2007_-Byelorussian_Pharmacopoeia_Volume_2

ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)

Допустимые примеси (#2.8.2). Сумма до-

пустимых примесей: не более 2 %.

Потерявмассепривысушивании(2.2.32).

Не более 10,0 %. 1,000 г измельченного сырья (355) сушат при температуре от 100°С до 105°С в течение 2 ч.

Общая зола (2.4.16). Не более 10,0 %.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение дубильных веществ (2.8.14) проводят из 1,000 г измельченного сырья (180).

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.

Родиолы розовой корневища и корни

Rodiolae roseae rhizomata et radices

ROSEWORT ROOT*

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные в фазу цветения и плодоношения, очищенные и отмытые от земли, разрезанные на куски и высушенные корневища и корни многолетнего травянистого растения Rodiola rosea L. Содержат не менее 0,8 % салидрози-

да (C14H20O7; М.м. 300,3) в пересчете на сухое сырье.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

A.Внешние признаки (#2.8.3). Куски кор-

невищ и корней различной формы. Куски корневищ длиной до 9 см, толщиной 2—5 см, твердые, морщинистые, со следами отмерших стеблей

иостатками чешуевидных листьев. От корневищ отходят немногочисленные корни длиной 2—9 см, толщиной от 0,5 см до 1 см. Поверхность корневищ и корней блестящая, сероватокоричневого цвета; при отслаивании пробки обнаруживается желтый слой. Цвет на изломе розовато-коричневый или светло-коричневый. Запах специфический, напоминающий запах розы.

B.Микроскопия (#2.8.3). На поперечном срезе корневища видна слоистая перидерма. Корневище имеет пучковый тип строения. Проводящие пучки открытые, коллатеральные, веретеновидные, расположены кольцом, ориентированы к периферии корневища флоэмой и к центру — ксилемой. Возможно наличие второго кольца более мелких проводящих пучков, в которых флоэма ориентирована к центру, а ксилема — к периферии. Паренхима корневища состоит из крупных клеток, заполненных крахмальными зернами — простыми, округлыми или овальными — диаметром от 5 мкм до 20 мкм.

C. Тонкослойная хроматография (2.2.27).

Испытуемый раствор. К 1,0 г измельчен-

ного сырья (1400) прибавляют 10 мл метанола Р. Нагревают с обратным холодильником на водяной бане при температуре 65°С в течение 20 мин. Охлаждают и фильтруют.

Пластинка: ТСХ пластинка со слоем силикагеля Р, предварительно активированная посредством нагревания при температуре 110°С в течение 1 ч.

Подвижная фаза: хлороформ Р — метанол Р — вода Р (26:14:3, об/об/об). Камеру насыща-

ют не менее 24 ч.

Наносимый объем пробы: 2 мкл в виде по-

лосы.

Фронт подвижной фазы: не менее 13 см от линии старта.

Высушивание: на воздухе в течение 5 мин. Проявление А: просматривают в ультрафио-

летовом свете при длине волны 254 нм. Результаты А: на хроматограмме испытуе-

мого раствора обнаруживается основная зона фиолетового цвета с значением Rf около 0,4 (розавин). На хроматограмме испытуемого раствора могут обнаруживаться и другие зоны.

Проявление В: пластинку опрыскивают раст­ вором 100 г/л натрия карбоната Р и нагревают в течение 2 мин при температуре 110°С. Затем опрыскивают диазореактивом Р1 и нагревают в течение 2 мин при температуре 110°С. Просматривают при дневном свете.

Результаты В: на хроматограмме испытуемого раствора обнаруживается зона красноватого цвета с значением Rf около 0,42 (салидрозид). На хроматограмме испытуемого раствора могут обнаруживаться и другие зоны.

ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)

Допустимые примеси (#2.8.2). Несырье-

вые части растения: листья, стебли, в том числе отделенные при анализе, — не более 4 %. Органические примеси: не более 1 %. Минеральные примеси: не более 3 %.

Потерявмассепривысушивании(2.2.32).

Не более 13,0 %. 2,000 г измельченного сырья (2000) сушат при температуре от 100°С до

105°С.

Общая зола (2.4.16). Не более 9,0 %.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

0,500 г измельченного сырья (1400) помещают в колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 10 мл воды Р и нагревают с обратным холодильником в водяной бане в течение 15 мин. Фильтруют через бумажный фильтр в мерную колбу вместимостью 50 мл, избегая попадания частиц сырья на фильтр. Экстракцию повторяют трижды с водой Р порциями по 10 мл, нагревая в течение 10 мин, и фильтруют в ту же мерную колбу. Охлаждают. К фильтрату прибавляют 6 мл

раствора свинца (II) ацетата Р, 2 мл насыщенного раствора натрия сульфата Р, переме-

шивают и доводят водой Р до объема 50,0 мл. Фильтруют через бумажный фильтр, отбрасывая первые 15 мл фильтрата. К 5,0 мл полученного фильтрата прибавляют 2,5 мл раствора 20 г/л

натрия карбоната Р, 2,5 мл диазореактива Р1

и доводят водой Р до объема 25,0 мл.

Через5минизмеряютоптическуюплотность (2.2.25) раствора при 486 нм, используя воду Р в качестве компенсационного раствора.

Содержание салидрозида в процентах рассчитывают по формуле:

А×250 , m×253

где:

253 — удельный показатель поглощения салидрозида;

А— оптическая плотность раствора;

m — масса навески испытуемого сырья, г.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.

Ромашки цветки

Matricariae flores

Matricaria flower

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные в начале цветения и высушенные цветки (цветочные корзинки) Matricaria recutita L. (Chamomilla recutita (L.) Rauschert, Matricaria chamomilla L.). Содержат не менее 3 мл/кг синего эфирного масла в пересчете на сухое сырье.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

А. Внешние признаки (#2.8.3). Цельные или частично осыпавшиеся цветочные корзинки полушаровидной или конической формы, без цветоносов или с их остатками не длиннее 3 см. Корзинка состоит из краевых язычковых пестичных и срединных обоеполых трубчатых цветков. Цветоложе голое, мелкоямчатое, полое, в начале цветения полушаровидное, к концу — коническое. Обвертка корзинки черепитчатая, многорядная,состоящаяизмногочисленныхпродолговатых, с тупыми верхушками и широкими пленчатыми краями листочков. Размер корзинки (без язычковых цветков) 4—8 мм в поперечнике. Цвет язычковых цветков белый, трубчатых — желтый, обвертки — желтовато-зеленый. Запах сильный, ароматный.

