2007_-Byelorussian_Pharmacopoeia_Volume_2

B. Микроскопия (#2.8.3). Исследуют из-

мельченное сырье (355). Видны: кроющие волоски, раздваивающиеся на одном или более уровнях; эфиромасличные железки, характерные для сем. Labiatae, на короткой ножке с восемью радиально расположенными клетками; головчатые волоски с одно- и многоклеточной ножкой и одноклеточной головкой; железистые волоски с длинной неровной ножкой и одноклеточной головкой, отделенной от цветоножки промежуточной клеткой с гладкой кутикулой; фрагменты бородавчатого эпидермиса внутренней поверхности лепестков; фрагменты эпидермиса чашечки с извилистостенными клетками, содержащими призматические кристаллы оксалата кальция; сферические зерна пыльцы диаметром около 45 мкм с экзиной с шестью щелевидными порами и шестью лентовидными пазухами вдоль полюсов.

С. Тонкослойная хроматография (2.2.27).

Испытуемый раствор. К 0,5 г измельчен-

ного сырья (355) прибавляют 5 мл гексана Р, встряхивают в течение 5 мин и фильтруют.

Раствор сравнения. 10 мкл линалола Р и

10 мкл линалилацетата Р растворяют в 5 мл

гексана Р.

Пластинка: ТСХ пластинка со слоем силикагеля Р.

Подвижная фаза: этилацетат Р — толуол Р (5:95, об/об).

Наносимый объем пробы: по 10 мкл в виде полос.

Фронт подвижной фазы: не менее 15 см от линии старта.

Высушивание: на воздухе.

Проявление: пластинку опрыскивают

раствором­ анисового альдегида Р, выдержи-

вают при температуре от 100°С до 105°С в течение 5—10 мин. Просматривают при дневном свете.

Результаты: ниже приведена последовательность зон хроматограмм раствора сравнения и испытуемого раствора. На хроматограмме испытуемого раствора могут обнаруживаться и другие зоны.

Верх хроматографической пластинки

D. Просматривают хроматограммы, полученные в испытании «Другие виды и разновидности лаванды». Пять основных пиков на хроматограмме испытуемого раствора по времени удерживания соответствуют пяти основным пикам на хроматограмме раствора сравнения, в том числе пикам с наибольшими площадями (линалол и линалилацетат).

ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)

Допустимыепримеси(#2.8.2).Несырьевые части растения: стебли — не более 3 %. Сумма других допустимых примесей: не более 2 %.

Другие виды и разновидности лаванды.

Газовая хроматография (2.2.28).

Испытуемый раствор. 0,2 мл раствора эфирного масла в ксилоле, полученного при количественном определении эфирного масла, разводят гексаном Р до объема 5 мл, прибавля-

ют 1 г натрия сульфата безводного Р, встряхи-

вают и собирают надосадочную жидкость.

Раствор сравнения. 0,1 г лимонена Р, 0,2 г цинеола Р, 0,05 г камфоры Р, 0,4 г линалола Р, 0,6 г линалилацетата Р и 0,2 г α-терпинеола Р

растворяют в 100 мл гексана Р. Условия хроматографирования:

––колонка кварцевая капиллярная длиной 60 м и внутренним диаметром 0,25 мм, покрытая слоем макрогола 20 000 Р;

––детектор: пламенно-ионизационный;

––газ-носитель: гелий для хроматографии Р;

––скорость газа-носителя: 1,5 мл/мин;

––деление потока: 1:100;

––температура:

Пригодность хроматографической системы:

––количество теоретических тарелок: не менее 30 000 для пика лимонена при температуре 110°С;

––разрешение: не менее 1,5 между пиками лимонена и цинеола.

По временам удерживания компонентов раствора сравнения определяют состав испытуемого раствора. На хроматограмме испытуемого раствора отмечают шесть пиков, соответствующих пикам на хроматограмме раствора сравнения. Пики гексана и ксилола не учитывают.

На хроматограмме испытуемого раствора площадь пика камфоры должна составлять не более 1 % от суммы площадей всех пиков.

Вода (2.2.13). Не более 100 мл/кг. Определение проводят из 20,0 г испытуемого сырья.

Общая зола (2.4.16). Не более 9,0 %.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определяют содержание эфирного масла (2.8.12, метод А). 20,0 г испытуемого сырья помещают в круглодонную колбу вместимостью 1000 мл, прибавляют 500 мл воды Р. В градуированную трубку помещают 0,5 мл ксилола Р. Перегонку проводят со скоростью 2—3 мл/мин в течение 2 ч.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.

Ламинарии слоевища (Морская капуста)

Laminariae thalli

LAMINARIA*

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные с июня по октябрь и высушенные слоевища бурых морских водорослей Laminaria japonica Aresch. и L. saccharina (L.) Lam.

Содержат:

––не менее 0,1 % йода в пересчете на сухое сырье;

––не менее 8,0 % полисахаридов в пересчете на сухое сырье.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

A. Внешние признаки (#2.8.3). Цвет цель-

ных слоевищ от светло-коричневато-зеленого до темно-коричневато-зеленого, зеленоватокоричневый, красно-коричневый, иногда зеленовато-черный; снаружи слоевища покрыты белым налетом солей. Допускается наличие пластин с разрывами по краям и середине. Слоевища Laminaria japonica — плотные, кожистые, лентообразные пластины, сложенные по длине, без стволиков, или куски пластин длиной не менее 15 см, шириной не менее 7 см. Толщина пластин не менее 0,3 мм. Края пластин цельные,

волнистые. Слоевища Laminaria saccharina —

плотные, кожистые, морщинистые лентовидные пластины без стволиков или их куски длиной не менее 10 см, шириной не менее 5 см. Толщина пластин не менее 0,3 мм. Края пластин волнистые. Запах слоевищ своеобразный.

