2007_-Byelorussian_Pharmacopoeia_Volume_2

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

2,000 г измельченного сырья (1400) помещают в круглодонную колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 60 мл спирта (40 %, об/об) Р и нагревают с обратным холодильником в водяной бане в течение 45 мин. Охлаждают и фильтруют в мерную колбу вместимостью 100 мл. К остатку сырья в круглодонной колбе прибавляют 40 мл спирта (40 %, об/об) Р и нагревают с обратным холодильником в водяной бане в течение 15 мин. Охлаждают. Фильтруют, промывая круглодонную колбу и остаток на фильтре 5 мл спирта (40 %, об/об) Р, в ту же мерную колбу. Доводят до объе-

ма 100,0 мл спиртом (40 %, об/об) Р. 10 мл полу-

ченного раствора пропускают через стеклянную колонку диаметром 10 мм, заполненную 5 г алю-

миния оксида нейтрального Р (раствор А). Испытуемый раствор. К 5,0 мл раствора А

прибавляют 5,0 мл раствора гидроксиламина щелочного Р3, выдерживают в течение 20 мин,

прибавляют 10,0 мл 1 М раствора хлористоводородной кислоты и 5,0 мл раствора 10 г/л железа (III) хлорида Р в 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты. Перемешивают и фильтруют через предварительно смоченный водой Р бумажный фильтр.

Компенсационный раствор. К 5,0 мл воды Р прибавляют 5,0 мл раствора гидроксиламина щелочного Р3, выдерживают в течение 20 мин,

прибавляют 10,0 мл 1 М раствора хлористоводородной кислоты и 5,0 мл раствора 10 г/л железа (III) хлорида Р в 0,1 М растворе хлористоводородной кислоты.

Измеряют оптическую плотность (2.2.25) испытуемого раствора при 512 нм.

Содержание суммы иридоидов в пересчете на пеонифлорин в процентах рассчитывают по формуле:

А×500 , m×16,2

где:

16,2 — удельный показатель поглощения продуктов реакции пеонифлорина;

А — оптическая плотность испытуемого раствора;

m — масса навески испытуемого сырья, г.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.

Пиона уклоняющегося трава

Paeoniae anomalae herba

PEONY HERB*

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранная в фазу цветения и высушенная надземная часть многолетнего растения Paeonia

anomala L. Содержат не менее 2,5 % суммы иридоидов в пересчете на пеонифлорин (C23H28O11; М.м. 480,5) в сухом сырье.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

A.Внешние признаки (#2.8.3). Смесь стеб­ лей, листьев, цветков, бутонов и незрелых плодов различной степени развития. Стебли бороздчатые или ребристые, голые, длиной до 35 см и толщиной до 2 см, внизу с рыхлой сердцевиной, или полые, вверху плотные. Листья рассеченные, очередные, голые, сильно сморщенные; пластинка листа длиной от 3 см до 13 см, с длинным черешком. Сегменты глубокотройчатоили перисторассеченные, средние сегменты трехлопастные, боковые — ланцетные, цельнокрайние. Цветки крупные, диаметром от 8 см до 13 см, чашечка из пяти неодинаковых зеленых листочков, лепестков пять и более. Тычинки многочисленные, пестиков оттрехдопяти,сидящихнадиске.Плодсостоитиз 3—5листовок.Цветстеблейкоричневато-зеленый, листья с верхней стороны темно-зеленые, с нижней — светло-зеленые; лепестки красные или красновато-коричневатые. Запах слабый.

B.Микроскопия (#2.8.3). При просматривании листа с поверхности видны: клетки эпидермиса с обеих сторон листа с сильно извилистыми антиклинальными стенками; многочисленные устьица аномоцитного типа с 4—6 околоустьичными клетками только на нижней стороне листа; клетки верхнего эпидермиса, местами имеющего четковидно-утолщенные оболочки, особенно часто над жилками и по краю сегментов листа. Над главной жилкой сегмента листа с верхней стороны имеются многочисленные короткие волоски, расположенные под острым углом к поверхности листа. Основание волоска слегка расширенное, верхушка суженная, но не заостренная и всегда направлена к верхушке доли листа. Волоски одноклеточные, редко двухклеточные, имеющие довольно толстую оболочку, зернистое содержимое, покрытые продольноскладчатой кутикулой. С нижней стороны листа видна аэренхима. С верхней стороны листа в клетках мезофила видны скопления мелких кристаллов оксалата кальция.

ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)

Допустимыепримеси(#2.8.2).Несырьевые части растения: стебли с остатками корневищ — не более 20 %. Органические примеси: не более 2 %. Минеральные примеси: не более 1 %.

Потерявмассепривысушивании(2.2.32).

Не более 13,0 %. 2,000 г измельченного сырья (2000) сушат при температуре от 100°С до

105°С.

Общая зола (2.4.16). Не более 7,0 %.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте (2.8.1). Не более 1,0 %.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

3,000 г измельченного сырья (1400) помещают в круглодонную колбу вместимостью 100 мл,

прибавляют 60 мл спирта (40 %, об/об) Р и нагревают с обратным холодильником в водяной бане в течение 45 мин. Охлаждают и фильтруют в мерную колбу вместимостью 100 мл. К остатку сырья в круглодонной колбе прибавляют 40 мл спирта (40 %, об/об) Р и нагревают с обратным холодильником в водяной бане в течение 15 мин. Охлаждают. Фильтруют, промывая круглодонную колбу и остаток на фильтре 5 мл спирта (40 %, об/об) Р, в ту же мерную колбу. Доводят до объе-

ма 100,0 мл спиртом (40 %, об/об) Р. 10 мл полу-

ченного раствора пропускают через стеклянную колонку диаметром 10 мм, заполненную 5 г алю-

миния оксида нейтрального Р (раствор А). Испытуемый раствор. К 5,0 мл раствора А

прибавляют 5,0 мл раствора гидроксиламина щелочного Р3, выдерживают в течение 20 мин,

прибавляют 10,0 мл 1 М раствора хлористоводородной кислоты и 5,0 мл раствора 10 г/л железа (III) хлорида Р в 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты. Перемешивают и фильтруют через предварительно смоченный водой Р бумажный фильтр.