В. Микроскопия (#2.8.3). При просматривании частей цветочной корзинки видны вытянутые с извилистыми стенками клетки эпидермиса

трубчатыхцветков;эпидермисверхней(внутренней) стороны язычковых цветков имеет сосочковидные выросты, эпидермис листочка обвертки состоит из сильно вытянутых клеток с утолщенными стенками, пронизанными многочисленными порами. На поверхности язычковых и особенно трубчатых цветков, а также на листочках обвертки имеются эфиромасличные железки, состоящие из 6—8 клеток, расположенных в два ряда и в 3—4 яруса. Вдоль центральной жилки листочка обвертки и в цветоложе проходят секреторные ходы с маслянистым желтоватым содержимым. В мезофилле трубчатых цветков содержатся мелкие друзы оксалата кальция.

С. К 1,0 г измельченного сырья (500) прибавляют 10 мл метиленхлорида Р и встряхивают в течение 2—3 мин. Раствор фильтруют. Фильтрат выпаривают досуха на водяной бане. Остаток растворяют в 0,5 мл толуола Р. К 0,1 мл полученного раствора прибавляют 2,5 мл раст-

вора диметиламинобензальдегида Р8 и нагре-

вают на водяной бане в течение 2 мин. Охлаж-

дают, прибавляют 5 мл петролейного эфира Р и

сильно встряхивают. Водный слой приобретает голубое или зеленовато-голубое окрашивание.

D. Тонкослойная хроматография

(2.2.27).

Испытуемый раствор. 50 мкл эфирного масла, полученного при количественном определении, разводят в 1 мл ксилола Р.

Раствор сравнения. 2 мкл хамазулена Р, 5 мкл (–)-α-бисаболола Р и 10 мг борнилацета-

та Р растворяют в 5 мл толуола Р.

Пластинка: ТСХ пластинка со слоем силикагеля Р.

Подвижная фаза: этилацетат Р — толуол Р (5:95, об/об).

Наносимый объем пробы: по 10 мкл в виде полос.

Фронт подвижной фазы: не менее 10 см от линии старта.

Высушивание: на воздухе.

Проявление: пластинку опрыскивают раст­ вором анисового альдегида Р и нагревают в те-

чение 5—10 мин при температуре от 100°С до 105°С. Просматривают немедленно при дневном свете.

Результаты: ниже приведена последовательность зон хроматограмм раствора сравнения и испытуемого раствора. На хроматограмме испытуемого раствора могут обнаруживаться и другие зоны.

ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)

Допустимые примеси (#2.8.2). Несырье-

вые части растения: листья, стебли, корзинки с остатками цветоносов длиннее 3 см — не более 9%; почерневшие и побуревшие корзинки — не более 5%. Органические примеси: части других неядовитых растений и корзинки других видов

ромашки — не более 3%. Минеральные примеси: не более 0,5%.

Примечание. К органической примеси относят соцветия растений, похожих по внешнему виду на ромашку аптечную, но не являющихся лекарственными: ромашки непахучей — Matricaria inodora L., которая в отличие от ромашки аптечной имеет сплошное цветоложе и более крупные корзинки (до 12 мм), пупавки полевой — Anthemis arvensis L., имеющей пленчатое цветоложе, и пупавки собачей — Anthemis cotula L., у которой цветоложе пленчатое только сверху.

Потерявмассепривысушивании(2.2.32).

Не более 14,0%. 2,000 г измельченного сырья (2000) сушат при температуре от 100°С до

105°С.

Общая зола (2.4.16). Не более 13,0%.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте (2.8.1). Не более 4,0%.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определяют содержание эфирного масла (2.8.12, метод А). 30,0 г цельного сырья помещают в колбу вместимостью 1000 мл, прибавляют 300 мл воды Р в качестве жидкости для перегонки. В градуированную трубку помещают 0,50 мл ксилола Р и перегоняют со скоростью 3—4 мл/мин в течение 4 ч. За несколько минут до истечения времени перегонки выключают подачу воды в холодильник, продолжая перегонку, пока синие летучие компоненты не достигнут нижнего конца холодильника. Немедленно включают подачу воды в холодильник во избежание нагревания приемника. Через 10 мин останавливают перегонку.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.

Рябины плоды

Sorbi aucupariae fructus

ROWANBERRY*

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные в период полного созревания и высушенные плоды дерева (реже кустарника)

Sorbus aucuparia L.

Содержат:

––не менее 0,01 % кислоты аскорбиновой (C6H8O6; М.м. 176,1) в пересчете на сухое сырье;

––неменее0,003 %каротиноидоввпересчете на β-каротин (C40H56; М.м. 536,9) в сухом сырье.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

А. Внешние признаки (#2.8.3). Плоды ябло-

кообразные, без плодоножек, 2—5-гнездные, округлые или овально-округлые, в поперечнике до 9 мм, блестящие, сильноморщинистые, на верхушке с остающейся чашечкой из пяти малозаметных смыкающихся зубчиков. В мякоти плода находятся 2—7 слегка серповидноизогнутых, продолговатых, с острыми концами, гладких красновато-коричневых семян. Цвет плодов красноватоили желтовато-оранжевый, коричневато-красный. На поперечном разрезе плода (при увеличении 10×) видны 2—5 семенных гнезд. Стенки гнезд хрящеватые, твердые, сросшиеся с мякотью. Внутри каждого гнезда находятся 1-2 семени с красновато-коричневой твердой семенной кожурой и белым семенным ядром. Мякоть плода рыхлая, мясистая, сверху покрыта кожицей. Запах слабый, своеобразный.