В. Микроскопия (#2.8.3). При просматривании слоевищ с поверхности виден эпидермис, состоящий из мелких, почти квадратных клеток с толстыми стенками, сквозь которые просвечивают многочисленные округлые слизистые вместилища.

ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)

Песок. Не более 0,2 %. 20 г измельченного сырья (710) помещают в стакан вместимостью 150 мл, прибавляют 60 мл раствора 100 г/л кис-

лоты хлористоводородной Р и нагревают до кипения, непрерывно перемешивая до прекращения вспучивания массы. Стакан накрывают часовым стеклом и кипятят в течение 15 мин. Прибавляют воду Р доверху, интенсивно перемешивают содержимое стеклянной палочкой и выдерживают в течение 3—5 мин. Через пипетку вместимостью 5—10 мл, погруженную в стакан на расстояние 1—2 см от дна, пропускают воду Р со скоростью 160—170 мл/мин (слив воды должен происходить через край стакана) в течение 20 мин. Собирают надосадочную жидкость. Для удаления оставшихся частиц сырья к осадку

встакане прибавляют 25—30 мл насыщенного раствора натрия хлорида Р, перемешивают, выдерживают до оседания песка на дно и осторожно сливают жидкость вместе со взвешенными частицами сырья. Обработку насыщенным раствором­ натрия хлорида Р повторяют 3—4 раза до полного удаления взвешенных частиц сырья. Осадок в стакане промывают 2—3 раза водой Р и количественно переносят на беззольный фильтр. Осадок вместе с фильтром сжигают

впредварительно прокаленном и взвешенном тигле и прокаливают в течение 15 мин при температуре от 550°С до 650°С. Охлаждают и взвешивают. Масса остатка должна составлять не более 40 мг.

Допустимые примеси (#2.8.2). Несырье-

вые части растения: слоевища с пожелтевшими краями — не более 10 %; слоевища толщиной менее 0,3 мм — не более 15 %. Органические примеси: не допускаются. Минеральные примеси: не более 0,5 %.

Потерявмассепривысушивании(2.2.32).

Не более 15,0 %. 2,000 г измельченного сырья (2000) сушат при температуре от 100°С до

105°С.

Общая зола (2.4.16). Не более 40 %.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение содержания йода. 0,060 г

измельченного сырья (500) сжигают в колбе с кислородом (2.5.10). Используют колбу вместимостью 1000 мл, в качестве поглощающей жидкости — 2 мл 0,1 М раствора натрия гидро­ ксида и 50 мл воды Р. После сжигания колбу интенсивно встряхивают в течение 3 мин. Прибавляют 100 мл воды Р, промывая шлиф, держатель и внутренние стенки колбы. Прибавляют по каплям до появления слабо-желтого окрашивания смесь из 25 мл раствора 100 г/л калия аце-

тата Р в кислоте уксусной ледяной Р и 15 ка-

пель брома Р. Выдерживают в течение 2 мин, прибавляют по каплям 85 % (м/м) раствор кисло-

ты муравьиной безводной Р до обесцвечивания

раствора, выдерживают в течение 1 мин и прибавляют 3 мл раствора 30 г/л кислоты сульфаминовой Р. Перемешивают в течение 3 мин, прибавляют 1 г калия йодида Р и титруют 0,005 М

раствором­ натрия тиосульфата, используя в качестве индикатора раствор крахмала, сво-

бодный от йодидов, Р.

1 мл 0,005 М раствора натрия тиосульфа-

та соответствует 0,0001058 г йода.

Определение содержания полисахари-

дов. 10,00 г измельченного сырья (2400) помещают в колбу вместимостью 500 мл, прибавляют 100 мл воды Р и кипятят с обратным холодильником при периодическом перемешивании в течение 30 мин. Оставляют до оседания частиц и процеживают надосадочную жидкость через ватный тампон в мерную колбу вместимостью 500 мл. Экстракцию повторяют еще четыре раза с использованием воды Р порциями по 100 мл. Водные извлечения процеживают в ту же мерную колбу и доводят водой Р до объема 500,0 мл. 25,0 мл полученного раствора помещают в центрифужную пробирку, прибавляют 25 мл 96 % спирта Р, перемешивают, подогревают в водяной бане при температуре 30°С в течение 5 мин. Через 30 мин содержимое центрифугируют при 5000 об/мин в течение 30 мин. Надосадочную жидкость фильтруют под вакуумом через высушенный при температуре от 102°С до 105°С до постоянной массы стеклянный фильтр (ПОР 16) диаметром 40 мм. Осадок количественно переносят на фильтр с помощью смеси из 96 % спирта Р и воды Р (50:50, об/об) и промывают 10 мл 96 % спирта Р. Фильтр с осадком высушивают сначала на воздухе, затем при температуре от 102°С до 105°С до постоянной массы.

Содержание полисахаридов в процентах рассчитывают по формуле:

(m2 -m1)×2000 , m

где:

m1 — масса фильтра, г;

m2 — масса фильтра с осадком, г;

m — масса навески испытуемого сырья, г.

хранение

В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.

Ландыша листья

Convallariae folia

LILY-OF-THE-VALLEY LEAF*

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные до цветения и в начале цветения и высушенные листья многолетних травянистых растений Convallaria majalis L., Convallaria tran-

scaucasica Utkin ex Grossh. и Convallaria keiskei

Mig.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

A.Внешние признаки (#2.8.3). Листья цельные, реже изломанные, эллиптической или ланцетовидной формы с заостренной верхушкой, суживающиеся у основания и постепенно переходящие в длинные влагалища; отдельные или соединенные по два либо три. Край листа цельный, жилкование дугонервное. Листовая пластинка тонкая, ломкая, с голой, слегка блестящей поверхностью. Длина листьев до 20 см, ширина до 8 см. Цвет листьев зеленый, реже — коричневато-зеленый. Запах слабый.