Компенсационный раствор. К 5,0 мл воды Р прибавляют 5,0 мл раствора гидроксиламина щелочного Р3, выдерживают в течение 20 мин,

прибавляют 10,0 мл 1 М раствора хлористоводородной кислоты и 5,0 мл раствора 10 г/л железа (III) хлорида Р в 0,1 М растворе хлористоводородной кислоты.

Измеряют оптическую плотность (2.2.25) испытуемого раствора при 512 нм.

Содержание суммы иридоидов в пересчете на пеонифлорин в процентах рассчитывают по формуле:

А×500 , m×16,2

где:

16,2 — удельный показатель поглощения продуктов реакции пеонифлорина;

А — оптическая плотность испытуемого раствора;

m — масса навески испытуемого сырья, г.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.

Подорожника большого листья

Plantaginis majoris folia

COMMON PLANTAIN LEAF*

Определение

Собранные во время цветения и высушенные листья многолетнего травянистого растения Plantago major L. Содержат не менее 12,0 % полисахаридов в пересчете на сухое сырье.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

А. Внешние признаки (#2.8.3). Цельные или частично измельченные листья, широкояйцевидные или широкоэллиптические, цельнокрайние или слегка зубчатые, с 3—9 продольными дугообразными жилками, суженные в широкий черешок различной длины. В месте обрыва черешка видны длинные остатки темных нитевидных жилок. Длина листьев с черешком до 24 см, ширина от 3 см до 11 см. Цвет зеленый или коричневато-зеленый. Запах слабый.

В. Микроскопия (#2.8.3). Видны: клетки верхнего эпидермиса — многоугольные с прямыми стенками, нижнего — со слабоизвилистыми стенками. Кутикула местами образует складки. Устьица имеются на обеих сторонах листа, преимущественно на нижней, округлые, окружены 3—4 клетками эпидермиса (аномоцитный тип). Волоски простые и головчатые. Простые волоски с расширенным основанием, многоклеточные, гладкие. Головчатые волоски двух типов: на одноклеточной ножке с удлиненной двухклеточной головкой, реже встречаются головчатые волоски на многоклеточной ножке с шарообразной или овальной одноклеточной головкой. В местах прикрепления волосков клетки эпидермиса образуют розетку.

C. К 10 мл извлечения, полученного как указано в разделе «Количественное определение», прибавляют 30 мл 96 % спирта Р и перемешивают. Появляются хлопьевидные сгустки, выпадающие в осадок при стоянии (полисахариды). Раствор с осадком фильтруют через стеклянный фильтр (ПОР 16) и собирают осадок с фильтра. Осадок растворяют в 1 мл 0,1 М раствора нат­ рия гидрооксида, прибавляют 0,25 мл раствора

5 г/л карбазола Р в 96 % спирте, свободном от альдегидов, Р, 5 мл кислоты серной Р и пере-

мешивают. Нагревают на водяной бане в течение 10 мин. Появляется красно-фиолетовое окрашивание (галактуроновая кислота).

ИСПЫТАНИЯ (Числовые показатели)

Допустимые примеси (#2.8.2). Несырье-

вые части растения: побуревшие и почерневшие листья — не более 5 %; цветочные стрелки — не более 1 %. Органические примеси: не более 1 %. Минеральные примеси: не более 1 %.

Потерявмассепривысушивании(2.2.32).

Не более 14,0 %. 2,000 г измельченного сырья (2000) сушат при температуре от 100°С до

105°С.

Общая зола (2.4.16). Не более 20,0 %.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте (2.8.1). Не более 6,0 %.

Количественное определение

10,00 г измельченного сырья (500) помещают в колбу вместимостью 500 мл, прибавляют 100 мл воды Р и кипятят с обратным холодиль-

ником при периодическом перемешивании в течение 30 мин. Оставляют до оседания частиц и собирают надосадочную жидкость. Экстракцию повторяют еще четыре раза с использованием воды Р порциями по 100 мл. Водные извлечения объединяют и центрифугируют при 5000 об/мин в течение 10 мин. Всю надосадочную жидкость процеживают через ватный тампон и доводят водой Р до объема 500,0 мл. 25,0 мл полученного раствора помещают в центрифужную пробирку, прибавляют75мл96 %спиртаР,перемешивают, подогревают в водяной бане при 60°С в течение 5 мин. Через 30 мин содержимое центрифугируют при 5000 об/мин в течение 30 мин. Надосадочную жидкость фильтруют под вакуумом через высушенный при температуре от 100°С до 105°С до постоянной массы стеклянный фильтр (ПОР 16) диаметром 40 мм. Осадок количественно переносят на фильтр и последовательно промывают 15 мл смеси из 96 % спирта Р и воды Р

(3:1, об/об), 10 мл ацетона Р и 10 мл этилаце-

тата Р. Фильтр с осадком высушивают сначала на воздухе, затем при температуре от 100°С до 105°С до постоянной массы.

Содержание полисахаридов в процентах рассчитывают по формуле:

(m2 -m1)×2000 , m

где:

m1 — масса фильтра, г;

m2 — масса фильтра с осадком, г;

m — масса навески испытуемого сырья, г.

Хранение

В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.