В. Микроскопия (#2.8.3). При просматривании эпидермы плода с поверхности видны клетки «окончатого» типа, в очертании многоугольные, разновеликие с неразличимой границей между соседними стенками, содержащие капли жирного масла желтого цвета. Мезокарпий состоит из тонкостенных паренхимных клеток, разнообразных по форме и величине, с многочисленными оранжево-желтыми хромопластами (с преобладанием веретеновидных), содержащими кристаллы каротина. В темном поле поляризационного микроскопа кристаллы каротина светятся зеленым или красным цветом в зависимости от их положения. Изредка встречаются проводящие пучки, ксилема которых состоит из узких спиральных сосудов. В более глубоких слоях мезокарпия, особенно вблизи эндокарпия, рассеяны одиночные или группы каменистых клеток. В мезокарпии встречаются друзы оксалата кальция. Эндокарпий тонкий, плотный, состоит из склеренхимной ткани и слабо развитых паренхимных

клеток, содержащих одиночные кристаллы и друзы оксалата кальция. На наружной стороне перегородки между гнездами по 1-2 и более расположены длинные простые одноклеточные волоски, более или менее извитые. Клетки эпидермы кожуры семени многоугольные, прямостенные с неравномерно утолщенными внутренними стенками, что создает характерную картину эпидермы с поверхности при низкой установке микрометрического винта. На поперечном срезе кожуры семени видны четырехугольные клетки эпидермы, 3-4 ряда склеренхимных клеток, 1 ряд более тонкостенных клеток и слой спавшихся клеток.

С. 1 г измельченного сырья (2000) растирают вступкес5млраствора5г/лкислотыхлористоводородной Р, затем прибавляют 20 мл раствора

5 г/л кислоты хлористоводородной Р, выдержи-

вают 10 мин, перемешивают и фильтруют через бумажный фильтр. К 5 мл фильтрата прибавляют по каплям раствор 0,6 г/л дихлорфенолиндо-

фенола натриевой соли Р. Синее окрашивание раствора реактива переходит в розовое.

D. Тонкослойная хроматография (2.2.27).

Испытуемый раствор. 1 г измельченных плодов (2000) помещают в коническую колбу со шлифом вместимостью 25 мл, прибавляют 5 мл хлороформа Р, закрывают пробкой и перемешивают в течение 1,5 ч. Фильтруют через бумажный фильтр.

Раствор сравнения. 10 мг b-каротина Р

растворяют в 10 мл хлороформа Р.

Пластинка: ТСХ пластинка со слоем силикагеля Р.

Подвижная фаза: циклогексан Р — эфир Р

(80:20, об/об).

Наносимый объем пробы: 50 мкл испытуе-

мого раствора и 20 мкл раствора сравнения в виде полос.

Фронт подвижной фазы: не менее 9 см от линии старта.

Высушивание: на воздухе.

Проявление: просматривают при дневном свете.

Результаты: на хроматограмме испытуемого раствора обнаруживается зона желтого цвета, соответствующая зоне желтого цвета (β-каротин­ ) на хроматограмме раствора сравнения. На хроматограмме испытуемого раствора могут обнаруживаться и другие зоны.

ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)

Допустимые примеси (#2.8.2). Несырье-

вые части растения: почерневшие и пригоревшие плоды — не более 3 %; недозрелые плоды (светло-желтые, желтые) — не более 2 %; плодоножки, веточки, листья — не более 0,5 %; плоды с плодоножками — не более 3 %. Органические примеси: не более 0,5 %. Минеральные примеси: не более 0,2 %.

Потерявмассепривысушивании(2.2.32).

Не более 18,0 %. 3,000 г измельченного сырья

(2000) сушат при температуре от 100°С до 105°С в течение 3 ч.

Общая зола (2.4.16). Не более 5,0 %

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение содержания кислоты аскор-

биновой. 2,000 г измельченного сырья (2000) растирают в ступке с 5 мл раствора 5 г/л кисло-

ты хлористоводородной Р, количественно пере-

носят при помощи 40 мл раствора 5 г/л кислоты хлористоводородной Р в мерную колбу вмести-

мостью 50 мл и доводят до объема 50,0 мл этим же растворителем, выдерживают 10 мин, перемешивают и фильтруют через бумажный фильтр, отбрасываяпервые15млфильтрата.5,0млполученного раствора помещают в коническую колбу, прибавляют 30 мл воды Р и титруют из микробю-

ретки титрованным раст­вором дихлорфено-

линдофенола Р до появления светло-розовой окраски, не исчезающей в течение 15—20 с.

1 мл титрованного раствора дихлорфено-

линдофенола Р соответствует 0,0001 г кислоты аскорбиновой.

Определение содержания каротиноидов. 2,000 г измельченного сырья (2000) помещают в коническую колбу вместимостью 250 мл, прибавляют50мл96 %спиртаРивстряхиваютвтечение 30 мин. Извлечение фильтруют через бумажный фильтр, отбрасывая первые 15 мл фильтрата.

Измеряют оптическую плотность (2.2.25) полученного раствора при 450 нм, используя 96 % спирт Р в качестве компенсационного раствора.

Содержание суммы каротиноидов в пересчете на β-каротин в процентах рассчитывают по формуле:

А×5 , m×250

где:

250 — удельный показатель поглощения β-каротина;

А — оптическая плотность испытуемого раствора;

m — масса навески испытуемого сырья, г.

хранение

В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.