B.Микроскопия (#2.8.3). При просматривании листа с поверхности с обеих сторон видны вытянутые по длине листа клетки эпидермиса с прямыми стенками. Устьица погруженные, округ­ лые, ориентированы по длине листа, окружены четырьмя клетками эпидермиса. Под верхним эпидермисом видны клетки палисадной ткани, вытянутые по ширине листа. Губчатая ткань рыхлая и состоит из разветвленных клеток, вытянутых по ширине листа. В отдельных клетках мезофилла видны пучки тонких рафид и крупные игольчатые кристаллы оксалата кальция.

С. Тонкослойная хроматография (2.2.27).

Испытуемый раствор. К 1,0 г измельченно-

го сырья (355) прибавляют 20 мл спирта (50 %,

об/об) Р, 10 мл раствора 100 г/л свинца (II) аце-

тата Р и нагревают с обратным холодильником на водяной бане в течение 2 мин. Охлаждают, центрифугируют. Надосадочную жидкость дважды встряхивают с хлороформом Р порциями по 15 мл, затем дважды встряхивают со смесью из

хлороформа Р и метанола Р (50:50, об/об) пор-

циями по 15 мл. При необходимости слои разделяют центрифугированием. Хлороформные слои объединяют, фильтруют через бумажный фильтр с 2 г натрия сульфата безводного Р и

выпаривают досуха. Остаток растворяют в 1 мл смеси из хлороформа Р и метанола Р (50:50, об/об).

Раствор сравнения. 5 мг конвалатоксина Р

растворяют в 1 мл смеси из хлороформа Р и ме-

танола Р (50:50, об/об).

Пластинка: ТСХ пластинка со слоем силикагеля G Р.

Подвижная фаза: хлороформ Р — метанол

Р— вода Р (80:18:2, об/об/об).

Наносимый объем пробы: по 10 мкл в виде полос.

Фронт подвижной фазы: не менее 12 см от линии старта.

Высушивание: на воздухе.

Проявление: пластинку опрыскивают реактивом ванилина Р и нагревают при температуре от 100°С до 105°С в течение 5 мин. Просматривают при дневном свете.

Результаты: на хроматограмме раствора сравнения обнаруживается зона зеленого цвета со значением Rf 0,38—0,48 (конвалатоксин). На хроматограмме испытуемого раствора обнаруживается зона, соответствующая по расположению и цвету зоне конвалатоксина на хроматограмме раствора сравнения. На хроматограмме испытуемого раствора обнаруживаются и другие зоны.

ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)

Допустимыепримеси(#2.8.2).Несырьевые части растения: частицы, проходящие сквозь сито (2400), — не более 3 %; пожелтевшие и побуревшие листья — не более 5 %. Органические примеси: не более 1 %. Минеральные примеси: не более 0,5 %.

Потерявмассепривысушивании(2.2.32).

Не более 14,0 %. 2,000 г измельченного сырья (2000) сушат при температуре от 100°С до

105°С.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.

Ландыша трава

Convallariae herba

LILY-OF-THE-VALLEY HERB*

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранная в период цветения и высушенная трава многолетних травянистых растений

Convallaria majalis L., Convallaria transcaucasica

Utkin ex Grossh. и Convallaria keiskei Mig.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

A. Внешние признаки (#2.8.3). Смесь цель-

ных, реже изломанных листьев, соцветий с цветоносами, отдельных цветков и кусочков цветоносов.Листьяэллиптическойилиланцетовидной формысзаостреннойверхушкой,суживающиеся у основания и постепенно переходящие в длинные замкнутые влагалища, отдельные или охватывающие друг друга по два или три. Край листа цельный, жилкование дугонервное. Лист тонкий, ломкий, с голой и слегка блестящей поверхностью. Длина листьев до 20 см, ширина до 8 см. Соцветие — односторонняя рыхлая кисть из 3—12 (до 20) желтоватых цветков на ребристом голом цветоносе, длиной до 20 см, толщиной до 1,5 мм. Цветки обоеполые с венчиковидным колокольчатым околоцветником, сростнолепестные, с шестью короткими отогнутыми зубчиками, на коротких цветоножках, с пленчатыми линейными прицветниками. Цвет листьев зеленый, реже коричневато-зеленый, цветков — желтова-

тый, цветоносов — светло-зеленый. Запах слабый.

B. Микроскопия (#2.8.3). При просматривании листа с поверхности с обеих сторон видны вытянутые по длине листа клетки эпидермиса с прямыми стенками. Устьица погруженные, округ­ лые, ориентированы по длине листа, окружены четырьмя клетками эпидермиса. Под верхним эпидермисом видны клетки палисадной ткани, вытянутые по ширине листа. Губчатая ткань рыхлая и состоит из разветвленных клеток, вытянутых по ширине листа. В отдельных клетках мезофилла видны пучки тонких рафид и крупные игольчатые кристаллы оксалата кальция. При просматривании венчика с поверхности с обеих сторон видны слегка вытянутые по оси много­ угольные клетки эпидермиса с тонкими прямыми стенками и нежной складчатостью кутикулы. Устьица погруженные, округлые, ориентированы по длине околоцветника, окружены 4—5 клетками эпидермиса. Эпидермис зубчика с сосочковидными выростами. В ткани околоцветника видны тонкие рафиды оксалата кальция, встречаются крупные игольчатые кристаллы; пыльца шаровидной формы с гладкой поверхностью.

С. Тонкослойная хроматография (2.2.27).

Испытуемый раствор. К 1,0 г измельченно-

го сырья (355) прибавляют 20 мл спирта (50 %,

об/об) Р, 10 мл раствора 100 г/л свинца (II) аце-

тата Р и нагревают с обратным холодильником на водяной бане в течение 2 мин. Охлаждают, центрифугируют. Надосадочную жидкость дважды встряхивают с хлороформом Р порциями по 15 мл, затем дважды встряхивают со смесью из

хлороформа Р и метанола Р (50:50, об/об) пор-

циями по 15 мл. При необходимости слои разделяют центрифугированием. Хлороформные слои объединяют, фильтруют через бумажный фильтр с 2 г натрия сульфата безводного Р и

выпаривают досуха. Остаток растворяют в 1 мл смеси из хлороформа Р и метанола Р (50:50, об/об).