Полыни горькой трава

Absinthii herba

WORMWOOD

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные в начале цветения, высушенные, цельные или измельченные прикорневые листья или слабоолиственные цветущие верхушки, или смесь этих частей растения Artemisia absinthium L. Содержит не менее 2 мл/кг эфирного масла в пересчете на сухое сырье.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

A.Внешниепризнаки(#2.8.3).Цельныеили частично измельченные олиственные верхушки цветоносных стеблей длиной не более 25 см, не содержащие грубых частей стебля. Цветоносные стебли слегка ребристые, зеленоватосерые, войлочноопушенные, диаметром до 2,5 мм. Листья у основания побега с длинны-

ми черешками, имеют треугольно-округлые дважды-триждыперисторассеченные листовые пластинки длиной до 10 см, с закругленными или ланцетовидными сегментами. Стеблевые листья менее сегментированы. Верхушечные прицветные листья сидячие, ланцетные, цельнокрайние. Листья часто войлочноопушенные с обеих сторон, от сероватого до зеленоватого цвета. Побеги могут быть нецветущими, но чаще несут на верхушках раскидистую сложную метелку мелких шаровидных корзинок диаметром от 2,5 мм до 4 мм. Корзинки пониклые, выходят по одной или две из пазух ланцетных кроющих листьев. Снаружи корзинки покрыты обверткой из черепитчато-расположенных линейных, снаружи шерстистых листочков. Внутренние листочки эллиптические, тупые, пленчатые. Цветоложе выпуклое, с белыми чешуйчатыми пленками длиной до 1 мм и более. Цветки мелкие, желтые; наружные трубчатые, пестичные; внутренние воронковидные, обоеполые, длиной около 2 мм. Запах ароматный, сильный, своеобразный.

В. Микроскопия (#2.8.3). При просматривании листа с поверхности видны клетки эпидермиса с извилистыми стенками. Устьица с обеих сторон листа, окружены 3—5 клетками эпидермиса (аномоцитный тип). Характерны многочисленные Т-образные волоски, состоящие из короткой 2—4-клеточной ножки, несущей длинную тонкостенную клетку с заостренными концами, прикрепленную к ножке посередине и лежащую горизонтально. Места прикрепления волосков имеют вид круглых валиков. На обеих сторонах листа видны крупные овальные эфиромасличные железки с поперечной перегородкой. По краям и в разрезе железок видно, что они состоят из 8 (реже из 6) выделительных клеток, расположенных в два ряда и четыре яруса на короткой одноклеточной ножке. При измельчении сырья (355) видны: многочисленные Т-образные трихомы; фрагменты эпидермиса, аномоцитные устьица и эфиромасличные железки; части трубчатых и воронковидных цветков, некоторые содержат группы кристаллов оксалата кальция; множество цветковых чешуй, каждая из которых состоит из мелких клеток, формирующих ножку, и очень длинных цилиндрических и тонкостенных клеток длиной от 1 мм до 1,5 мм; шаровидные зерна пыльцы, диаметром около 30 мкм, с тремя отверстиями

изаметно бородавчатой экзиной; группы механических волокон, мелких сосудов со спиральными и кольцеобразными утолщениями; фрагменты крупных точечных сосудов и паренхимы стебля с утолщенными оболочками клеток, пронизанными порами.

С. Тонкослойная хроматография (2.2.27).

Испытуемый раствор. К 2 г измельченного сырья (355) прибавляют 50 мл кипящей воды Р

ивыдерживают в течение 5 мин при периоди-

ческом встряхивании. Охлаждают, прибавляют

5 мл раствора 100 г/л свинца (II) ацетата Р.

Перемешивают и фильтруют. Колбу и остаток на фильтре ополаскивают 20 мл воды Р. Фильтрат встряхивают с 50 мл метиленхлорида Р. Отделяют органический слой, высушивают натрия сульфатом безводным Р, фильтруют и выпари-

вают досуха на водяной бане. Остаток растворяют в 0,5 мл 96% спирта Р.

Раствор сравнения. 2 мг метилового крас-

ного Р и 2 мг резорцина Р растворяют в 10,0 мл

метанола Р.

Пластинка: ТСХ пластинка со слоем силикагеля Р.

Подвижная фаза: ацетон Р – кислота уксусная ледяная Р – толуол Р – метиленхлорид Р (10:10:30:50, об/об/об/об).

Наносимый объем пробы: по 10 мкл в виде полос.

Фронт подвижной фазы: не менее 15 см от линии старта.

Высушивание: на воздухе.

Проявление А: пластинку опрыскивают

раствором­ уксусного ангидрида – кислоты сер-

ной Р. Просматривают при дневном свете. Результаты А: на хроматограмме испы-

туемого раствора обнаруживается зона синего цвета (артабсин), расположенная немного выше зоны красного цвета метилового красного на хроматограмме раствора сравнения.

Проявление В: пластинку нагревают при температуре от 100°С до 105°С в течение 5 мин. Просматривают при дневном свете.

Результаты В: на хроматограмме раствора сравнения в средней части обнаруживается зона красного цвета (метиловый красный) и ниже — зона светло-розового цвета (резорцин). На хроматограмме испытуемого раствора обнаруживается интенсивная зона красного или коричневато-красного цвета (абсинтин), расположенная на уровне зоны резорцина на хроматограмме раствора сравнения. На хроматограмме испытуемого раствора обнаруживаются другие зоны, менее интенсивные, чем зона абсинтина.

ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)

Допустимые примеси (#2.8.2). Несырье-

вые части растения: стебли диаметром более 4 мм – не более 5%. Сумма других допустимых примесей: не более 2%.

Показатель горечи (2.8.15). Не менее

10 000.

Потерявмассепривысушивании(2.2.32).

Не более 10,0%. 1,000 г измельченного сырья (355) сушат при температуре от 100°С до 105°С в течение 2 ч.

Общая зола (2.4.16). Не более 12,0%.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте (2.8.1). Не более 1,0%.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определяют содержание эфирного масла (2.8.12, метод А). 50,0 г измельченного сырья помещают в колбу вместимостью 1000 мл, прибавляют 500 мл воды Р. В градуированную трубку помещают 0,5 мл ксилола Р. Перегонку проводят со скоростью 2—3 мл/мин в течение не менее 3 ч.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.