Сабельника болотного корневища с корнями

Comari palustris rhizomata cum radicibus

POTENTILLA ROOT*

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные осенью, очищенные от остатков надземных частей и от земли, промытые и вы-

сушенные корневища с корнями и укоренившиеся стебли многолетнего травянистого растения

Comarum palustris L. Содержат не менее 2,0 %

суммы проантоцианидинов в пересчете на цианидина хлорид (C15H11ClO6; М.м. 322,7) в сухом сырье.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

A.Внешниепризнаки(#2.8.3). Смесь полых кусков корневищ с корнями и кусков укоренившихся стеблей с остатками оснований черешков листьев, длиной до 30 см и диаметром 3—7 мм,

счетко выраженными узлами, прямые или слегка изогнутые, иногда разветвленные. Поверх- ностьпродольно-морщинистаяматовая(укорне- вищ) или блестящая (у укоренившихся стеблей),

сучастками отслоившейся темно-коричневой первичной коры, со светло-коричневыми или темно-коричневыми остатками оснований стеб­ леобъемлющих черешков листьев и почечных чешуй в междоузлиях и остатками нитевидных корней в узлах корневищ. Цвет корневищ и укоренившихся стеблей с поверхности от светлокоричневого, почти черного, излом неровный, желтовато-белый, иногда зеленоватый. Запах слабый.

B.Микроскопия (#2.8.3). На поперечном срезе корневищ и укоренившихся стеблей видно вторичное непучковое строение. Снаружи корневищ — перидерма из 7—8 радиальных рядов клеток пробки. За перидермой следует вторичная кора, узкая зона камбия и широкий слой древесины с заметно выраженными осенними и весенними элементами вторичной ксилемы, состоящей из крупных и мелких сосудов, трахеид, древесной паренхимы. Сердцевинные лучи узкие, однорядные. На поперечном срезе укоренившихся стеблей видны узкий слой перидермы, первичная кора из паренхимных клеток

скрупными межклетниками (аэренхима), иногда

скрупными друзами оксалата кальция. Перимедулярная зона сердцевины корневищ и укоренившихся стеблей состоит из толстостенных клеток, окрашенных в темно-коричневый цвет, иногда содержащих многочисленные включения фиолетово-красного цвета.

C.Тонкослойная хроматография (2.2.27).

Испытуемый раствор. 0,50 г измельченно-

го сырья (180) помещают в круглодонную колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 20 мл спирта (70 %, об/об) Р и нагревают с обратным холодильником на водяной бане в течение 30 мин. Охлаждают и фильтруют.

Раствор сравнения. 0,50 г измельченного зеленого чая (180) помещают в круглодонную колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 20 мл спирта (70 %, об/об) Р и нагревают с обратным холодильником на водяной бане в течение 30 мин. Охлаждают и фильтруют.

Пластинка: ТСХ пластинка со слоем силикагеля Р.

Подвижная фаза: этилацетат Р — метанол Р — вода Р — кислота муравьиная безво-

дная Р (8,5:0,3:0,35:0,4, об/об/об/об).

Наносимый объем пробы: по 5 мкл в виде полос длиной 20 мм и шириной около 3 мм.

Фронт подвижной фазы: не менее 15 см от линии старта.

Высушивание: при температуре от 100°С до 105°С в течение 5 мин, затем охлаждают на воздухе.

Проявление: пластинку опрыскивают раст­ вором 1 г/л ванилина Р в 96 % спирте Р, затем погружают на 1—2 мин в раствор 10 г/л кислоты серной Р в 96 % спирте Р и выдерживают при температуре от 100°С до 105°С в течение 5 мин. Просматривают при дневном свете.

Результаты: на хроматограмме раствора сравнения в верхней трети обнаруживаются пять зон красного цвета (катехины чая). На хроматограмме испытуемого раствора в средней

иверхней части обнаруживаются одна или несколько зон красного цвета (проантоцианидины

икатехины).

ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)

Допустимые примеси (#2.8.2). Несырье-

вые части растения: листья и другие части растения, в том числе отделенные при анализе, — не более 10 %. Органические примеси: не более 3 %. Минеральные примеси: не более 1 %.

Потерявмассепривысушивании(2.2.32).

Не более 13,0 %. 2,000 г измельченного сырья (2000) сушат при температуре от 100°С до

105°С.

Общая зола (2.4.16). Не более 6,0 %.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте (2.8.1). Не более 2,0 %.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Реактив S. 0,5 г железа (III) аммония сульфата Р растворяют в 25 мл 1 М растворе хлористоводородной кислоты.

0,500 г измельченного сырья (250) помещают в круглодонную колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 20,0 мл спирта (70%, об/об) Р, закрывают пробкой, взвешивают с точностью до 0,01 г и нагревают с обратным холодильником на водяной бане при температуре 80°С в течение 20 мин. Охлаждают до комнатной температуры, взвешивают и доводят массу до первоначальной спиртом (70%, об/об) Р. Содержимое колбы центрифугируют при 2000—3000 об/мин в течение 10—15 мин и собирают надосадочную жидкость (раствор А).

Испытуемый раствор. 0,1 мл раствора А помещают в круглодонную колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 0,9 мл спирта (70%, об/об) Р, 0,2 мл реактива S, 6,0 мл 5% (об/об) раствора

кислоты хлористоводородной Р1 в бутаноле Р, нагревают с обратным холодильником на во-

дяной бане при температуре от 80°С до 95°С в течение 60 мин и охлаждают до комнатной температуры.

Компенсационный раствор. 0,1 мл раст-

вора А помещают в круглодонную колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 0,9 мл спирта (70%, об/об) Р, 0,2 мл реактива S и 6,0 мл 5% (об/об)

раствора кислоты хлористоводородной Р1 в бутаноле Р.

Измеряют оптическую плотность (2.2.25) испытуемого раствора при 550 нм.

Содержание суммы проантоцианидинов в пересчете на цианидина хлорид в процентах рассчитывают по формуле:

A×1440 , m×352

где:

352 – удельный показатель поглощения цианидина хлорида;

A – оптическая плотность испытуемого раствора;

m – масса навески испытуемого сырья, г.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.