Раствор сравнения. 5 мг конвалатоксина Р

растворяют в 1 мл смеси из хлороформа Р и ме-

танола Р (50:50, об/об).

Пластинка: ТСХ пластинка со слоем силикагеля G Р.

Подвижная фаза: хлороформ Р — метанол Р — вода Р (80:18:2, об/об/об).

Наносимый объем пробы: по 10 мкл в виде полос.

Фронт подвижной фазы: не менее 12 см от линии старта.

Высушивание: на воздухе.

Проявление: пластинку опрыскивают реактивом ванилина Р и нагревают при температуре от 100°С до 105°С в течение 5 мин. Просматривают при дневном свете.

Результаты: на хроматограмме раствора сравнения обнаруживается зона зеленого цвета со значением Rf 0,38—0,48 (конвалатоксин).

На хроматограмме испытуемого раствора обнаруживается зона, соответствующая по расположению и цвету зоне конвалатоксина на хроматограмме раствора сравнения. На хроматограмме испытуемого раствора обнаруживаются и другие зоны.

ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)

Допустимые примеси (#2.8.2). Соцветия:

не менее 5 %. Несырьевые части растения: частицы, проходящие сквозь сито (2400), — не более 3 %; пожелтевшие и побуревшие листья и побуревшие цветки — не более 5 %. Органические примеси: не более 1 %. Минеральные примеси: не более 0,5 %.

Потерявмассепривысушивании(2.2.32).

Не более 14,0 %. 2,000 г измельченного сырья (2000) сушат при температуре от 100°С до

105°С.

Общая зола (2.4.16). Не более 9,0 %.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.

Ландыша цветки

Convallariae flores

LILY-OF-THE-VALLEY FLOWER*

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные в период цветения и высушенные цветки многолетних травянистых растений

Convallaria majalis L., Convallaria transcaucasica

Utkin ex Grossh. и Convallaria keiskei Mig.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

A.Внешние признаки (#2.8.3). Смесь со-

цветий с остатками цветоносов длиной до 20 см, цветков и иногда кусочков цветоносов. Цветонос ребристый, голый, толщиной до 1,5 мм,

содносторонней рыхлой кистью из 3—12 (до 20) желтоватых цветков. Цветки обоеполые с венчиковидным колокольчатым околоцветником, сростнолепестные, с шестью короткими отогнутыми зубчиками, на коротких цветоножках, с пленчатыми линейными прицветниками. Тычинок шесть, на коротких нитях, прикрепленных к основанию околоцветника; завязь верхняя, трехгнездная, столбик с расширенным трехлопастным рыльцем. Цвет цветоносов светло-зеленый, цветков — желтоватый. Запах слабый.

B.Микроскопия (#2.8.3). При просматривании венчика с поверхности с обеих сторон видны слегка вытянутые по оси многоугольные клетки эпидермиса с тонкими прямыми стенками и нежной складчатостью кутикулы. Устьица погруженные, округлые, ориентированы по длине

околоцветника, окружены 4—5 клетками эпидермиса. Эпидермис зубчика с сосочковидными выростами. В ткани околоцветника видны тонкие рафиды оксалата кальция, встречаются крупные игольчатые кристаллы; пыльца шаровидной формы с гладкой поверхностью.

С. Тонкослойная хроматография (2.2.27).

Испытуемый раствор. К 1,0 г измельченно-

го сырья (355) прибавляют 20 мл спирта (50 %,

об/об) Р, 10 мл раствора 100 г/л свинца (II) аце-

тата Р и нагревают с обратным холодильником на водяной бане в течение 2 мин. Охлаждают, центрифугируют. Надосадочную жидкость дважды встряхивают с хлороформом Р порциями по 15 мл, затем дважды встряхивают со смесью из

хлороформа Р и метанола Р (50:50, об/об) пор-

циями по 15 мл. При необходимости слои разделяют центрифугированием. Хлороформные слои объединяют, фильтруют через бумажный фильтр с 2 г натрия сульфата безводного Р и

выпаривают досуха. Остаток растворяют в 1 мл смеси из хлороформа Р и метанола Р (50:50, об/об).

Раствор сравнения. 5 мг конвалатоксина Р

растворяют в 1 мл смеси из хлороформа Р и ме-

танола Р (50:50, об/об).

Пластинка: ТСХ пластинка со слоем силикагеля G Р.

Подвижная фаза: хлороформ Р — метанол Р — вода Р (80:18:2, об/об/об).

Наносимый объем пробы: по 10 мкл в виде полос.

Фронт подвижной фазы: не менее 12 см от линии старта.

Высушивание: на воздухе.

Проявление: пластинку опрыскивают реактивом ванилина Р и нагревают при температуре от 100°С до 105°С в течение 5 мин. Просматривают при дневном свете.

Результаты: на хроматограмме раствора сравнения обнаруживается зона зеленого цвета со значением Rf 0,38—0,48 (конвалатоксин). На хроматограмме испытуемого раствора обнаруживается зона, соответствующая по расположению и цвету зоне конвалатоксина на хроматограмме раствора сравнения. На хроматограмме испытуемого раствора обнаруживаются и другие зоны.

ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)

Допустимые примеси (#2.8.2). Несырье-

вые части растения: соцветия с побуревшими цветками — не более 5 %; отдельные цветоносы — не более 1 %. Органические примеси: не более 0,5 %. Минеральные примеси: не более

0,3 %.

Потерявмассепривысушивании(2.2.32).

Не более 12,0 %. 2,000 г измельченного сырья (2000) сушат при температуре от 100°С до

105°С.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.