Пустырника листья

Leonuri folia

MOTHERWORT LEAF*

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные в фазу начала цветения и высушенные цельные или измельченные листья многолетнего травянистого растения Leonurus cardiaca L. и Leonurus quinquelobatus Gilib. (L. villosus Desf. ex D’Urv.). Содержит не менее 0,4 %

суммы иридоидов в пересчете на гарпагида ацетат (C17H26O11; М.м. 406,4) в сухом сырье.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

А. Внешние признаки (#2.8.3). Стеблевые листья или листья соцветий цельные или частично измельченные, скрученные, с обеих сторон опушенные волосками, с черешками или без них. Стеблевые листья в очертании яйцевидные или округлые, трех-пятилопастные или раздельные, длиной до 14 см, шириной до 10 см. Листья соцветий в очертании эллиптические или продолговато-ромбические, в основании яйцевидные или клиновидные, трехлопастные или ланцетовидные, зубчатые или цельнокрайние. Цвет от серо-зеленого до темно-зеленого. Запах слабый.

В. Микроскопия (#2.8.3). При просматривании листа с поверхности с обеих сторон видны клетки эпидермиса с тонкими извилистыми боковыми стенками, особенно на нижней стороне. Устьица многочисленные, расположены преимущественно на нижнем эпидермисе, окружены 3—4(реже2)околоустьичнымиклетками(аномо- цитный тип). Железки на короткой ножке с 4—6 (реже 8) радиально расположенными выделительными клетками. Волоски двух типов: многочисленные многоклеточные грубобородавчатые, расширенные в местах соединения клеток; мелкие головчатые волоски на одно-двухклеточной короткой ножке с округлой головкой, состоящей из 1—2 клеток. Видны места прикрепления многоклеточных грубобородавчатых волосков.

C. Тонкослойная хроматография (2.2.27).

Испытуемый раствор. Используют раствор А, приготовленный как указано в разделе «Количественное определение».

Пластинка: ТСХ пластинка со слоем сили-

кагеля G Р.

Подвижная фаза: хлороформ Р — метанол Р — вода Р (80:2:0,1, об/об/об).

Наносимый объем пробы: 50 мкл в виде по-

лосы.

Фронт подвижной фазы: не менее 10 см от линии старта.

Высушивание: на воздухе.

Проявление: пластинку опрыскивают раст­ вором диметиламинобензальдегида Р8. Нагре-

вают при температуре от 100°С до 105°С в течение 5 мин до проявления зон. Просматривают при дневном свете.

Результаты: на хроматограмме испытуемого раствора обнаруживается не менее трех зон фиолетово-красного цвета со значениями Rf около 0,4 (гарпагид), около 0,6 (аюгозид) и около 0,8 (гарпагида ацетат).

ИСПЫТАНИЯ (Числовые показатели)

Допустимые примеси (#2.8.2). Несырье-

вые части растения: побуревшие, почерневшие и пожелтевшие листья — не более 5 %; другие части растения (стебли, цветки) — не более 5 %. Органические примеси: не более 2 %. Минеральные примеси: не более 1 %.

Потерявмассепривысушивании(2.2.32).

Не более 13,0 %. 2,000 г измельченного сырья (2000) сушат при температуре от 100°С до

105°С.

Общая зола (2.4.16). Не более 13,0 %.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте (2.8.1). Не более 1,0 %.

Количественное определение

5,000 г измельченного сырья (250) помещают в круглодонную колбу со шлифом вместимостью 250 мл, прибавляют 80 мл смеси из спирта (40 %, об/об) Р и нагревают с обратным холодильником на водяной бане в течение 45 мин. Охлаждают и процеживают через ватный тампон в мерную колбу вместимостью 100 мл. Ватный тампон помещают в колбу с остатком сырья, прибавляют 40 мл спирта (40 %, об/об) Р и нагревают с обратным холодильником на водяной бане в течение 15 мин. Охлаждают, процеживают в ту же мерную колбу и доводят

спиртом (40 %, об/об) Р до объема 100,0 мл. 10,0 мл полученного раствора упаривают до объема около 5 мл, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 10 мл, используя воду Р, и доводят до объема 10,0 мл этим же растворителем. Полученный раствор пропускают через стеклянную колонку диаметром 10 мм,

заполненную 3 г алюминия оксида нейтрально-

го Р (раствор А).

Испытуемый раствор. К 5,0 мл раствора А прибавляют 5,0 мл раствора гидроксиламина щелочного Р3. Выдерживают в течение 5 мин,

прибавляют 10,0 мл 1 М раствора хлористоводородной кислоты, 5,0 мл раствора 10 г/л железа (III) хлорида Р в 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты и перемешивают.

Компенсационный раствор. К 5,0 мл воды Р, прибавляют 5,0 мл раствора гидроксиламина щелочного Р3, 10,0 мл 1 М раствора хлористоводородной кислоты и 5,0 мл раствора 10 г/л железа (III) хлорида Р в 0,1 М растворе хлористоводородной кислоты.

Измеряют оптическую плотность (2.2.25) испытуемого раствора при 512 нм.

Содержание суммы иридоидов в пересчете на гарпагида ацетат в процентах рассчитывают по формуле:

А×500 , m×56,03

где:

56,03 — удельный показатель поглощения продуктов реакции гарпагида ацетата;

А — оптическая плотность испытуемого раствора;

m — масса навески испытуемого сырья, г.

Хранение

В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.

