2007_-Byelorussian_Pharmacopoeia_Volume_2

с экстрактом. Растворитель выпаривают досуха на водяной бане. Остаток нагревают при температуре от 100°С до 105°С в течение 15 мин. Сухой остаток растворяют в нескольких миллилитрах хлороформа Р, прибавляют 20,0 мл

0,01 М раствора серной кислоты и удаляют хлороформ выпариванием на водяной бане. После охлаждения избыток кислоты титруют 0,02 М

раствором­ натрия гидроксида, используя в качестве индикатора смешанный раствор метилового красного Р.

Содержание суммы алкалоидов в пересчете на гиосциамин в процентах рассчитывают по формуле:

57,88×(20-n) ,

(100-d)×m

где:

d — потеря в массе при высушивании измельченного сырья (180), %;

n — объем 0,02 M раствора натрия гидрок-

сида, пошедшего на титрование, мл;

m — масса навески испытуемого сырья, г.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.

Душицы трава

Origani herba

OREGANO

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранная во время цветения и высушенная трава многолетнего травянистого растения

Origanum vulgare L.

Содержит:

––эфирного масла:

––цельное сырье: не менее 1 мл/кг в пересчете на сухое сырье;

––измельченное сырье: не менее 0,8 мл/кг в пересчете на сухое сырье;

––суммы флавоноидов в пересчете на лю-

теолин (С15Н10О6; М.м. 286,2): не менее 1,0 % в сухом сырье.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

А.Внешниепризнаки(#2.8.3).Цельныеили частично измельченные олиственные цветоносные стебли длиной до 20 см. Листья супротивные, черешковые, продолговато-яйцевидные, к верхушке заостренные, мелкозубчатые или почти цельнокрайние, длиной от 3 мм до 30 мм и шириной от 2,5 мм до 19 мм. Стебли четырехгранные, мягко опушенные или почти голые. Соцветия в виде щитковидной метелки, раскидистые многоцветковые, цветки собраны в полумутовки. Прицветники длиннее чашечки,

продолговатые, острые. Чашечка с треугольноланцетовидными зубцами, голая или с редкими волосками. Венчик двугубый, цветки мелкие, длиной 3—5 мм. Цвет листьев сверху зеленый, снизу — бледно-зеленый; стеблей — зеленый или красновато-фиолетовый; прицветников и чашечки — коричневато-фиолетовый или зеленовато-коричневый;венчика—коричневато- фиолетовый или коричневато-розовый. Запах ароматный.

В. Микроскопия (#2.8.3). При просматри-

вании листа с поверхности видны клетки верхнего эпидермиса со слабо извилистыми, кое-где четковидно-утолщенными стенками. Клетки нижнего эпидермиса более извилистые. Устьица многочисленные,окруженыдвумяклеткамиэпидермиса, расположенными перпендикулярно устьичной щели (диацитный тип). Волоски двух типов: простыеиголовчатые,расположеныповсейпластинке листа, особенно с нижней стороны. Простые волоски многочисленные, грубобородавчатые­ , 1—5-клеточные; головчатые волос­ ки­ на одноклеточнойножкесовальнойодноклеточнойголовкой. Эфиромасличные железки 8-клеточные, расположеныпреимущественнонанижнейсторонелиста; у места прикрепленияжелезки клетки эпидермиса нередко образуют розетку.

С. Тонкослойная хроматография

(2.2.27).

Испытуемый раствор. К 1,0 г измельченно-

го сырья (355) прибавляют 5 мл метиленхлорида Р, встряхивают в течение 3 мин и фильтруют через бумажный фильтр с 2 г натрия сульфата безводного Р.

Раствор сравнения. 1 мг тимола Р и 10 мкл карвакрола Р растворяют в 10 мл метиленхлорида Р.

Пластинка: ТСХ пластинка со слоем силикагеля Р.

Подвижная фаза: метиленхлорид Р. Наносимый объем пробы: по 20 мкл в виде

полос.

Фронт подвижной фазы: не менее 15 см от линии старта.

Высушивание: на воздухе.

Проявление: пластинку опрыскивают раст­ вором анисового альдегида Р, используя 10 мл на квадратнуюпластинкусостороной200мм,инагревают в течение 10 мин при температуре от 100°С до 105°С. Просматривают при дневном свете.

Результаты: ниже приведена последовательность зон хроматограмм раствора сравнения и испытуемого раствора. На хроматограмме испытуемого раствора в нижней трети и в верхней части могут обнаруживаться и другие зоны.

ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)

Допустимые примеси (#2.8.2). Несырье-

вые части растения: почерневшие и побуревшие части растения — не более 7 %; кусочки стеблей

и боковых веточек, в том числе отделенные при анализе, — не более 40 %. Органические примеси: не более 1 %. Минеральные примеси: не более 1 %.

Верх хроматографической пластинки

Потеря в массе при высушивании (2.2.32).

Не более 13,0 %, 3,000 г измельченного сырья (2000) сушат при температуре от 100°С до 105°С.