Лапчатки корневища

Tormentillae rhisomata

TORMENTIL

Определение

Cобранные в период цветения, цельные или измельченные, очищенные от корней, остатков листьев и стеблей, отмытые от земли и высушенные корневища многолетнего травянистого растения

Potentilla erecta (L.) Raeusch. (syn.: P. tormentilla

Stokes).Cодержатнеменее7 %дубильныхвеществ

впересчете на пирогаллол (С6Н6О3; M.м. 126,1)

всухом сырье или не менее 20 % дубильных веществ в пересчете на танин в сухом сырье.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

А. Внешние признаки (#2.8.3). Корневища длиной до 10 см и толщиной от 1 см до 2 см, прямые или изогнутые, часто неопределенной формы, твердые, тяжелые, с многочисленными ямчатыми следами от придаточных корней. Цвет снаружи от красновато-коричневого до темно-коричневого, на изломе от желтоватокоричневого до красно-коричневого. Запах слабый, ароматный.

В. Микроскопия (#2.8.3). На поперечном срезе видно, что светло-желтые участки являются группами древесных волокон с сильно утолщенными оболочками, которые чередуются с радиально вытянутыми группами сосудов. Широкие сердцевинные лучи, кора и сердцевина состоят из тонкостенной паренхимы, содержащей многочисленные крупные друзы оксалата кальция и мелкие крахмальные зерна.

При просматривании измельченного сырья (355) (красновато-коричневатого цвета) с ис-

пользованием раствора хлоралгидрата Р вид-

ны: многочисленные друзы кальция оксалата диаметром до 60 мкм; обрывки тонкостенной древесной паренхимы красновато-коричневого цвета, содержащей флобафены; группы толстостенных древесных волокон и их обрывки; изредка обрывки пробки, состоящей из плотно сомкнутых тонкостенных коричневых клеток; обрывки узких сосудов с окаймленными порами.

Прииспользовании50 %(об/об)раствораглицеринаР,визмельченномсырье(355)виднымногочисленные мелкие крахмальные зерна округлой и эллиптической формы размером до 20 мкм.

с. Тонкослойная хроматография (2.2.27).

Испытуемый раствор. К 0,5 измельченного сырья (355) прибавляют 10 мл воды Р, встряхивают в течение 10 мин и фильтруют. Фильтрат дважды экстрагируют этилацетатом Р порциями по 10 мл. Объединенные этилацетатные

извлечения фильтруют через бумажный фильтр с 6 г натрия сульфата безводного Р и выпари-

вают досуха в вакууме. Остаток растворяют в

1,0 мл этилацетата Р.

Раствор сравнения. 1,0 мг катехина Р раст-

воряют в 1,0 мл метанола Р.

Пластинка: ТСХ пластинка со слоем силикагеля Р.

Подвижная фаза: кислота уксусная ледяная Р — эфир Р — гексан Р — этилацетат Р

(20:20:20:40, об/об/об/об).

Наносимый объем пробы: по 10 мкл в виде полос.

Фронт подвижной фазы: не менее 10 см от линии старта.

Высушивание: на воздухе в течение 10— 15 мин.

Проявление: пластинку опрыскивают свежеприготовленнымраст­вором5г/лпрочногосинего B, соли P. Появляются зоны красноватого цвета. Пластинку выдерживают в парах аммиака. Зоны приобретают более интенсивное красноватокоричневое окрашивание. Просматривают при дневном свете.

Результаты: ниже приведена последовательность зон хроматограмм раствора сравнения и испытуемого раствора. На хроматограмме испытуемого раствора обнаруживаются другие более слабые зоны.

Верх хроматографической пластинки

ИСПЫТАНИЯ (Числовые показатели)

Допустимыепримеси(#2.8.2). Несырь­ евые части растения: корневища, почерневшие в изломе, — не более 3 %; корни и надземные части растения, в том числе отделенные при анализе, — не более 3 %. Другие допустимые примеси: не более 2 %.

Потеря в массе при высушивании

(2.2.32). Не более 12,0 %. 1,000 г измельченного сырья (355) сушат при температуре от 100°С до 105°С в течение 2 ч.

Общая зола (2.4.16). Не более 5,0 %.

Количественное определение

Определениесодержаниядубильных веществ в пересчете на пирогаллол (2.8.14).

Используют 0,500 г измельченного сырья (180).

Определение содержания дубильных веществ в пересчете на танин. 2,000 г измельчен-

ного сырья (2400) помещают в коническую колбу со шлифом вместимостью 500 мл, прибавляют 250 мл кипящей воды Р и кипятят с обратным холодильником в течение 30 мин при периодическом перемешивании. Затем охлаждают до комнатной температуры, процеживают и доводят водой Р до объема 250,0 мл.

25,0 мл полученного извлечения помещают в коническую колбу вместимостью 750 мл, прибавляют 500 мл воды Р, 25,0 мл раствора индигосульфокислоты (0,25 мг индигокармина Р растворяют в 6,5 мл кислоты серной Р, прибав-

ляют 6,5 мл кислоты серной Р, доводят водой Р до объема 250 мл и фильтруют). Титруют при постоянном перемешивании 0,02 М раствором­ калия перманганата до золотисто-желтого окрашивания.

Параллельно проводят контрольный опыт. 1 мл 0,02 М раствора калия перманганата

соответствует 0,004157 г дубильных веществ в пересчете на танин.

Хранение

В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.

