеспособности и боль­шом разнообразии микроорганизмов, с другой — тер­молабильностью многих лекарственных веществ и ле­карственных форм (эмульсий, суспензий и др.) или невозможностью по ряду причин использования дру­гих методов стерилизации. Отсюда исходят требова­ния к методам стерилизации: сохранение свойств ле­карственных форм и освобождение их от микроорга­низмов. Методы стерилизации должны быть удобными для использования в условиях аптек, особенно аптек лечебно-профилактических учреждений, в рецептуре которых инъекционные растворы составляют до 60— 80%.

В технологии лекарственных форм используют раз­ные методы стерилизации: термическую стерилизацию, стерилизацию фильтрованием, стерилизацию ультра­фиолетовой радиацией; радиационную стерилизацию, химическую стерилизацию.

Надежность методов зависит от соблюдения режи­ма стерилизации.

21. 1. термическая стерилизация

21. 1. 1. Воздушная стерилизация

Этот метод стерилизации осуществляется горячим воздухом в воздушных стерилизаторах при темпера­туре 180—200 °С. При этом погибают все формы микро­организмов за счет пирогенетического разложения белковых веществ.

Для стерилизации воздушным методом в аптеках используют шкаф сушильно-стерилизационный марки ШСС-250^I, стерилизатор сухожаровой СС-200, а также воздушные стерилизаторы с небольшим объе­мом стерилизационной камеры марки ВП-10, ГП-20 и ГП-40. В крупных больничных аптеках наиболее часто используют сушильно-стерилизационные шкафы ШСС-500 и ШСС-ЮООП^II и ШСС-500П и ШСС-100П (проходного типа).

Рис. 21.1. Шкаф сушильно-стерилизационный ШСС-500П.

Шкафы ШСС имеют аналогичную конструкцию и отличаются емкостью стерилизационной камеры. ШСС- 250 с прямоугольной стерилизационной камерой од­носторонний, ШСС-500П — двусторонний (имеется и односторонний). В стерилизаторе предусмотрена при­нудительная циркуляция воздуха, имеется фильтр очистки воздуха.

На рис. 21. 1. представлен наиболее широко исполь­зуемый в аптеках лечебных учреждений шкаф сушиль­но-стерилизационный ШСС-500П.

Эффективность воздушной стерилизации зависит от температуры и времени. Равномерность прогрева объектов зависит от степени их теплопроводности и правильности расположения внутри стерилизационной камеры для обеспечения свободной циркуляции горя­чего воздуха. Стерилизуемые объекты должны быть расфасованы в соответствующую тару, плотно укупо­

рены и свободно размещены в стерилизаторах. В связи с тем что воздух обладает невысокой теплопровод­ностью, прогрев стерилизуемых объектов происходит довольно медленно, поэтому загрузка должна произво­диться в ненагретые стерилизаторы или когда темпера­тура внутри них не превышает 60 °С. Время, рекомен­дуемое для стерилизации, должно отсчитываться с мо­мента нагрева воздуха в стерилизаторе дет темпера­туры 180—200 °С.

Воздушный метод используют для стерилизации термостойких порошкообразных лекарственных веществ (натрия хлорида, цинка оксида, талька, глины белой и др.) при режиме, приведенном в табл. 21. 1.

Таблица 21.1. Режим стерилизации термостабильных порошков

Масса образца, г	Температура, °С	Минимальное время стерилизационной выдержки, мин
До 25	180	30
	200	10
От 25 до 100	180	40
	200	20
От 100 до 200	180	60
	200	30

С целью равномерного прогрева толщина слоя по^ рошков должна быть не более 6—7 см.

Масла, минеральные и растительные, жиры, лано­лин, вазелин, воск стерилизуют при следующем ре­жиме (табл. 21.2).

Таблица 21.2. Режим стерилизации масел, вазелина

Масса образца, г	Температура, °С	Минимальное время стерилизационной выдерж­ки, мин
До 100	180	30
	200	15
От 100 до 500	180	40
	200	20

Предельная масса при надежной стерилизации не должна превышать 500 г.

Изделия из стекла, металла, силиконовой резины, фарфора, установки для стерилизации фильтрованием с фильтрами и приемники фильтрата стерилизуют при 180 °С в течение 60 мин. Мелкие стеклянные и метал­лические предметы (воронки, пипетки и др.) помещают в стерилизаторы в специальных биксах.

Растворы нельзя стерилизовать в воздушных стери­лизаторах, так как из-за плохой теплопроводности воздух, имеющий температуру 100—120 °С, не обеспе­чивает быстрый прогрев растворов до нужной темпера­туры. Так, например, раствор натрия хлорида (объем 200 мл), помещенный в стерилизатор с температурой 120 °С, через 1 ч прогревается всего лишь до 60 °С. Горячий воздух более высокой температуры может вызвать разложение лекарственных веществ и разрыв флаконов вследствие разницы давления внутри и снаружи их.

Воздушный метод стерилизации широко использу­ют в аптеках.