Общая зола (2.4.16). Не более 10,0 %.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте (2.8.1). Не более 4,0 %.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение эфирного масла (2.8.12,

метод С). 25,0 г измельченного сырья (2400) помещают в колбу вместимостью 1000 мл, прибавляют 400 мл воды Р в качестве жидкости для перегонки. Время перегонки 2 ч.

Определение содержания суммы флавоноидов в пересчете на лютеолин. 1,000 г

измельченного сырья (710) помещают в коническую колбу со шлифом, прибавляют 50,0 мл спирта (60 %, об/об) Р. Колбу закрывают, встряхивают и взвешивают с точностью до 0,01 г и кипятят с обратным холодильником в водяной бане в течение 1,5 ч. Затем колбу с содержимым охлаждают до комнатной температуры, взвешивают и доводят массу колбы до первоначальной спиртом (60 %, об/об) Р. Извлечение фильтруют через бумажный фильтр, отбрасывая первые 10 мл фильтрата (раствор А).

Испытуемый раствор. К 1,0 мл раствора А, прибавляют 4,0 мл раствора 20 г/л алюминия хлорида Р в 96 % спирте Р и доводят спиртом

(60 %, об/об) Р до объема 50,0 мл.

Компенсационный раствор. К 1,0 мл раст-

вора А прибавляют 0,1 мл кислоты уксусной ле-

дяной Р и доводят спиртом (60 %, об/об) Р до объема 50,0 мл.

Через 30 мин измеряют оптическую плотность испытуемого раствора (2.2.25) при 400 нм.

Содержание суммы флавоноидов в пересчете на лютеолин в процентах рассчитывают по формуле:

A×2500 , 549,41×m

где:

549,41 — удельный показатель поглощения комплекса лютеолина с алюминия хлоридом;

A — оптическая плотность испытуемого раствора;

m — масса навески испытуемого сырья, г.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.

Дягиля корни

Angelicae radices

ANGELICA ROOT

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Цельные или измельченные высушенные корневища и корни Angelica archangelica L. (Archangelica­ officinalis Haffm.). Содержат не ме-

нее 2,0 мл/кг эфирного масла в пересчете на сухое сырье.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

A. Внешние признаки (#2.8.3). Корне-

вища серовато-коричневого или красноватокоричневого цвета, поперечно-морщинистые. Корни серовато-коричневого или красноватокоричневого цвета, цилиндрические, продольноморщинистые, иногда разветвленные. На верхней части корневищ иногда имеются остатки стебля и прикорневых листьев. На изломе корни шероховатые, серовато-белые, рыхлые, отчетливовиднакора,вкоторойзаметнысекреторные каналы в виде коричневых пятен, и ярко-желтая или серовато-желтая древесина. В центре корневища, в отличие от корней, есть сероватая или коричневато-белая сердцевина. Вкус горький.

B. Микроскопия (#2.8.3). При просматривании измельченного сырья (355) (коричневатобелого цвета) с использованием раствора хлоралгидрата Р видны: фрагменты пробки, состоящейизнесколькихслоевтонкостенныхсероватокоричневых или красновато-коричневых клеток; фрагменты крупных желтовато-коричневых секреторных каналов; фрагменты сердцевинных лучей толщиной в 2—4 клетки; фрагменты кси-

лемы с сердцевинными лучами и сосудами с сетчатыми утолщениями.

При использовании 50 % (об/об) раствора глицерина Р в измельченном сырье (355) видны многочисленные простые крахмальные зерна диаметром 2—4 мкм.

C. Просматривают хроматограммы, полу-

ченные в разделе «Корни Levisticum officinale

Koch.».

Результаты: ниже приведена последовательность зон хроматограмм раствора сравнения и испытуемого раствора.

ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)

Корни Levisticum officinale Koch. Тонко­ слойная хроматография (2.2.27).

Испытуемый раствор. К 1,0 г свежеизмель-

ченного сырья (355) прибавляют 5 мл метанола Р и кипятят в течение 30 с. Охлаждают, фильтруют.

Раствор сравнения. 25 мкл эвгенола Р и 5 мг кумарина Р растворяют в 10 мл метанола Р.

Пластинка: ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254 Р.

Верх хроматографической пластинки

Подвижная фаза: метиленхлорид Р — толуол Р (50:50, об/об).

Наносимый объем пробы: по 20 мкл в виде полос.

Фронт подвижной фазы: дважды не менее чем по 10 см.

Высушивание: на воздухе.

Проявление:просматриваютвультрафиолетовом свете при длине волны 254 нм. Отмечают зоны поглощения, соответствующие кумарину и эвгенолу на хроматограмме раствора сравне-

ния. Просматривают в ультрафиолетовом свете при длине волны 365 нм.

Результаты: на хроматограмме испытуемого раствора не должны обнаруживаться флуо­ ресцирующие зоны от бледно-синего до белого цвета между зонами кумарина и эвгенола на хроматограмме раствора сравнения.

Допустимые примеси (#2.8.2). Несырье-

вые части растения: основания стеблей и листьев — не более 5 %; частицы, потерявшие естественную окраску, — не более 5 %. Сумма других допустимых примесей: не более 1 %.