Левзеи сафлоровидной корневища с корнями

Rhapontici carthamoides rhizomata cum radicibus

MARAL ROOT*

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные осенью, очищенные от остатков надземных частей и от земли, промытые и высушенные корневища с корнями многолетнего травянистого растения Rhaponticum carthamoides (Willd) Iljin (syn.: Leuzea carthamoides (Willd) DC). Содержат не менее 0,1 % 20-

гидроксиэкдизона­ (C27H44O7; М.м. 480,6) в пересчете на сухое сырье.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

A. Внешние признаки (#2.8.3). Корневи-

ща цельные или разрезанные, деревянистые, иногда с остатками стеблей длиной до 1 см, цилиндрические, многоглавые, разветвленные, снаружи неравномерно морщинистые, в изломе неровные, с многочисленными тонкими ветвящимися придаточными корнями. Корни упругие, мелкобороздчатые. Толщина корневищ до 3 см, длина корней — до 36 см. Цвет корневищ и корней снаружи от коричневого до почти черного, в изломе — бледно-желтый; часто встречаются корни с мелкими участками, лишенными коры. Запах слабый, своеобразный.

B.Микроскопия (#2.8.3). На поперечном срезе корня заметен широкий участок первичной коры. Эпидермис однослойный. Клетки эндодермы тангентально-вытянутые, утолщенные; вблизи эндодермы расположены крупные секреторные вместилища в виде прерывистого пояса. Они состоят из 4—5 крупных выделительных клеток, часто с мелкими каплями смолистого содержимого (реакция с раствором­ Судана III Р). Молодые корни имеют первичное строение, старые корни — вторичное. В клетках лубяной паренхимы содержится инулин; изредка встречаются одиночные призматические кристаллы

идрузы оксалата кальция. Древесина состоит из множества утолщенных одревесневших волокон (либриформ) и немногочисленных узких сосудов и трахеид. На поперечном срезе корневища видны: небольшие группы каменистых клеток; крупные секреторные вместилища с содержимым оранжевого цвета; в древесине — сосуды, либриформ; в сердцевине — редкие вместилища; в паренхиме — инулин и друзы оксалата кальция.

C.Тонкослойная хроматография (2.2.27).

Испытуемый раствор. 5,0 г измельченного

сырья (710) помещают в колбу вместимостью 100 мл со шлифом, прибавляют 50 мл спирта (70 %, об/об) Р, закрывают пробкой и выдерживают при периодическом перемешивании в течение 24 ч. Фильтруют через бумажный фильтр и доводят спиртом (70 %, об/об) Р до объема 50 мл. Фильтруют через фильтр с диаметром пор

0,45 мкм.

Раствор сравнения. 1 мг 20-гидрокси­ экдизона Р растворяют в 10 мл спирта (70 %, об/об) Р.

Пластинка: ТСХ пластинка со слоем подхо-

дящего силикагеля Р.

Подвижная фаза: толуол Р — ацетон Р — этанол Р — раствор аммиака концентрирован-

ный Р (100:140:32:9, об/об/об/об).

Наносимый объем пробы: по 5 мкл в виде полос.

Фронт подвижной фазы: не менее 14 см от линии старта.

Высушивание: на воздухе.

Проявление: пластинку опрыскивают реактивом ванилина Р и нагревают при температуре от 100°С до 105°С. Просматривают при дневном свете.

Результаты: на хроматограмме раствора сравнения обнаруживается основная зона серовато-темно-красного цвета (20-гидрокси­ экдизон). На хроматограмме испытуемого раствора обнаруживается зона, соответствующая по расположениюицветузоне20-гидроксиэкдизона на хроматограмме раствора сравнения. На хроматограмме испытуемого раствора обнаруживаются также две или три зоны розового и несколько зон коричневого или коричневато-серого цвета.

D. К измельченному сырью, полученному путемсоскабливанияпоперечногоизломакорневища или корня, прибавляют 1—2 капли раствора

α-нафтола Р1 и 1 каплю кислоты серной Р. По-

является красновато-фиолетовое окрашивание (при использовании раствора резорцина Р вместо раствора α-нафтола Р1 появляется красное окрашивание, при использовании раствора тимола Р — розовато-красное окрашивание).

ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)

Крахмал. К измельченному сырью, полученному путем соскабливания поперечного излома корневища или корня, прибавляют 2—3 капли раствора йода Р1. Не должно появляться синее окрашивание.

Допустимыепримеси(#2.8.2).Несырьевые части растения: остатки стеблей, в том числе отделенные при анализе, — не более 2 %. Органические примеси: не более 1 %. Минеральные примеси: не более 4 %.

Потеря в массе при высушивании (2.2.32).

Не более 13,0 %. 2,000 г измельченного сырья (2000) сушат при температуре от 100°С до 105°С.

Общая зола (2.4.16). Не более 9,0 %.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Испытуемый раствор. 15,0 г измельченного сырья (710) помещают в патрон из фильтровальной бумаги и переносят в экстрактор аппарата Сокслета, рабочий объем которого составляет около 150 мл. Экстрагируют 180—200 мл метанола Р в течение 7 ч (25—30 сливов). Извлечение упаривают в вакууме при температуре 40°С до объема около 5 мл, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 25 мл, используя метанол Р, и доводят до объема 25,0 мл этим же растворителем.

Раствор сравнения. 16,8 мг 20-гидрокси­ экдизона Р растворяют в метаноле Р и доводят до объема 10,0 мл этим же растворителем.

ТСХ пластинку со стеклянной подложкой, размером 20×20 см, с закрепленным слоем силикагеля Р делят на пять равных полос. На линию старта первой и второй полос наносят по 150 мкл испытуемого раствора в виде полос длиной 20 мм, на третьей и четвертой — по 150 мкл раствора сравнения, пятая полоса используется для приготовления компенсационного раствора. Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе в течение 20 мин и помещают в камеру со смесью растворителей хлороформ Р — метанол Р — ацетонР(6:2:1,об/об/об)(насыщаютхроматографическую камеру парами растворителя в течение не менее 30 мин). Когда фронт подвижной фазы пройдет не менее 17 см от линии старта, пластинкувынимаютизкамерыисушатнавоздухевтечение 1 ч. Первую и третью полосы пластинки опры-

скивают раствором­ ванилина в серной кислоте Р. На второй и четвертой полосах отмечают зоны

20-гидроксиэкдизона, расположенные на уровне проявленных зон на первой и третьей полосах.