Пустырника трава

Leonuri herba

MOTHERWORT

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранная в фазу начала цветения и высушенная трава многолетнего травянистого расте-

ния Leonurus cardiaca L. и Leonurus quinquelobatus Gilib. Содержит не менее 0,2 % флавоноидов

впересчете на гиперозид (С21Н20О12; М.м. 464,4)

всухом сырье или 0,3 % суммы иридоидов в

пересчете на гарпагида ацетат (C17H26O11; М.м. 406,4) в сухом сырье.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

А. Внешние признаки (#2.8.3). Верхние ча-

сти стеблей длиной до 40 см с цветками и листьями. Нижние листья трех-, пятилопастные или раздельные, кверху упрощающиеся — трехлопастные или ланцетовидные, по краю зубчатые, реже цельнокрайние, длиной до 14 см, шириной до 10 см, короткоопушенные, темно-зеленые; стебли четырехгранные, толщиной до 10 мм, полые, опушенные, серовато-зеленого цвета; цветки и бутоны собраны по 10—18 (до 20) в густые супротивные полумутовки в пазухах верхних ли-

стьев, образуя длинные прерванные колосовидные соцветия; цветки с трубчатоколокольчатой, колючей, опушенной зеленой чашечкой и двугубымрозовымгустоопушеннымвенчиком;тычинок четыре; завязь нижняя. Стебли, листья, чашечки цветков опушены волосками. Запах слабый.

В. Микроскопия (#2.8.3). При просматри-

вании листа с поверхности с обеих сторон видны клетки эпидермиса с тонкими извилистыми боковыми стенками, особенно на нижней стороне. Устьица многочисленные, расположены преимущественно на нижнем эпидермисе, окружены 3—4 (реже 2) околоустьичными клетками (аномоцитный тип). Железки на короткой ножке с 4—6 (реже 8) выделительными клетками. Волоски двух типов: многочисленные многоклеточные грубобородавчатые, расширенные в местах соединения клеток; мелкие головчатые волоски на одно-двухклеточной короткой ножке с округ­ лой головкой, состоящей из 1—2 клеток.

При просматривании сухого измельченного сырья (355) в ультрафиолетовом свете методом люминесцентной микроскопии видно, что общий фон свечения серовато-коричневый; жилки более яркие, с беловатым оттенком; волоски почти прозрачные; железки видны в виде более темных пятен на общем фоне поверхности листа. При смачивании измельченного сырья раствором­ 10 г/л

алюминия хлорида Р в 96 % спирте Р все ткани становятся очень яркими, желтыми (флавоноиды).

C. Тонкослойная хроматография

(2.2.27).

Испытуемый раствор. К 0,5 г измельчен-

ного сырья (355) прибавляют 5 мл метанола Р и нагревают в водяной бане при температуре 65°С в течение 5 мин при встряхивании. Охлаждают и фильтруют.

Раствор сравнения. 5 мг нафтола желтого

S Р и 2,0 мг каталпола Р растворяют в 5,0 мл

метанола Р.

Пластинка: ТСХ пластинка со слоем силикагеля Р.

Подвижная фаза: кислота уксусная ледяная Р — вода Р — этилацетат Р (20:20:60, об/об/об).

Наносимый объем пробы: по 20 мкл в виде полос.

Фронт подвижной фазы: не менее 10 см от линии старта.

Высушивание: на воздухе.

Проявление: пластинку опрыскивают раст­ вором диметиламинобензальдегида Р2, ис-

пользуя около 5 мл на квадратную пластинку со стороной 200 мм. Нагревают при температуре от 100°С до 105°С в течение 10 мин до проявления зон. Просматривают при дневном свете.

Результаты: ниже приведена последовательность зон хроматограмм раствора сравнения и испытуемого раствора. На хроматограмме испытуемого раствора могут обнаруживаться другие слабые зоны серовато-синего цвета.

Верх хроматографической пластинки

ИСПЫТАНИЯ (Числовые показатели)

Допустимые примеси (#2.8.2). Несырье-

вые части растения: побуревшие и почерневшие части растения — не более 7 %; стебли, в том числе отделенные при анализе, — не более 46 %. Органические примеси: не более 3 %. Минеральные примеси: не более 1 %.

Потерявмассепривысушивании(2.2.32).

Не более 13,0 %. 2,000 г измельченного сырья (2000) сушат при температуре от 100°С до

105°С.

Общая зола (2.4.16). Не более 12,0 %.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте (2.8.1). Не более 6,0 %.

Количественное определение

Определение содержания флавоноидов в пересчете на изокверцитрозид. 1,00 г измельченного сырья (355) помещают

вкруглодонную колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 1 мл раствора 5 г/л гексамети-

лентетрамина Р, 20 мл ацетона Р и 2 мл кислоты хлористоводородной Р1. Кипятят с обратным холодильником в течение 30 мин, после чего извлечение процеживают через ватный тампон в колбу. Ватный тампон помещают в круглодонную колбу с остатком сырья

идважды кипятят с обратным холодильником

втечение 10 мин, каждый раз прибавляя 20 мл ацетона Р в качестве экстрагента. Охлаждают

ипроцеживают через ватный тампон. Объединенные ацетоновые извлечения фильтруют через бумажный фильтр в мерную колбу вместимостью 100 мл, ополаскивают круглодонную колбу ацетоном Р и фильтруют через тот же фильтр, после чего промывают фильтр ацетоном Р. Объем раствора доводят до 100,0 мл ацетоном Р. 20,0 мл полученного раствора помещают в делительную воронку, прибавляют 20 мл воды Р и экстрагируют этилацетатом Р порцией 15 мл, затем еще трижды порциями по 10 мл. Этилацетатные извлечения объединяют, помещают в делительную воронку и дважды промывают водой Р порциями

по 50 мл. Органический слой фильтруют через бумажный фильтр с 10 г натрия сульфата безводного Р в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят этилацетатом Р до объема 50,0 мл (раствор А).