Потерявмассепривысушивании(2.2.32).

Не более 10,0 %. 1,000 г измельченного сырья (355) сушат при температуре от 100°С до 105°С в течение 2 ч.

Общая зола (2.4.16). Не более 10,0 %.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте (2.8.1). Не более 2,0 %.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определяют содержание эфирного масла (2.8.12, метод А). 40,0 г испытуемого сырья, измельченного непосредственно перед испытанием (500), помещают в круглодонную колбу вместимостью 2000 мл, прибавляют 10 капель

вазелинового масла Р и 500 мл воды Р. В граду-

ированную трубку помещают 0,5 мл ксилола Р. Перегонку проводят со скоростью 2—3 мл/мин в течение 4 ч.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.

Женьшеня корни

Ginseng radices

GINSENG

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Цельные или разрезанные на части высушенные корни (белый женьшень) или обработанные паром и затем высушенные корни (красный женьшень) Panax ginseng C. A. Meyer. Содержат не менее 0,40 % суммы панаксо-

зидов Rg1 (C42H72O14 · 2H2O; М.м. 837) и Rb1 (C54H92O23 · 3H2O; М.м. 1163) в пересчете на сухое сырье или не менее 1,0 % суммы панаксозидов в

пересчете на панаксозид Rb1 (C54H92O23 · 3H2O; М.м. 1163) в сухом сырье.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

A. Внешние признаки (#2.8.3). Корни стержневые, большей частью цилиндрические, с ответвлениями. Могут быть изогнутыми. Длина корней до 20 см, диаметр до 2,5 см. Поверхность отбледно-желтогодобелогосжелтоватымоттен-

ком цвета (белый женьшень) или коричневатокрасного цвета (красный женьшень) с продольными морщинами. В верхней части могут быть остатки побегов в виде короны. Излом ровный. На поперечном срезе видна широкая наружная зона с рассеянными смоляными каналами оранжево-красного цвета. В нижней части белого женьшеня имеются многочисленные мелкие корешки, которые обычно отсутствуют в красном женьшене. Запах специфический.

B. Микроскопия (#2.8.3). При просма-

тривании измельченного сырья (355) (светложелтого цвета) с использованием раствора хлоралгидрата Р видны: многочисленные фрагменты тонкостенных паренхиматозных клеток и фрагменты крупных секреторных каналов, содержащих смолу желтовато-коричневого цвета; нелигнифицированные трахеиды и частично лигнифицированные сосуды со спиральной или сетчатой утолщенностью, по отдельности или группами; рассеянные друзы оксалата кальция.

При использовании 50 % (об/об) раствора глицерина Р в измельченном сырье (355) видны многочисленные крахмальные зерна, простые или 2—6-сложные, диаметром от 1 мкм до 10 мкм. В красном женьшене крахмальные зерна часто деформированы и разрушены под действием пара или могут полностью отсутствовать.

C. Тонкослойная хроматография

(2.2.27).

Испытуемый раствор. К 1,0 г измельчен-

ного сырья (355) прибавляют 10 мл 70 % (об/об) раствора метанола Р. Кипятят с обратным холодильником в течение 15 мин. Охлаждают, фильтруют и доводят метанолом Р до объема

10,0 мл.

Раствор сравнения. 5,0 мг эсцина Р и 5,0 мг арбутина Р растворяют в 1 мл метанола Р.

Пластинка: ТСХ пластинка со слоем силикагеля Р (5—40 мкм) [или ТСХ пластинка со слоем силикагеля Р (2—10 мкм)].

Подвижная фаза: этилацетат Р — вода Р — бутанол Р (25:50:100, об/об/об), использу-

ют верхний слой после отстаивания в течение 10 мин. Камеру не насыщают парами подвижной фазы.

Наносимый объем пробы: по 20 мкл [4 мкл]

в виде полос.

Фронт подвижной фазы: не менее 10 см

[5 см] от линии старта.

Высушивание: на воздухе.

Проявление: пластинку опрыскивают раст­ вором анисового альдегида Р. Нагревают при температуре от 105°С до 110°С в течение 5—10 мин. Просматривают при дневном свете.

Результаты: ниже приведена последовательность зон хроматограмм раствора сравнения и испытуемого раствора.

Верх хроматографической пластинки

ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)

Допустимые примеси (#2.8.2). Сумма допустимых примесей: не более 2 %.

Panax quinquefolium. Просматривают хроматограмму, полученную в разделе «Количественное определение. Определение содержания суммы панаксозидов Rg1 и Rb1». В случае замены корней Panax ginseng на корни Panax quinquefolium на хроматограмме испытуемого раствора отсутствует пик, соответствующий панаксозиду Rf (рисунок 1).

Потеря в массе при высушивании

(2.2.32). Не более 10,0 %. 1,000 г измельченного сырья (355) сушат при температуре от 100°С до

105°С.

Общая зола (2.4.16). Не более 7,0 %.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте (2.8.1). Не более 1,0 %.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение содержания суммы па-

наксозидов Rg1 и Rb1. Жидкостная хроматография (2.2.29).

50 г испытуемого сырья полностью измель-

чают (355).