Слои сорбента с отмеченных зон на второй и четвертой полосах количественно переносят в две колбы вместимостью 100 мл со шлифом, прибавляют по 15,0 мл метанола Р, закрывают пробкой и встряхивают в течение 4 ч. Фильтруют элюаты через стеклянный фильтр (ПОР 16).

Измеряют оптическую плотность (2.2.25) элюатов испытуемого раствора и раствора сравнения при 242 нм, используя элюат с пятой полосы в качестве компенсационного раствора.

Содержание 20-гидроксиэкдизона в процентах рассчитывают по формуле:

А×m0 ×0,0025×Р ,

А0 ×m

где:

А — оптическая плотность элюата испытуемого раствора;

А0 — оптическая плотность элюата раствора сравнения;

m — масса навески испытуемого сырья, г; m0 — масса навески 20-гидроксиэкдизона, мг; Р — содержание 20-гидроксиэкдизона в ре-

активе, %.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.

Левзеи сафлоровидной листья

Rhapontici carthamoides folia

LEUZEA LEAF*

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные в августе и высушенные ли-

стья Rhaponticum carthamoides (Willd.) Iljin (syn.: Leuzea carthamoides (Willd) DC). Содержат не менее 0,1 % 20-гидроксиэкдизона (C27H44O7; М.м. 480,6) в пересчете на сухое сырье.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

A. Внешние признаки (#2.8.3). Листья паутинисто-опушенные либо голые. Нижние листья черешковые, длиной 12—60 см и шириной 5—20 см, глубоко-перистораздельные с более крупной конечной долей и 5—6 парами боковых яйцевидных заостренных по краю зубчатых долей; верхние — без черешка, перистолопастные, с сетчатым жилкованием, с нижней стороны с хорошо заметной центральной жилкой светло-зеленого цвета, по краю цельные. Цвет листьев с обеих сторон зеленый.

B. Микроскопия (#2.8.3). При просматриваниилистасповерхностивидныклеткиэпидермиса верхней стороны — с извилистыми боковыми стенками. Клетки нижнего эпидермиса много­

угольные,спрямымиизломаннымистенками,более крупные, 8—12-гранные. Устьица окружены 4—6 клетками эпидермиса (аномоцитный тип), встречаются на обеих сторонах листа. Волоски простые, многоклеточные, с длинной, часто сильно извилистой конечной клеткой. В паренхиме и вдоль жилок заметны секреторные ходы с зернистым или маслянистым содержимым от желтоватого до темно-коричневого цвета.

С. Тонкослойная хроматография (2.2.27).

Испытуемый раствор. 1,0 г измельченного сырья (355) помещают в колбу вместимостью 25 мл со шлифом, прибавляют 10 мл спирта (70 %, об/об) Р и настаивают при периодическом перемешивании в течение суток. Фильтруют через бумажный фильтр и доводят спиртом (70 %, об/об) Р до объема 10 мл.

Растворсравнения.1мг20-гидрокси­ ­экди­зона Р растворяют в 10 мл спирта (70 %, об/об) Р.

Пластинка: ТСХ пластинка со слоем подхо-

дящего силикагеля Р.

Подвижная фаза: толуол Р — ацетон Р — этанол Р — раствор аммиака концентрирован-

ный Р (100:140:32:9, об/об/об/об).

Наносимый объем пробы: по 5 мкл в виде полос.

Фронт подвижной фазы: не менее 14 см от линии старта.

Высушивание: на воздухе.

Проявление: пластинку опрыскивают реактивом ванилина Р и нагревают при температуре от 100°С до 105°С. Просматривают при дневном свете.

Результаты: на хроматограмме раствора сравнения обнаруживается основная зона серовато-темно-красного цвета (20гидроксиэкдизон). На хроматограмме испытуемого раствора обнаруживается зона, соответствующая по расположению и цвету зоне 20-гидроксиэкдизона на хроматограмме раствора сравнения. На хроматограмме испытуемого раствора обнаруживаются также две или три зоны розового и несколько зон коричневого или коричневато-серого цвета.

D. 3 мл испытуемого раствора, приготовленного как указано выше, упаривают в пробирке до сухого остатка и прибавляют 1 мл свежеприготовленного раствора 50 г/л ацетилх-

лорида Р в кислоте уксусной ледяной Р. Через

15—20 мин появляется коричневато-красное окрашивание. При прибавлении 3 мл раствора 50 г/л натрия­ гидроксида Р окраска переходит в светло-желтую.

ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)

Допустимые примеси (#2.8.2). Несырье-

вые части растения: листья, утратившие окрас­ ку, присущую данному виду (побуревшие, почерневшие, выцветшие и другие), — не более 15 %. Органические примеси: не более 1 %. Минеральные примеси: не более 1 %.

Потерявмассепривысушивании(2.2.32).

Не более 15,0 %. 2,000 г измельченного сырья (355) сушат при температуре от 100°С до 105°С.

Общая зола (2.4.16). Не более 7,0 %.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте (2.8.1). Не более 0,5 %.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Жидкостная хроматография (2.2.29).

Испытуемый раствор. 10,00 г измельченно-

го сырья (355) помещают в колбу вместимостью 200 мл со шлифом, прибавляют 100 мл спирта (70 %, об/об) Р и настаивают при периодическом перемешивании в течение суток. Фильтруют через бумажный фильтр и доводят спиртом (70 %, об/об) Р до объема 100,0 мл.

Раствор сравнения. 5,0 мг 20-гидрокси­ экдизона Р растворяют в 50,0 мл спирта (70 %, об/об) Р.