Испытуемый раствор. К 10,0 мл раствора А прибавляют 1 мл реактива алюминия хлори-

да Р и доводят 5 % (об/об) раствором­ кислоты уксусной ледяной Р в метаноле Р до объема

25,0 мл.

Компенсационный раствор. 10,0 мл раст-

вора А доводят 5 % (об/об) раствором­ кислоты уксусной ледяной Р в метаноле Р до объема

25,0 мл.

Через 30 мин измеряют оптическую плотность (2.2.25) испытуемого раствора при 425 нм.

Содержание флавоноидов в пересчете на гиперозид в процентах рассчитывают по формуле:

А×625 , m×500

где:

500 — удельный показатель поглощения гиперозида;

А — оптическая плотность испытуемого раствора;

m — масса навески испытуемого сырья, г.

Определение содержания суммы иридоидов в пересчете на гарпагида ацетат. 0,500 г измельченного сырья (500) помещают

вконическую колбу со шлифом вместимостью 200 мл, прибавляют 80 мл смеси из хлорофор-

ма Р и 96 % спирта Р (5:1, об/об) и встряхивают

втечение 45 мин. Фильтруют через бумажный фильтр в мерную колбу вместимостью 100 мл, избегая попадания частиц сырья на фильтр. В колбу с остатком сырья прибавляют 40 мл смеси из хлороформа Р и 96 % спирта Р (5:1,

об/об) и встряхивают в течение 30 мин. Фильтруют в ту же мерную колбу и доводят смесью из

хлороформа Р и 96 % спирта Р (5:1, об/об) до объема 100,0 мл. 20,0 мл полученного раствора помещают в круглодонную­ колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 10 мл воды Р и упаривают

ввакууме при температуре от 40°С до 50°С до водного остатка (около 8 мл). Водный раствор фильтруют через бумажный фильтр, смоченный водой Р, в мерную колбу вместимостью 10 мл. Круглодонную колбу и фильтр промывают водой Р в ту же мерную колбу и доводят до объема 10,0 мл этим же растворителем (раствор А).

Испытуемый раствор. К 5,0 мл раствора А прибавляют 5,0 мл раствора гидроксиламина щелочного Р3. Выдерживают в течение 20 мин,

прибавляют 10,0 мл 1 М раствора хлористоводородной кислоты, 5,0 мл раствора 10 г/л железа (III) хлорида Р в 0,1 М растворе хлористоводородной кислоты и перемешивают.

Компенсационный раствор. К 5,0 мл раст-

вора А прибавляют 5,0 мл воды Р, 10,0 мл 1 М

раствора хлористоводородной кислоты и

5,0 мл раствора 10 г/л железа (III) хлорида Р в 0,1 М растворе хлористоводородной кислоты.

Измеряют оптическую плотность (2.2.25) испытуемого раствора при 512 нм.

Содержание суммы иридоидов в пересчете на гарпагида ацетат в процентах рассчитывают по формуле:

А×250 , m×56,03

где:

56,03 — удельный показатель поглощения продуктов реакции гарпагида ацетата;

А — оптическая плотность испытуемого раствора;

m — масса навески испытуемого сырья, г.

Хранение

В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.

Ревеня корни

Rhei radices

RHUBARB

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные осенью или ранней весной в возрасте не менее 3 лет, очищенные от гнилых частей, отмытые от земли, разрезанные на части и высушенные корни и корневища расте-

ния Rheum paImatum L. var tanguticum Maxim. Cодержат не менее 2,2 % суммы гидроксиантраценпроизводных в пересчете на реин (С15Н8О6; М.м. 284,2) в сухом сырье или не менее 2,0 % производных антрацена в пересчете на истизин

(C14H8O4; М.м. 240,2) в сухом сырье.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

А. Внешние признаки (#2.8.3). Куски корней и корневищ различной формы длиной до 25 см, толщиной до 5 см. Крупные куски корней цилиндрические или конусовидные, слегка изогнутые, с продольно-морщинистой поверхностью. Куски корневищ встречаются редко, их поверхность поперечно-морщинистая. Цвет с поверхности темно-коричневый, на изломе — желтокоричневый или оранжево-коричневый; свежий излом зернистый, сероватый, с оранжевыми или розоватыми прожилками. Запах своеобразный.

В. Микроскопия (#2.8.3). На попереч-

ном срезе корня виден слой темно-коричневой пробки, состоящий из нескольких рядов клеток, красно-коричневый слой феллодермы, довольно узкая кора и широкая древесина. Феллодерма состоит из крупных тангентально вытянутых клеток с утолщенными стенками. Сердцевинные лучи 2—4-рядные, воронковидно расширяющиесякпериферии.Флоэмасостоитизтонкостенных

клеток, среди которых видны округлые вместилища со слизью. Линия камбия четко выражена. Древесина состоит из тонкостенных клеток паренхимы и крупных сосудов, лежащих одиночно или небольшими группами. В паренхиме коры

идревесины содержатся очень крупные друзы оксалата кальция (до 100—120 мкм) и крахмальные зерна — простые и 2—5-сложные, от 2 мкм до 40 мкм в диаметре. В измельченном сырье (355) видны: крупные скопления друз оксалата кальция, размер которых более 100 мкм,

иих обломки; сетчатые толстостенные сосуды размером более 175 мкм. Большое количество

тонкостенных клеток паренхимы. Склереиды и фибрин отсутствуют. При просмотре порошка в 50 % (об/об) растворе глицерина Р видны одиночные, округлые или группами (по 2—4) крахмальные зерна.

При просматривании поперечного среза корня без включающей жидкости в ультрафиолетовом свете методом люминесцентной микроскопии видна темная или темно-коричневая пробка; паренхима коры и древесины имеет яркое светло-голубое свечение; оболочки сосудов — голубые или зеленовато-голубые; сердцевинные лучи светятся интенсивным коричневооранжевым светом (производные антрацена).