Сенны листья

Sennae folia

SENNA LEAF

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Высушенные листья Сassia senna L. (syn.:

C. acutifolia Delile) или Сassia angustifolia Vahl либо смесь листьев обоих видов. Содержат не менее 2,5 %гидроксиантраценгликозидоввпересчетена сеннозид В (С42Н38О20; М.м. 863) в сухом сырье.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

А. Внешние признаки (#2.8.3). Листья

C. senna от серовато-зеленого до коричневатозеленого цвета, с тонкой хрупкой листовой пластинкой ланцетоовальной формы, асимметричные в основании, длиной обычно от 15 мм до 40 мм и шириной от 5 мм до 15 мм, с наибольшей шириной немного ниже середины; пластинка слегка волнистая с обеих сторон, покрыта мелкими трихомами. Перистое жилкование хорошо заметно на нижней стороне листа боковыми жилками, отходящими от центральной под углом около 60° и сходящимися около края листа.

Устьичный коэффициент (2.8.3): 10—12,5—15. Листья C. angustifolia от желтовато-зеленого до коричневато-зеленого цвета, вытянутой ланцетовидной формы, немного асимметричные в основании, длиной обычно от 20 мм до 50 мм и шириной от 7 мм до 20 мм (в середине). Обе по-

верхности гладкие с очень малым количеством коротких волосков и часто с поперечными или косыми линиями.

Устьичный коэффициент (2.8.3): 14—17,5—20. В.Микроскопия(#2.8.3).Исследуютизмельченное сырье (355). Цвет от светло-зеленого до зеленовато-желтого. Видны: эпидермис с многоугольными клетками; устьица парацитного типа, одноклеточные конические бородавчатые волоски, изолированные или присоединенные к фрагментам эпидермиса; сосудистые пучки сопровождаются друзами и призматическими кристаллами оксалата кальция; кристаллические друзы изолированы или находятся в фрагментах

паренхимы.

С. Тонкослойная хроматография (2.2.27).

Испытуемый раствор. К 0,5 г измельченно-

го сырья (180) прибавляют 5 мл смеси из равных объемов 96 % спирта Р и воды Р и нагревают до кипения. Центрифугируют и собирают надоса­ дочную жидкость.

Раствор сравнения. 10 мг ФСО экстракта сенны растворяют в 1 мл смеси из равных объемов 96 % спирта Р и воды Р (раствор может содержать осадок).

Пластинка: ТСХ пластинка со слоем сили-

кагеля G Р.

Подвижная фаза: кислота уксусная ледяная Р — вода Р — этилацетат Р — пропанол Р

(1:30:40:40, об/об/об/об).

Наносимый объем пробы: по 10 мкл в виде полос длиной 20 мм и шириной 2 мм.

Фронт подвижной фазы: не менее 10 см от линии старта.

Высушивание: на воздухе.

Проявление: пластинку опрыскивают 20 % (об/об) раствором­ кислоты азотной Р и нагре-

вают при температуре 120°С в течение 10 мин. Охлаждают и опрыскивают раст­вором 50 г/л ка-

лия гидроксида Р в спирте (50 %, об/об) Р до проявления зон.

Результаты: на хроматограмме раствора сравнения обнаруживаются зоны, соответствующие по расположению, цвету и величине зонам сеннозидов B, A, D и C (в порядке увеличения значения Rf) на хроматограмме раствора сравнения. Между зонами, соответствующими сеннозидам D и С, может обнаруживаться зона красного цвета (реин-8-глюкозид).

D. 25 мг измельченного сырья (180) помещают в коническую колбу, прибавляют 50 мл воды Р

и 2 мл кислоты хлористоводородной Р и нагре-

вают в водяной бане в течение 15 мин. Охлаждают и встряхивают с 40 мл эфира Р. Эфирный слой отделяют, высушивают натрия сульфатом безводным Р. 5 мл полученного раствора выпаривают досуха и к охлажденному остатку при-

бавляют 5 мл раствора аммиака разведенного Р1. Проявляется желтое или оранжевое окрашивание. Нагревают на водяной бане в течение 2 мин. Появляется красновато-фиолетовое окрашивание.

ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)

Допустимыепримеси(#2.8.2).Несырьевые части растения: не более 4 %. Сумма органических и минеральных примесей: не более 1 %.

Потерявмассепривысушивании(2.2.32).

Не более 12,0 %. 1,000 г измельченного сырья (355) сушат при температуре от 100°С до 105°С в течение 2 ч.

Общая зола (2.4.16). Не более 12,0 %.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте (2.8.1). Не более 2,5 %.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Испытание проводят с защитой от яркого света.

0,150 г измельченного сырья (180) помещают в колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 30,0 мл воды Р и перемешивают. Взвешивают и нагревают с обратным холодильником в водяной бане в течение 15 мин. Охлаждают и доводят до первоначальной массы водой Р. Центрифугируют. 20,0 мл надосадочной жидкости помещают

вделительную воронку вместимостью 150 мл,

прибавляют 0,1 мл кислоты хлористоводород-

ной разведенной Р и трижды встряхивают с хлороформом Р порциями по 15 мл. Хлороформный слой отбрасывают. К водному слою прибавляют

0,10 г натрия гидрокарбоната Р и встряхивают

втечение 3 мин. Центрифугируют. 10,0 мл над­ осадочной жидкости помещают в круглодонную колбу со шлифом вместимостью 100 мл. При-

бавляют 20 мл раствора железа (III) хлорида Р1 и перемешивают. Нагревают с обратным холодильником в водяной бане в течение 20 мин. Уровень воды в бане должен быть выше уровня раствора в колбе. Прибавляют 1 мл кислоты хлористоводородной Р и нагревают еще в те-

чение 20 мин, интенсивно встряхивая до растворения осадка. Охлаждают, переливают смесь

вделительную воронку и встряхивают с тремя объемами, каждый раз по 25 мл, эфира Р, предварительно использованного для ополаскивания колбы. Объединенные эфирные экстракты отмывают двумя объемами воды Р порциями по 15 мл. Переносят эфирный слой в мерную колбу и доводят эфиром Р до объема 100,0 мл. 10,0 мл полученного раствора осторожно выпаривают досуха. Остаток растворяют в 10,0 мл раствора

5 г/л магния ацетата Р в метаноле Р.

Измеряют оптическую плотность (2.2.25) полученного раствора при515 нм,используя метанол Р в качестве компенсационного раствора.