Испытуемый раствор. 1,00 г измельченного сырья(355)помещаютвкруглодоннуюколбувместимостью250мл,прибавляют70мл50 %(об/об) раствора метанола Р, добавляют несколько кусочков пемзы и кипятят с обратным холодильником на водяной бане в течение 1 ч. Охлаждают,

центрифугируют и собирают надоса­дочную жидкость. Остаток переносят в ту же круглодонную колбу и повторяют экстракцию. Надосадочные жидкости объединяют и выпаривают досуха при пониженном давлении при температуре не выше 60°С. Остаток растворяют в 20,0 мл смеси из

ацетонитрила Р и воды Р (20:80, об/об). 2,0 мл полученного раствора разводят смесью из аце-

тонитрила Р и воды Р (20:80, об/об) до объема

10,0 мл и фильтруют через мембранный фильтр с диаметром пор 0,45 мкм.

Раствор сравнения. 3,0 мг панаксозида Rg1 Р, 3,0 мг панаксозида Re Р, 3,0 мг панаксозида

Rf Р и 3,0 мг панаксозида Rb1 Р растворяют в метаноле Р и доводят до объема 10,0 мл этим же растворителем.

Условия хроматографирования:

––колонка длиной 0,125 м и внутренним диаметром 4,6 мм, заполненная силикагелем окта-

децилсилильным для хроматографии Р с раз-

мером частиц 5 мкм;

––температура: 35°С;

––подвижная фаза:

––подвижная фаза А: вода Р, доведенная

кислотой фосфорной Р до рН 2;

––подвижная фаза B: ацетонитрил Р;

––скорость подвижной фазы: 1,0 мл/мин;

––спектрофотометрический детектор,

длина волны 203 нм;

––время уравновешивания системы: 20 мин перед каждым вводом;

––объем вводимой пробы: 20 мкл.

Порядок выхода пиков: панаксозид Rg1, па-

наксозид Re, панаксозид Rf и панаксозид Rb1.

Пригодность хроматографической систе-

мы: раствор сравнения:

––разрешение между пиками панаксозида Rg1 и панаксозида Re не менее 1,0.

Содержание панаксозида Rg1 и панаксозида Rb1 в процентах рассчитывают по формуле:

где:

S1 — площадь пика панаксозида Rb1 на хроматограмме испытуемого раствора;

S2 — площадь пика панаксозида Rg1 на хроматограмме испытуемого раствора;

S3 — площадь пика панаксозида Rb1 на хроматограмме раствора сравнения;

S4 — площадь пика панаксозида Rg1 на хроматограмме раствора сравнения;

m1 — масса навески испытуемого сырья, г; m2 — масса навески панаксозида Rb1 в рас-

творе сравнения, мг;

m3 — масса навески панаксозида Rg1 в растворе сравнения, мг;

Р1 — содержание панаксозида Rb1 в реактиве, %;

Р2 — содержание панаксозида Rg1 в реактиве, %.

Определение содержания суммы панаксозидов в пересчете на панаксозид Rb1. 1,000 г

измельченного сырья (710) помещают в колбу

со шлифом вместимостью 250 мл, прибавляют 50,0 мл спирта (40 %, об/об) Р, взвешивают с точностью до 0,01 г и нагревают с обратным холодильником в водяной бане в течение 60 мин. Охлаждают, доводят массу до первоначальной спиртом (40 %, об/об) Р и фильтруют (раствор А).

Испытуемыйраствор.2,0млраствораАпо-

мещаютвколбусошлифомвместимостью50мл, прибавляют 1,0 мл раствора 50 г/л кислоты фос-

форномолибденовой Р в 96 % спирте Р, 10 мл

воды Р и нагревают с обратным холодильником

вводяной бане в течение 2 ч. Быстро охлаждают до комнатной температуры. Полученный раствор количественно переносят в мерную колбу вместимостью 50 мл, используя воду Р, и доводят до объема 50,0 мл этим же растворителем.

Компенсационный раствор. 2,0 мл спирта

(40 %, об/об) Р помещают в колбу со шлифом вместимостью 50 мл, прибавляют 1,0 мл раст-

вора 50 г/л кислоты фосфорномолибденовой Р

в96 % спирте Р, 10 мл воды Р и нагревают с обратным холодильником в водяной бане в течение 2 ч. Быстро охлаждают до комнатной температуры. Полученный раствор количественно переносят в мерную колбу вместимостью 50 мл, используя воду Р, и доводят до объема 50,0 мл этим же растворителем.

Измеряют оптическую плотность (2.2.25) испытуемого раствора при 730 нм.

Содержание суммы панаксозидов в пересчете на панаксозид Rb1 в процентах рассчитывают по формуле:

А×1250 , m×193

где:

193 — удельный показатель поглощения продуктов реакции панаксозида Rb1 с кислотой фосфорномолибденовой;

А — оптическая плотность испытуемого раствора;

m — масса навески испытуемого сырья, г.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.