С. Тонкослойная хроматография

(2.2.27).

Испытуемый раствор. 50 мг измельченного сырья (180) нагревают в водяной бане со смесью из 1 мл кислоты хлористоводородной Р и 30 мл

воды Р в течение 15 мин. Охлаждают и встряхивают с 25 мл эфира Р. Эфирный слой фильтруют через фильтр с натрия сульфатом безводным Р. Выпаривают эфирный слой досуха, остаток растворяют в 0,5 мл эфира Р.

Раствор сравнения. 5 мг эмодина Р раство-

ряют в 5 мл эфира Р.

Пластинка: ТСХ пластинка со слоем подхо-

дящего силикагеля Р.

Подвижная фаза: кислота муравьиная безводная Р — этилацетат Р — петролейный эфир Р (1:25:75, об/об/об).

Наносимый объем пробы: по 20 мкл в виде полос.

Фронт подвижной фазы: не менее 10 см от линии старта.

Высушивание: на воздухе.

Проявление: просматривают в ультрафиолетовом свете при длине волны 365 нм.

Результаты: ниже приведена последовательность зон хроматограмм раствора сравнения и испытуемого раствора. На хроматограмме испытуемого раствора могут обнаруживаться другие флуоресцирующие зоны.

После опрыскивания пластинки раствором­

100г/лкалиягидроксидаРвметанолеРвсезоны приобретают цвет от красного до фиолетового.

D. К 50 мг измельченного сырья (180)

прибавляют 25 мл кислоты хлористоводород-

нойразведеннойРинагреваютсмесьнаводяной бане в течение 15 мин. Охлаждают, встряхивают с 20 мл эфира Р и отбрасывают водный слой. Эфирный слой встряхивают с 10 мл раствора аммиака разведенного Р1. Водный слой приоб-

ретает цвет от красного до фиолетового.

ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)

Rheumrhaponticum. Тонкослойная хро-

матография (2.2.27).

Испытуемый раствор. К 0,2 г измельчен-

ного сырья (180) прибавляют 2 мл метанола Р и кипятят с обратным холодильником в течение 5 мин. Охлаждают и фильтруют.

Раствор сравнения. 10 мг рапонтицина Р

растворяют в 10 мл метанола Р.

Пластинка: ТСХ пластинка со слоем сили-

кагеля G Р.

Подвижная фаза: метанол Р — метиленхлорид Р (20:80, об/об).

Наносимый объем пробы: по 20 мкл в виде полос длиной 20 мм и шириной 3 мм.

Фронт подвижной фазы: не менее 12 cм от линии старта.

Высушивание: на воздухе.

Проявление: пластинку опрыскивают раст­ вором фосфорномолибденовой кислоты Р.

Результаты: на хроматограмме испытуемого раствора возле линии старта не должна обнаруживаться синяя зона, соответствующая зоне рапонтицина на хроматограмме раствора сравнения.

Допустимые примеси (#2.8.2). Несырье-

вые части растения: корни, почерневшие в изломе, — не более 5 %. Органические примеси: не более 0,5 %. Минеральные примеси: не более

0,5 %.

Потеря в массе при высушивании

(2.2.32). Не более 12,0 %. 1,000 г измельченного сырья (180) сушат при температуре от 100°С до

105°С.

Общая зола (2.4.16). Не более 12,0 %.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте (2.8.1). Не более 2,0 %.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение содержания суммы гидроксиантраценпроизводных в пересчете на реин. Испытание проводят с защитой от яркого света.

0,100 г измельченного сырья (180) помещают в колбу вместимостью 100 мл. Прибавляют 30,0 мл воды Р, перемешивают и взвешивают. Нагревают в водяной бане с обратным холодильником в течение 15 мин. Охлаждают, при-

бавляют 50 мг натрия гидрокарбоната Р, взве-

шивают и доводят водой Р до первоначальной массы. Центрифугируют. 10,0 мл надосадочной жидкости переносят в круглодонную колбу со шлифом вместимостью 100 мл. Прибавляют

20,0 мл раствора железа (III) хлорида Р1 и пе-

ремешивают. Нагревают с обратным холодильником на водяной бане в течение 20 мин, при-

бавляют 1 мл кислоты хлористоводородной Р и

нагревают еще в течение 20 мин, периодически встряхивая. Охлаждают, переносят в делительную воронку, ополаскивая колбу эфиром Р, и встряхивают с этим же растворителем три раза порциями по 25 мл. Объединяют эфирные извлечения и промывают водой Р дважды порциями по 15 мл. Эфирный слой процеживают через ватный тампон и доводят до объема 100,0 мл эфиром Р. 10,0 мл полученного раствора выпаривают на водяной бане досуха. Остаток растворяют в 10,0 мл раствора 5 г/л магния ацетата Р в метаноле Р.

Измеряют оптическую плотность (2.2.25) полученного раствора при515 нм,используя метанол Р в качестве компенсационного раствора.

Содержание суммы гидроксиантраценпроизводных в пересчете на реин в процентах рассчитывают по формуле:

А×300 , m×468

где:

468 — удельный показатель поглощения реина, рассчитанный исходя из удельного поглощения барбалоина;

А — оптическая плотность раствора;

m — масса навески испытуемого сырья, г.