Содержание суммы гидроксиантраценгликозидов в пересчете на сеннозид В в процентах рассчитывают по формуле:

А×300 ,

где:

m×240

240 — удельный показатель поглощения сеннозида В;

А — оптическая плотность раствора;

m — масса навески испытуемого сырья, г.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.

Сенны листья с плодами

Sennae folia cum fructus

SENNA LEAF and PODS*

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные в фазу цветения и плодоношения, высушенные и обмолоченные листья ку-

старника Сassia senna L. (syn.: C. acutifolia Delile). Содержат не менее 1,35 % суммы агликонов антраценового ряда в пересчете на хризофановую кислоту в сухом сырье.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

А.Внешниепризнаки(#2.8.3).Отдельныели-

сточкиичерешкисложногопарноперистоголиста, цельныеиличастичноизмельченные,кусочкитонких травянистых стеблей, бутоны, цветки и незрелые плоды. Листочки удлиненно-ланцетовидные или ланцетоовальные, заостренные к верхушке, наиболее широкие в средней части, у основания неравнобокие, тонкие, ломкие, цельнокрайние с оченькороткимчерешком.Вторичныежилки,ясно заметные с обеих сторон, отходят под острым углом от главной жилки и соединяются между собой дугами, идущими параллельно краю листочка. Длина листочка 1—4 см, ширина 0,4—1,5 см, обе поверхности покрыты короткими волосками. Цвет листочков с обеих сторон серовато-зеленый или с верхней стороны желтовато-зеленый, матовый. Плод — боб, плоский, кожистый, слабо изогнутый, длиной 3—5 см, шириной 1,5—2 см. Цвет плодов зеленовато-коричневый с темными очертаниями семенных камер. Цвет бутонов и цветков желтый. Запах слабый.

В. Микроскопия (#2.8.3). При просматри-

вании листа с поверхности видны клетки эпидермиса с многоугольными прямыми стенками. Клетки, находящиеся у основания волоска, располагаясь радиально, образуют угловатую шести-десятилучевую розетку. Волоски короткие, простые, часто согнутые, одноклеточные, с толстыми стенками и грубобородавчатой поверхностью. Волоски часто опадают, и в центре розетки виден округлый валик. Устьица окружены 2—3, реже 4 клетками эпидермиса (аномоцитный тип), расположены с обеих сторон листа. В мезофилле видны друзы оксалата кальция. Главные и более крупные боковые жилки листа окружены кристаллоносной обкладкой.

С. Тонкослойная хроматография (2.2.27).

Испытуемый раствор. К 0,5 г измельченно-

го сырья (180) прибавляют 5 мл смеси из равных

объемов 96 % спирта Р и воды Р и нагревают до кипения. Центрифугируют и собирают надоса­ дочную жидкость.

Раствор сравнения. 10 мг ФСО экстракта сенны растворяют в 1 мл смеси из равных объемов 96 % спирта Р и воды Р (раствор может содержать осадок).

Пластинка: ТСХ пластинка со слоем сили-

кагеля G Р.

Подвижная фаза: кислота уксусная ледяная Р — вода Р — этилацетат Р — пропанол Р

(1:30:40:40, об/об/об/об).

Наносимый объем пробы: по 10 мкл в виде полос длиной 20 мм и шириной 2 мм.

Фронт подвижной фазы: не менее 10 см от линии старта.

Высушивание: на воздухе.

Проявление: пластинку опрыскивают 20 % (об/об) раствором­ кислоты азотной Р и нагре-

вают при температуре 120°С в течение 10 мин. Охлаждают и опрыскивают раст­вором 50 г/л ка-

лия гидроксида Р в спирте (50 %, об/об) Р до проявления зон.

Результаты: на хроматограмме раствора сравнения обнаруживаются зоны, соответствующие по расположению, цвету и величине зонам сеннозидов B, A, D и C (в порядке увеличения значения Rf) на хроматограмме раствора сравнения. Между зонами, соответствующими сеннозидам D и С, может обнаруживаться зона красного цвета (реин-8-глюкозид).

D. 25 мг измельченного сырья (180) помещаютвконическуюколбу,прибавляют50млводыР, 2 мл кислоты хлористоводородной Р и нагрева-

ют в водяной бане в течение 15 мин. Охлаждают и встряхивают с 40 мл эфира Р. Эфирный слой отделяют, высушивают натрия сульфатом безводным Р. 5 мл полученного раствора выпаривают досуха и к охлажденному остатку прибавляют

5 мл раствора аммиака разведенного Р1. Про-

является желтое или оранжевое окрашивание. Нагревают на водяной бане в течение 2 мин. Появляется красновато-фиолетовое окрашивание.

ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)

Допустимые примеси (#2.8.2). Листочки и плоды — не менее 60 %. Несырьевые части растения: кусочки стеблей толще 2 мм — не более 3 %; побуревшие, почерневшие листочки — не более 3 %. Органические примеси: не более 3 %. Минеральные примеси: не более 1 %.

Потерявмассепривысушивании(2.2.32).

Не более 12,0 %. 1,000 г измельченного сырья (2000) сушат при температуре от 100°С до

105°С.

Общая зола (2.4.16). Не более 12,0 %.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Испытуемыйраствор.0,400гизмельченно-

го сырья (710) помещают в колбу вместимостью

200мл, прибавляют 100,0 мл воды Р, взвешивают с точностью до 0,01 г и нагревают с обратным холодильником в водяной бане в течение

20мин при перемешивании. Уровень воды в бане должен быть выше уровня раствора в колбе. Охлаждают и доводят водой Р до первоначальной массы. Выдерживают в течение 10 мин

ифильтруют через бумажный фильтр. 25,0 мл фильтрата переносят в делительную воронку вместимостью 100 мл и встряхивают дважды с эфиром Р в течение 2 мин порциями по 40 мл и

20мл. Водный слой переносят в колбу со шлифом вместимостью 150 мл. Эфирные извлечения объединяют и дважды промывают водой Р порциями по 10 мл. Воду помещают в ту же колбу со шлифом вместимостью 150 мл. Эфирные слои отбрасывают. Объединенные вод­ные извлечения нагревают на водяной бане до исчезновения запаха эфира. Прибавляют 0,1 г