Зверобоя трава

Hyperici herba

St. JOHN’S WORT

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранная в фазу цветения и высушенная трава многолетних травяных растений

Hyperiсum perforatum L. и Hypericum maculatum

Crantz (H. quadrangulum L.). Содержит не менее 0,08 % суммы гиперицинов в пересчете на гиперицин (С30Н16О8; М.м. 504,4) в сухом сырье или

не менее 1,5 % суммы флавоноидов в пересчете на рутин (С27Н30О16; М.м. 611) в сухом сырье.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

А. Внешние признаки (#2.8.3). Верхние части стеблей с листьями, цветками, бутонами и недозрелыми плодами. Стебли полые, цилиндрические, длиной до 30 см, с двумя (H. perforatum) или четырьмя (H. maculatum) продольными ребрами. Листья супротивные, сидячие, продолговатые или продолговато-овальные, цельнокрайние, голые, до 3,5 см, шириной до 1,4 см. У Hypericum perforatum листья с многочисленными просвечивающимися вместилищами в виде светлых точек. Цветки многочисленные, около 1—1,5 см в диаметре, собраны в щитковидную метелку. Чашечка сростнолистная, глубокопятираздельная, чашелистики ланцетовидные, тонко заостренные (H. perforatum) или продолговатоовальные с притупленной верхушкой (H. maculatum). Венчик раздельнолепестной, в 2—3 раза длиннее чашечки, лепестков пять. Тычинки многочисленные, сросшиеся у основания нитями в три пучка. Плод — трехгнездная многосемянная коробочка. Цвет стеблей — от зеленоватожелтого до серовато-зеленого, иногда розоватофиолетовый; листьев — от серовато-зеленого до темно-зеленого; лепестков — ярко-желтый или желтый с черными точками, хорошо заметными под лупой; плодов — зеленовато-коричневый. Запах слабый, своеобразный.

В. Микроскопия (#2.8.3). При просматри-

вании листа с поверхности видны клетки эпидермиса с извилистыми стенками, имеющими четковидные утолщения. Устьица аномоцитного или парацитного типа, расположены только на нижней стороне листа. Встречаются вместилища двух типов: пигментированные вместилища овальной формы, содержащие красноватофиолетовый пигмент, расположены в основном по краю листа; бесцветные просвечивающиеся вместилища (H. perforatum) встречаются по всей пластинке листа, вдоль жилок они продольно вытянуты, у Hypericum maculatum встречаются редко или отсутствуют.

D. Тонкослойная хроматография

(2.2.27).

Испытуемый раствор. К 0,5 г измельченно-

го сырья (500) прибавляют 10 мл метанола Р, выдерживают в водяной бане при температуре 60°С в течение 10 мин при перемешивании и фильтруют.

Раствор сравнения. 5 мг рутина Р и 5 мг ги-

перозида Р растворяют в метаноле Р и доводят объем до 5 мл этим же растворителем.

Пластинка: ТСХ пластинка со слоем силикагеля Р.

Подвижная фаза: кислота муравьиная безводная Р — вода Р — этилацетат Р (6:9:90, об/об).

Наносимый объем пробы: 10 мкл испытуе-

мого раствора и 5 мкл раствора сравнения в виде полос.

Фронт подвижной фазы: не менее 10 см от линии старта.

Высушивание: при температуре от 100°С до 105°С в течение 10 мин.

Проявление: пластинку опрыскивают раст­ вором 10 г/л дифенилборной кислоты амино­ этилового эфира Р в метаноле Р и затем раст­ вором 50 г/л макрогола 400 Р в метаноле Р.

Через 30 мин пластинку просматривают в ультрафиолетовом свете при длине волны 365 нм.

Результаты: на хроматограмме раствора сравнения в нижней трети обнаруживаются флуоресцирующая­ зона (рутин) и расположенная над ней флуоресцирующая зона (гиперозид), обе зоны желто-оранжевого цвета. На хроматограмме испытуемого раствора в нижней трети обнаруживаются красно-оранжевые флуоресцирующие зоны, соответствующие рутину и гиперозиду, в нижней части верхней трети — флуоресцирующая зона (псевдогиперицин)

инад ней флуоресцирующая зона (гиперицин), обе зоны красного цвета. На хроматограмме испытуемого раствора могут обнаруживаться

идругие зоны.

ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)

Допустимые примеси (#2.8.2). Несырье-

вые части растения: стебли — не более 50 %. Органические примеси: не более 1 %. Минеральные примеси: не более 1 %.

Потерявмассепривысушивании(2.2.32).

Не более 13,0 %. 3,000 г измельченного сырья (2000) сушат при температуре от 100°С до

105°С.

Общая зола (2.4.16). Не более 8,0 %.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте (2.8.1). Не более 1,0 %.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение содержания суммы гиперицинов в пересчете на гиперицин.