Условия хроматографирования:

––колонка длиной 0,25 м и внутренним диаметром 5 мм, заполненная силикагелем окта-

децилсилильным, деактивированным по отношению к основаниям, для хроматографии Р с

размером частиц 5 мкм;

––подвижная фаза: вода Р — ацетонитрил для хроматографии Р (83:17, об/об);

––скорость подвижной фазы: 0,5 мл/мин;

––температура: 30°С;

––спектрофотометрический детектор,

длина волны 247 нм;

––объем вводимой пробы: 10 мкл.

Содержание 20-гидроксиэкдизона в процентах рассчитывают по формуле:

где:

S — площадь пика 20-гидроксиэкдизона на хроматограмме испытуемого раствора;

S0 — площадь пика 20-гидроксиэкдизона на хроматограмме раствора сравнения;

m0 — масса навески 20-гидроксиэкдизона, мг; m — масса навески испытуемого сырья, г; Р — содержание 20-гидроксиэкдизона в ре-

активе, %.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.

Лимонника семена

Schisandrae chinensidis semina

SCHIZANDRA SEED*

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Зрелые, освобожденные от околоплодников и высушенные семена деревянистой лианы

Schisandra chinensis (Turcz.) Baill.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

A.Внешние признаки (#2.8.3). Семена округлопочковидной формы, на вогнутой стороне с заметным темно-серым рубчиком, расположенным поперек семени. Длина от 3 мм до 5 мм, ширина от 2 мм до 4,5 мм, толщина от 1,5 мм до 2,5 мм. Поверхность гладкая, блестящая, желтовато-коричневого цвета. Семена состоят из твердой хрупкой кожуры и плотного ядра, которое у недоразвитых семян может отсутствовать. Кожура легко ломается

исвободно отстает от ядра. Ядро подковообразной формы, серовато-желтое, один конец конусовидно заостренный, другой округлый. На выпуклой стороне ядра семени проходит светло-коричневая бороздка. Основную массу ядра семени составляет эндосперм. В заостренном конце верхушки (в эндосперме) лежит небольшой зародыш, заметный при увеличении. Запах при растирании сильный, специфический.

B.Микроскопия (#2.8.3). На поперечном срезе семени видна семенная кожура, состоящая из нескольких слоев: эпидермальный слой представлен крупными радиально вытянутыми клетками с утолщенными одревесневшими темно-желтыми оболочками, пронизанными порами. Под ним расположен склеренхимный слой, состоящий из 4—6 рядов сильно одревесневших каменистых клеток. Далее лежит слой спавшихся клеток, а за ним один ряд очень крупных тонкостенных четырехугольных клеток, содержащих маслянистые включения в виде капель зеленоватожелтого цвета. Самый внутренний слой семенной кожуры — бесструктурная спавшаяся тонкостенная ткань. Эндосперм семени состоит из небольших многоугольных клеток, содержащих капли жирного масла и мелкие алейроновые зерна.

ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)

Допустимые примеси (#2.8.2). Несырье-

вые части растения: другие части растения (мякоть плода, веточки) — не более 3 %; поврежденные семена — не более 5 %. Органические примеси: не более 1 %. Минеральные примеси: не более 1 %.

Потерявмассепривысушивании(2.2.32).

Не более 12,0 %. 2,000 г измельченного сырья (2000) сушат при температуре от 100°С до

105°С.

Общая зола (2.4.16). Не более 3,0 %.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте (2.8.1). Не более 0,5 %.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.

Липы цветки

Tiliae flores

LIME FLOWER

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные во время цветения и высушенные соцветия деревьев Tilia cordata Miller, Tilia platyphyllos Scop. и Tilia × vulgaris Heyne или смеси этих видов. Содержат не менее 0,5 % суммы флавоноидов в пересчете на кверцетин (С15Н10О7; М.м. 302,2) в сухом сырье.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

A.Внешние признаки (#2.8.3). Соцветия щитковидные, состоят из 5—15 (Т. cordata) или 2—9 (T. platyphyllos) цветков на удлиненных цветоножках, сидящих на общем цветоносе, сросшемсяв нижней части с главной жилкой прицветного листа. Цветки правильные, диаметром от 1 см до 1,5 см. Чашечка из пяти продолготоватояйцевидных чашелистиков, густо опушенных по краю и с внутренней стороны. Венчик из пяти свободных яйцевидных лепестков, длиннее чашечки. Тычинки многочисленные, с двумя желтыми пыльниками на длинных нитях, сросшихся

впятьпучков.Пестикодинсверхнейшаровидной завязью, густо покрытой пушистыми волосками. Встречаются цветочные бутоны и незрелые пло- ды—шаровидныесильноопушенныеорешкидо 2 мм в диаметре. Прицветный лист пленчатый, с густой сетью жилок, длиной до 6 см и шириной до 1,5 см, продолговато-эллиптической формы с притупленной верхушкой, в нижней половине сросшийся по главной жилке с цветоносом. Цвет лепестковбеловато-желтый,чашелистиков—зе- леноватоили желтовато-серый, прицветных листьев — светло-желтый или зеленовато-желтый. Запах слабый, ароматный. Вкус сладковатый, с ощущением слизистости.

B.Микроскопия (#2.8.3). При просматривании прицветного листа с поверхности видны слегка извилистые клетки эпидермиса с обеих сторон листа. Устьица только на нижней стороне, овальные, с 4—6 околоустьичными клетками (аномоцитный тип). Волоски встречаются преимущественно в средней части прицветного листа, вблизи места его срастания с цветоносом. Волоски двух типов: головчатые — с многоклеточной овальной головкой на короткой 1—3-клеточной ножке и звездчато-лучистые, состоящие из 3—7 длинных извилистых клеток, сросшихся основаниями. Мезофилл очень рыхлый, типа аэренхимы, с друзами, реже призматическими кристаллами оксалата кальция, особенно многочисленными вблизи жилок. Лепестки и чашелистики характеризуются наличием друз оксалата кальция и таких же волосков, как и на прицветном листе. Кроме того, у основания ча-