натрия гидрокарбоната Р, 10 мл раствора железа (III) хлорида Р1 и нагревают с обратным холодильником в водяной бане при перемешивании в течение 20 мин. Прибавляют 5 мл 50 % (м/м) раствора кислоты серной Р и нагревают еще в течение 30 мин. Охлаждают, полученный раствор переносят в делительную воронку вместимостью 300 мл. Колбу вместимостью 150 мл ополаскивают 20 мл воды Р, 75 мл эфира Р. Промывную воду и эфир присоединяют к раствору в делительной воронке и встряхивают в течение 5 мин. Эфирный слой отделяют (темные хлопья оставляют в водном слое) и фильтруют через стеклянный фильтр (ПОР 100) в делительную воронку вместимостью 500 мл. Водный слой дважды встряхивают с эфиром Р порциями по 30 мл и 20 мл. Эфирные извлечения объединяют и фильтруют через тот же стеклянный фильтр (ПОР 100) в ту же делительную воронку вместимостью 500 мл и дважды промывают водой Р порциями по 30 мл. К эфирному извлечению прибавляют 100 мл щелочно-аммиачного раствора Р и осторожно встряхивают в течение 5 мин. Прозрачный водный слой сливают в мерную колбу вместимостью 250 мл (хлопья промежуточного слоя оставляют в воронке). К эфирному извлечению прибавляют 20 мл воды Р и

3 мл кислоты хлористоводородной Р. Воронку охлаждают под струей воды, встряхивают в течение 2 мин и сливают водный слой в ту же мерную колбу. Эфирное извлечение еще раз встря-

хивают с 50 мл щелочно-аммиачного раствора Р в течение 2 мин и сливают водный слой в ту же мерную колбу. Объединенные водные извле-

чения доводят щелочно-аммиачным раст­вором Р до объема 250,0 мл.

Раствор сравнения. К 1,500 г кобальта хлорида Р, высушенного до постоянной массы в эксикаторе, прибавляют 20 мл воды Р, 0,1 мл

кислоты хлористоводородной Р1 и доводят во-

дой Р до объема 100,0 мл.

Через 15 мин измеряют оптическую плотность (2.2.25) раствора при 523 нм, используя

щелочно-аммиачный раствор Р в качестве ком-

пенсационного раствора.

Содержание суммы агликонов антраценового ряда в пересчете на хризофановую кислоту в процентах рассчитывают по формуле:

А×m0 ×0,43 ,

А0 ×m

где:

0,43 — коэффициент пересчета оптической плотности раствора 15 г/л кобальта хлорида Р в содержание хризофановой кислоты (г) в 1 л щелочно-аммиачного раствора;

А — оптическая плотность испытуемого раствора; ненияА0; — оптическая плотность раствора срав-

m — масса навески испытуемого сырья, г; m0 — масса навески кобальта хлорида Р, г.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.

Сенны остролистной плоды

Sennae acutifoliae fructus

SENNA PODS, ALEXANDRIAN

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные на разной стадии зрелости и вы-

сушенные плоды Сassia senna L. (syn.: C. acutifolia Delile). Содержат не менее 3,4 % гидроксиантраценгликозидов в пересчете на сеннозид В (С42Н38О20; М.м. 863) в сухом сырье.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

А. Внешние признаки (#2.8.3). Плод — боб широкоовальный, плоский, кожистый, слегка изогнутый, от зеленого до зеленовато-коричневого цветасболеетемнымиочертаниямисеменныхкамер, длиной от 40 ммдо 50 мм, шириной не менее 20 мм. В плоде содержится 6—7 семян. Семена плоские, в очертании яйцевидные, от желтоватозеленого до бледно-коричневого цвета, с сетчатоморщинистой поверхностью. Запах слабый.

В. Микроскопия (#2.8.3). При измельчении сырья (355) видны: эпидермис с многоугольными клетками и небольшим числом конических бородавчатых трихом и редкими аномоцитными или парацитными устьицами; волокна в двух смежных слоях сопровождаются друзами и приз­ матическими кристаллами оксалата кальция.

С. Тонкослойная хроматография (2.2.27).

Испытуемый раствор. К 0,5 г измельченно-

го сырья (180) прибавляют 5 мл смеси из равных объемов 96 % спирта Р и воды Р и нагревают до

кипения. Центрифугируют и собирают надоса­ дочную жидкость.

Раствор сравнения. 10 мг ФСО экстракта сенны растворяют в 1 мл смеси из равных объемов 96 % спирта Р и воды Р (раствор может содержать осадок).

Пластинка: ТСХ пластинка со слоем сили-

кагеля G Р.

Подвижная фаза: кислота уксусная ледяная Р — вода Р — этилацетат Р — пропанол Р

(1:30:40:40, об/об/об/об).

Наносимый объем пробы: по 10 мкл в виде полос длиной 20 мм и шириной 2 мм.

Фронт подвижной фазы: не менее 10 см от линии старта.

Высушивание: на воздухе.

Проявление: пластинку опрыскивают 20 % (об/об) раствором­ кислоты азотной Р и нагре-

вают при температуре 120°С в течение 10 мин. Охлаждают и опрыскивают раст­вором 50 г/л ка-

лия гидроксида Р в спирте (50 %, об/об) Р до проявления зон.

Результаты: на хроматограмме раствора сравнения обнаруживаются зоны, соответствующиепорасположению,цветуивеличинезонамсеннозидовB,A,DиC(впорядкеувеличениязначения Rf) на хроматограмме раствора сравнения. Между зонами, соответствующими сеннозидам D и С, может обнаруживаться зона красного цвета (реин- 8-глюкозид). Зоны, соответствующие сеннозидам D и С, имеют слабую интенсивность на хроматограмме испытуемого раствора.