Испытуемый раствор. 0,800 г измельчен-

ного сырья (500), 60 мл смеси из воды Р и те-

трагидрофурана Р (20:80, об/об) помещают

вкруглодонную колбу вместимостью 100 мл с магнитной мешалкой. Смесь кипятят с обратным холодильником в водяной бане при температуре 70°С в течение 30 мин, затем центрифугируют при 700 g в течение 2 мин. Надосадочную жидкость помещают в колбу вместимостью 250 мл. Остаток помещают в ту же круглодонную колбу объемом 100 мл, прибавляют 60 мл смеси из воды Р и тетрагидрофурана Р (20:80,

об/об), нагревают с обратным холодильником

втечение 30 мин и центрифугируют при 700 g

втечение 2 мин. Надосадочную жидкость помещают в колбу с первым извлечением и вы-

паривают досуха. Остаток после выпаривания с помощью ультразвука растворяют в 15 мл метанола Р, переносят в мерную колбу вместимостью 25 мл, в которую прибавляют метанол Р после промывания колбы объемом 250 мл, и доводят до объема 25,0 мл этим же растворителем. Центрифугируют и фильтруют 10 мл надосадочной жидкости через мембранный фильтр (0,2 мкм), отбрасывая первые 2 мл фильтрата. 5,0 мл фильтрата доводят метанолом Р до объема 25,0 мл.

Компенсационный раствор. Метанол Р.

Измеряют оптическую плотность (2.2.25) испытуемого раствора при 590 нм. Содержание гиперицинов в пересчете на гиперицин в процентах рассчитывают по формуле:

А×125 , m×870

где:

870 — удельный показатель поглощения гиперицина;

А — оптическая плотность испытуемого раствора;

m — масса навески испытуемого сырья, г.

Определение содержания суммы флавоноидов в пересчете на рутин. 1,000 г из-

мельченного сырья (710) помещают в колбу вместимостью 150 мл, прибавляют 30 мл спирта (50 %, об/об) Р. Нагревают с обратным холодильником в водяной бане в течение 30 мин, периодически встряхивая для смывания частиц сырья со стенок колбы. Горячее извлечение процеживают через ватный тампон в мерную колбу вместимостью 100 мл так, чтобы частицы сырья не попадали на фильтр. Ватный тампон помещают в колбу для экстрагирования и прибавляют 30 мл спирта (50 %, об/об) Р. Экстракцию повторяют еще дважды в описанных выше условиях, процеживая извлечение в ту же мерную колбу. Охлаждают и доводят спиртом (50 %, об/об) Р до объема 100,0 мл (раствор А).

Испытуемый раствор. 1,0 мл раствора А и 1,0 мл раствора 50 г/л алюминия хлорида Р в 96 % спирте Р доводят 96 % спиртом Р до объ-

ема 25,0 мл.

Раствор сравнения. 0,0500 г ФСО рутина,

предварительно высушенного при температуре от 130°С до 135°С в течение 3 ч, растворяют в 96 % спирте Р при нагревании на водяной бане, охлаждают и доводят до объема 100,0 мл этим же растворителем. К 1,0 мл полученного раствора прибавляют 1,0 мл раствора 20 г/л алюми-

ния хлорида Р в 96 % спирте Р и доводят 96 %

спиртом Р до объема 25,0 мл.

Компенсационный раствор. 1,0 мл раствора А и 1 каплю кислоты уксусной разведенной Р

доводят 96 % спиртом Р до объема 25,0 мл Через 40 мин измеряют оптическую плот-

ность (2.2.25) растворов при 415 нм.

Содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин в процентах рассчитывают по формуле:

А×m0 ×100 ,

А0 ×m

где:

А — оптическая плотность испытуемого раствора; ненияА0; — оптическая плотность раствора срав-

m — масса навески испытуемого сырья, г; m0 — масса навески ФСО рутина, г.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.

Змеевика корневища

Bistortae rhizomata

BISTORT ROOT*

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные после отцветания, очищенные от корней, остатков листьев и стеблей, отмытые от земли и высушенные корневища многолетних травянистых растений Polygonum bistorta L. и P. carneum C. Koch. Содержат не менее 15,0 % дубильных веществ в пересчете на танин в сухом сырье.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

А. Внешние признаки (#2.8.3). Корневище твердое, змеевидно изогнутое, несколько сплюснутое, с поперечными кольчатыми утолщениями

иследами обрезанных корней. Длина корневища от 3 см до 10 см, толщина от 1,5 см до 2 см. Цвет пробки темный, красновато-коричневый; на изломе — розоватый или коричневато-розовый, излом ровный. Запах отсутствует.

В. Микроскопия (#2.8.3). На поперечном срезе видно, что корневище имеет пучковый тип строения. Снаружи оно покрыто тонким слоем темно-коричневой пробки. Проводящие пучки расположены кольцом, овальной или веретеновидной формы (в сечении), коллатеральные, открытые. С наружной (со стороны флоэмы)

ивнутренней (со стороны ксилемы) стороны к пучкам примыкают небольшие группы слабо­ утолщенных, слегка одревесневших склеренхимных волокон. Основная паренхима состоит из округлых клеток, образующих крупные, особенно в сердцевине, межклетники (аэренхима). В клетках паренхимы содержатся мелкие простые крахмальные зерна и очень крупные друзы оксалата кальция.