Определение содержания производных антрацена в пересчете на истизин. Испыта-

ние проводят с защитой от яркого света. 0,0500 г измельченного сырья (180) помеща-

ют в колбу вместимостью 100 мл, прибавляют

7,5 мл кислоты уксусной ледяной Р и нагрева-

ют с обратным холодильником в водяной бане в течение 15 мин. Охлаждают, прибавляют 30 мл эфира Р и кипятят в водяной бане еще в течение 15 мин. Охлаждают, процеживают через ватный

тампон в делительную воронку вместимостью 300 мл и промывают 20 мл эфира Р. Ватный тампон переносят в колбу с остатком сырья, прибавляют 30 мл эфира Р и кипятят в водяной бане в течение 10 мин. Охлаждают и процеживают через ватный тампон в ту же делительную воронку. Колбу дважды ополаскивают эфиром

Рпорциями по 10 мл и процеживают через тот же ватный тампон. К объединенным извлечениям осторожно, по стенкам, прибавляют 100 мл

щелочно-аммиачного раствора Р и осторожно взбалтывают в течение 5—7 мин, охлаждая воронку под струей холодной воды. После полного расслоения прозрачный красный нижний слой не фильтруя сливают в мерную колбу вместимостью 250 мл, а эфирный слой обрабатывают порциями по 20 мл щелочно-аммиачного раст-

вора Р до прекращения окрашивания жидкости, сливают в ту же мерную колбу и доводят до объ-

ема 250,0 мл щелочно-аммиачным раст­вором Р. 25,0 мл полученного раствора помещают в коническую колбу вместимостью 100 мл и нагревают в течение 15 мин на водяной бане при перемешивании. Охлаждают. Раствор количественно переносят в мерную колбу вместимостью 25 мл и доводят водой Р до объема 25,0 мл.

Измеряют оптическую плотность (2.2.25) полученного раствора при 530 нм, используя воду

Рв качестве компенсационного раствора. Концентрацию производных антрацена в

растворе (мг/мл) в пересчете на истизин определяют по градуировочному графику.

Содержание производных антрацена в пересчете на истизин в процентах рассчитывают по формуле:

Сm×25 ,

где:

С — концентрация производных антрацена, определенная по градуировочному графику, мг/мл;

m — масса навески испытуемого сырья, г.

Построение градуировочного графика. 50,00 г кобальта хлорида Р, высушенного в

эксикаторе до постоянной массы, растворяют в 250 мл воды Р, прибавляют 1 мл кислоты хлористоводородной Р и доводят водой Р до объема 500,0 мл. Из полученного раствора готовят серию разведенных растворов (№  1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 и 9), содержащих кобальта хлорида

(СоСl2·6H2O) соответственно 0,010; 0,015; 0,020; 0,025; 0,030; 0,035; 0,040; 0,045; 0,050 г в 1 мл,

и измеряют оптические плотности (2.2.25) полученных растворов при 530 нм, используя воду Р в качестве компенсационного раствора. Для построения градуировочного графика на оси абсцисс откладывают концентрацию раствора, а на оси ординат — их оптическую плотность. При этом концентрации растворов кобальта хлорида выражают в соответствующих концентрациях

производных антрацена (истизина), пользуясь таблицей 1.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.

Репешка трава

Agrimoniae herba

AGRIMONY

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные во время цветения и высушенные верхушки побегов Agrimonia eupatoria L. Содержит не менее 2,0 % дубильных веществ в пересчете на пирогаллол (С6Н603; М.м. 126,1) в сухом сырье.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

A.Внешние признаки (#2.8.3). Стебель — зеленый или чаще красноватый, цилиндрический и редко разветвленный, покрыт длинными поднятыми или спутанными волосками. Листья состоят из 3 или 6 супротивных пар листочков с двумя или тремя меньшими листочками между ними. Край листовой пластинки от глубоко зубчатой до зубчатой формы. Листья с верхней стороны темно-зеленые, с нижней — сероватые, с плотным жилкованием. Цветки маленькие, формируют верхушечный колос; пентамерные, расположены в пазухах прицветников, покрытых волосками. Чашечки плотно окружены многочисленными терминальными крючковатыми отростками,которыеприсутствуютнаободецветоложа. Лепестки — свободные, желтые и опадающие. Плодовые цветоложа с глубокими бороздами и крючковатыми отростками, обычно находятся в основании соцветия.

B.Микроскопия (#2.8.3). Исследуют из-

мельченное сырье (355). Порошок от желтоватозеленого до серого цвета. Видны: изогнутые,

одноклеточные, тонко бородавчатые, иногда спиралевидные, длинные толстостенные (около 500 мкм) трихомы; фрагменты паренхимы с призмами и кластерами кристаллов оксалата кальция; фрагменты эпидермиса листа с извилистыми стенками, с нижней стороны с многочисленными устьицами в основном аномоцитного, реже анизоцитного типа; зерна пыльцы от овальнойдосубсферическойформы,стремяпорами и гладкой экзиной; фрагменты железистых трихом с многоклеточными ножками и сферическими одноклеточными или четырехклеточными головками; группы волокон и спиралевидные сосуды стебля.

C. Тонкослойная хроматография (2.2.27).

Испытуемый раствор. К 2,0 г измельченно-

го сырья (355) прибавляют 20 мл метанола Р, нагревают при температуре 40°С в течение 10 мин при перемешивании. Фильтруют.

Раствор сравнения. 1,0 мг рутина Р и 1,0 мг изокверцитрозида Р растворяют в 2 мл метанола Р.

Пластинка: ТСХ пластинка со слоем силикагеля Р.

Подвижная фаза: кислота муравьиная безводная Р — вода Р — этилацетат Р (10:10:80, об/об/об).

Наносимый объем пробы: по 10 мкл в виде полос.

Фронт подвижной фазы: не менее 12 см от линии старта.

Высушивание: при температуре от 100°С до

105°С.

Проявление: горячую пластинку опрыскива-

ют раствором­ 10 г/л дифенилборной кислоты аминоэтилового эфира Р в метаноле Р и затем раствором­ 50 г/л макрогола 400 Р в метаноле Р.

Пластинку высушивают на воздухе в течение 30 мин и просматривают в ультрафиолетовом свете при длине волны 365 нм.

Результаты: ниже приведена последовательность зон хроматограмм раствора сравнения и испытуемого раствора.

Верх хроматографической пластинки