D. 25 мг измельченного сырья (180) помещают в коническую колбу, прибавляют 50 мл воды Р

и 2 мл кислоты хлористоводородной Р и нагре-

вают в водяной бане в течение 15 мин. Охлаждают и встряхивают с 40 мл эфира Р. Эфирный слой отделяют, высушивают натрия сульфатом безводным Р. 5 мл полученного раствора выпаривают досуха и к охлажденному остатку прибавляют

5 мл раствора аммиака разведенного Р1. Про-

является желтое или оранжевое окрашивание. Нагревают на водяной бане в течение 2 мин. Появляется красновато-фиолетовое окрашивание.

ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)

Допустимые примеси (#2.8.2). Сумма до-

пустимых примесей: не более 1 %.

Потерявмассепривысушивании(2.2.32).

Не более 12,0 %. 1,000 г измельченного сырья (355) сушат при температуре от 100°С до 105°С в течение 2 ч.

Общая зола (2.4.16). Не более 9,0 %.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте (2.8.1). Не более 2,0 %.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Испытание проводят с защитой от яркого света.

0,150 г измельченного сырья (180) помещают в колбу вместимостью 100 мл, прибавляют

30,0 мл воды Р, перемешивают. Взвешивают и нагревают с обратным холодильником в водяной баневтечение15мин.Охлаждают,взвешиваюти доводят до первоначальной массы водой Р. Центрифугируют.20,0млнадосадочнойжидкостипомещают в делительную воронку вместимостью

150 мл. Прибавляют 0,1 мл кислоты хлористоводородной разведенной Р и трижды встряхива-

ют с хлороформом Р порциями по 15 мл. Хлороформный слой отбрасывают. К водному­ слою прибавляют 0,10 г натрия гидрокарбоната Р и

встряхивают в течение 3 мин. Центрифугируют. 10,0 мл надосадочной жидкости помещают в круглодонную колбу со шлифом вместимостью 100 мл. Прибавляют 20 мл раствора железа (III) хлорида Р1 и перемешивают. Нагревают с обратным холодильником в водяной бане в течение 20 мин. Уровень воды в бане должен быть выше уровня раствора в колбе. Прибавляют 1 мл кис-

лоты хлористоводородной Р и нагревают еще в течение 20 мин, интенсивно встряхивая до растворения осадка. Охлаждают, переливают смесь в делительную воронку и встряхивают с тремя объемами, каждый раз по 25 мл, эфира Р, предварительно использованного для ополаскивания колбы. Объединенные эфирные экстракты отмывают двумя объемами воды Р порциями по 15 мл. Переносят эфирный слой в мерную колбу и доводят эфиром Р до объема 100,0 мл. 10,0 мл полученного раствора осторожно выпаривают досуха. Остаток растворяют в 10,0 мл раствора

5 г/л магния ацетата Р в метаноле Р.

Измеряют оптическую плотность (2.2.25) полученного раствора при515 нм,используя метанол Р в качестве компенсационного раствора.

Содержание суммы гидроксиантраценгликозидов в пересчете на сеннозид В в процентах рассчитывают по формуле:

А×300 , m×240

где:

240 — удельный показатель поглощения сеннозида В;

А — оптическая плотность раствора;

m — масса навески испытуемого сырья, г.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.

Сенны узколистной плоды

Sennae angustifoliae fructus

SENNA PODS, TINNEVELLY

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные на разной стадии зрелости и высушенные плоды Сassia angustifolia Vahl. Содер-

жат не менее 2,2 % гидроксиантраценгликозидов

впересчете на сеннозид В (С42Н38О20; М.м. 863)

всухом сырье.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

А. Внешние признаки (#2.8.3). Плод — боб широкоовальный, плоский, кожистый, слегка изогнутый, от желтовато-коричневого до коричневого цвета с более темными очертаниями семенных камер, длиной от 35 мм до 60 мм, шириной от 14 мм до 18 мм. В плоде содержится 5—8 семян. Семена плоские, в очертании яйцевидные, от зе- леногодобледно-коричневогоцвета,споперечно- морщинистой поверхностью. Запах слабый.

В. Микроскопия (#2.8.3). При измельчении сырья (355) видны: эпидермис с многоугольными клетками и небольшим числом конических бородавчатых трихом и редкими аномоцитными или парацитными устьицами; волокна в двух смежных слоях сопровождаются друзами и приз­ матическими кристаллами оксалата кальция.

С. Тонкослойная хроматография (2.2.27).

Испытуемый раствор. К 0,5 г измельченно-

го сырья (180) прибавляют 5 мл смеси из равных объемов 96 % спирта Р и воды Р и нагревают до кипения. Центрифугируют и собирают надоса­ дочную жидкость.

Раствор сравнения. 10 мг ФСО экстракта сенны растворяют в 1 мл смеси из равных объемов 96 % спирта Р и воды Р (раствор может содержать осадок).

Пластинка: ТСХ пластинка со слоем сили-

кагеля G Р.

Подвижная фаза: кислота уксусная ледяная Р — вода Р — этилацетат Р — пропанол Р

(1:30:40:40, об/об/об/об).

Наносимый объем пробы: по 10 мкл в виде полос длиной 20 мм и шириной 2 мм.

Фронт подвижной фазы: не менее 10 см от линии старта.

Высушивание: на воздухе.

Проявление: пластинку опрыскивают 20 % (об/об) раствором­ кислоты азотной Р и нагре-

вают при температуре 120°С в течение 10 мин. Охлаждают и опрыскивают раст­вором 50 г/л ка-

лия гидроксида Р в спирте (50 %, об/об) Р до проявления зон.

Результаты: на хроматограмме раствора срав­нения обнаруживаются зоны, соответствующие по расположению, цвету и величине зонам сеннозидов B, A, D и C (в порядке увеличения значения Rf) на хроматограмме раствора сравнения. Между зонами, соответствующими сеннозидам D и С, может обнаруживаться зона красного цвета (реин-8-глюкозид). Зоны, соответствующие сеннозидам D и С, имеют слабую интенсивность на хроматограмме испытуемого раствора.

D. 25 мг измельченного сырья (180) помещают в коническую колбу, прибавляют 50 мл воды Р