С. К 2 г измельченного сырья (1000) прибавляют 20 мл воды Р, кипятят с обратным холо-

дильником в течение 10 мин и фильтруют. К 1 мл полученного раствора прибавляют 2—3 капли

раствора железа (III) аммония сульфата Р5.

Появляется черно-синее окрашивание.

ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)

Допустимыепримеси(#2.8.2).Несырьевые части растения: корневища, почерневшие в изломе, — не более 10 %; остатки листьев и стеб­ лей, в том числе отделенные при анализе, — не более 1 %. Органические примеси: не более 0,5 %. Минеральные примеси: не более 1 %.

Потерявмассепривысушивании(2.2.32).

Не более 13,0 %. 2,000 г измельченного сырья (2000) сушат при температуре от 100°С до

105°С.

Общая зола (2.4.16). Не более 10,0 %.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

2,000 г измельченного сырья (2400) помещают в коническую колбу со шлифом вместимостью 500 мл, прибавляют 250 мл кипящей воды Р и кипятят с обратным холодильником

втечение 30 мин при периодическом перемешивании. Затем охлаждают до комнатной температуры, процеживают и доводят водой Р до объема 250,0 мл.

25,0 мл полученного извлечения помещают

вконическую колбу вместимостью 750 мл, прибавляют 500 мл воды Р, 25,0 мл раствора индигосульфокислоты (0,25 мг индигокармина Р растворяют в 6,5 мл кислоты серной Р, прибав-

ляют 6,5 мл кислоты серной Р, доводят водой Р

до объема 250 мл и фильтруют). Титруют при постоянном перемешивании 0,02 М раствором­ калия перманганата до желтого окрашивания.

Параллельно проводят контрольный опыт. 1 мл 0,02 М раствора калия перманганата

соответствует 0,004157 г дубильных веществ в пересчете на танин.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.

Золототысячника трава

Centaurii herba

CENTAURY

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранная в фазу цветения и высушенная трава одно-двухлетних травянистых растений

Centaurium erythraea Rafn, включая С. majus (H. etL.)Zeltner,C.suffruticosum(Griseb.)Ronn.(syn.:

Erythraea centaurium Persoon; C. umbellatum Gilibert; C. minus Gars.) и C. pulchellum (Sw.) Druce (syn.: Erythraea pulchella (Sw.) Hornem).

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

А. Внешние признаки (#2.8.3). Стебли голые, простые или разветвленные, четырехгранные, иногда с крылатыми ребрами. Листья сидячие, супротивные, с пятью жилками, средние — продолговато-яйцевидные, голые, цельнокрайние, с пятью жилками, верхние — продолговатоили линейно-ланцетные. Соцветия верхушечные,щитковидные.Цветкиправильные. Чашечкасростнолистнаяспятьюдолями.Венчик с длинной цилиндрической трубкой и пятираздельным отгибом. Тычинок пять. Цвет стеблей, листьев и чашечки желтовато-зеленый, венчика — розовато-фиолетовый, желтовато-розовый и желтый. Запах слабый. Вкус очень горький.

В. Микроскопия (#2.8.3). При просматривании листа с поверхности видны клетки эпидермиса обеих сторон с извилистыми стенками и складчатой кутикулой. Клетки эпидермиса нижней стороны листа отличаются меньшими размерами

иболее извилистыми стенками. Устьица с обеих сторон листа, в большем числе на нижней, окружены 2—3 околоустьичными клетками (анизоцитный тип), на нижней стороне листа C. pulchellum встречаются устьица диацитного типа. В клетках мезофилла листа видны мелкие одиночные призматические кристаллы оксалата кальция, иногда встречаются крестообразно сросшиеся кристаллы и — реже — мелкие друзы. Эпидермис чашечки с прямыми стенками, венчика — с тупыми стенками и складчатой кутикулой. Трехпоровая желтая пыльца диаметром около 30 мкм.

С. Тонкослойная хроматография (2.2.27).

Испытуемый раствор. К 1,0 г измельчен-

ного сырья (335) прибавляют 25 мл метанола Р, встряхивают в течение 15 мин и фильтруют. Фильтрат выпаривают досуха при пониженном давлении при температуре не выше 50°С. К остатку прибавляют метанол Р до получения 5 мл раствора (может содержать осадок).

Растворсравнения.1мгрутинаРи1мгсвертиамарина Р растворяют в 1 мл метанола Р.

Пластинка: ТСХ пластинка со слоем сили-

кагеля F254 Р [или ТСХ пластинка со слоем сили-

кагеля F245 Р с размером частиц 2—10 мкм].

Подвижная фаза: кислота муравьиная безводная Р — вода Р — этилформиат Р (8:4:88,

об/об/об). Камеру не насыщают парами подвижной фазы.

Наносимый объем пробы: по 10 мкл [по

5 мкл] в виде полос.

Фронт подвижной фазы: не менее 12 см

[6 см] от линии старта.

Высушивание: на воздухе.

Проявление А: пластинку просматривают в ультрафиолетовом свете при 254 нм.

Результаты А: ниже приведена последовательность зон хроматограмм раствора сравнения

ииспытуемого раствора. На хроматограмме испытуемогорастворамогутобнаруживатьсядругие зоны с меньшей интенсивностью поглощения.

Верх хроматографической пластинки

Проявление В: пластинку опрыскивают

раствором­ анисового альдегида Р, нагрева-

ют при температуре от 100°С до 105°С в течение 5—10 мин и просматривают при дневном свете.

Результаты В: ниже приведена последовательность зон хроматограмм раствора сравнения и испытуемого раствора. На хроматограмме испытуемого раствора могут обнаруживаться и другие менее интенсивные зоны.

Верх хроматографической пластинки

ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)

Допустимые примеси (#2.8.2). Несырье-

вые части растения: корни, в том числе отделенные при анализе, — не более 2 %. Органические примеси: не более 1 %. Минеральные примеси: не более 1 %.

Показатель горечи (2.8.15). Не менее

2000.

Потерявмассепривысушивании(2.2.32).

Не более 14,0 %. 2,000 г измельченного сырья (2000) сушат при температуре от 100°С до

105°С.

Общая зола (2.4.16). Не более 7,0 %.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте (2.8.1). Не более 1,5 %.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.

Ивы кора

Salicis cortex

WILLOW BARK

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Высушенные куски коры молодых ветвей и цельные части побегов текущего года различных видов рода Salix, включая S. purpurea L., S. alba L., S. fragilis L., S. daphnoides Vill. и другие. Со-

держит не менее 1,5 % производных салицина

в пересчете на салицин (С13Н18О7; М.м. 286,3) в сухом сырье.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

A.Внешние признаки (#2.8.3). Трубчатые или желобоватые куски коры различной длины, толщиной 1—2 мм, гибкие, изогнутые. Наружная поверхность коры гладкая или немного морщинистая, цвет от зеленовато-желтого до коричневато-серого. Внутренняя поверхность белая, желтая или красновато-коричневая, гладкая или с продольными валиками различной длины. В зависимости от вида снаружи излом чаще мелкощетинистый, внутри грубоволокнистый. Диаметр молодых побегов не более 10 мм. Древесина белого или бледно-желтого цвета. Запах слабый, своеобразный.

B.Микроскопия (#2.8.3). На поперечном срезе видна хорошо развитая кора, состоящая из двуслойной эпидермы, перидермы, уголковой колленхимы, первичной коры, колец механических элементов, первичной и вторичной флоэмы. Эпидермальные клетки имеют сильно утолщенные периклинальную и радиальные стенки. Трихом нет. Феллоген откладывается субэпидермально. Пробка повторных перидерм гетерогенная: тонкостенная и с утолщенными стенками. В первичной коре встречаются клетки с друзами оксалата кальция. Танидоносные клетки расположены группами либо более или менее равномерно. Около групп волокон коровой склеренхимы есть кристаллоносная обкладка. Оксалат кальция чаще всего представлен монокристаллами различной формы. Первичная флоэма частично облитерирована. В составе флоэмы преобладают ситовидные трубки, расположенные радиальными рядами по 2—4, чередуясь с клетками аксиальной паренхимы. Преобладают однорядные сердцевинные лучи, изредка встречаются двухрядные. Во вторичной флоэме ежегодно откладываются волокна тангентальными полосами, прерываемые лучами. При измельчении (2000) видны: группы волокон

сутолщенными стенками, окруженные кристаллоносной обкладкой; фрагменты эпидермиса; скопления колленхимы с уголковыми утолщениями; паренхима коры крупная, с равномерно утолщенными стенками, содержит друзы окса-

лата кальция; фрагменты порошка мелких веточек включают одревесневшие волокна и сосуды ксилемы.

C. Тонкослойная хроматография

(2.2.27).

Испытуемый раствор (а). К 1,0 г измельчен-

ного сырья (500) прибавляют 20 мл метанола Р. Нагревают на водяной бане при температуре около 50°С в течение 10 мин при перемешивании. Охлаждают и фильтруют.

Испытуемый раствор (b). К 5,0 мл испытуе-

мого раствора (а) прибавляют 1,0 мл раствора

50 г/л натрия карбоната безводного Р и нагре-

вают на водяной бане при температуре около 60°С в течение 10 мин. Охлаждают и при необходимости фильтруют.

Раствор сравнения. 2,0 мг салицина Р раст-

воряют в 1,0 мл метанола Р.

Пластинка: ТСХ пластинка со слоем силикагеля Р.

Подвижная фаза: вода Р — метанол Р — этилацетат Р (8:15:77, об/об/об).

Наносимый объем пробы: по 20 мкл в виде полос.

Фронт подвижной фазы: не менее 15 см от линии старта.

Высушивание: на воздухе.

Проявление:пластинкуопрыскиваютсмесью

серная кислота Р — метанол Р (5:95, об/об),

нагревают при температуре от 100°С до 105°С в течение 5 мин. Просматривают при дневном свете.

Результаты: ниже приведена последовательность зон хроматограмм раствора сравнения и испытуемых растворов (а) и (b). На хроматограмме испытуемых растворов (а) и (b) могут обнаруживаться и другие зоны желтого, синего или коричневого цвета.

Верх хроматографической пластинки