2007_-Byelorussian_Pharmacopoeia_Volume_2

и 2 мл кислоты хлористоводородной Р и нагре-

вают в водяной бане в течение 15 мин. Охлаждают и встряхивают с 40 мл эфира Р. Эфирный слой отделяют, высушивают натрия сульфатом безводным Р. 5 мл полученного раствора выпаривают досуха и к охлажденному остатку при-

бавляют 5 мл раствора аммиака разведенного Р1. Проявляется желтое или оранжевое окрашивание. Нагревают на водяной бане в течение 2 мин. Появляется красновато-фиолетовое окрашивание.

ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)

Допустимые примеси (#2.8.2). Сумма до-

пустимых примесей: не более 1 %.

Потерявмассепривысушивании(2.2.32).

Не более 12,0 %. 1,000 г измельченного сырья (355) сушат при температуре от 100°С до 105°С в течение 2 ч.

Общая зола (2.4.16). Не более 9,0 %.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте (2.8.1). Не более 2,0 %.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Испытание проводят с защитой от яркого света.

0,150 г измельченного сырья (180) помещают в колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 30,0 мл воды Р, перемешивают. Взвешивают и нагревают с обратным холодильником в водяной баневтечение15мин.Охлаждают,взвешиваюти доводят до первоначальной массы водой Р. Центрифугируют. 20,0 мл надосадочной жидкости помещают в делительную воронку вместимостью

150 мл. Прибавляют 0,1 мл кислоты хлористоводородной разведенной Р и трижды встряхива-

ют с хлороформом Р порциями по 15 мл. Хлороформный слой отбрасывают. К водному­ слою прибавляют 0,10 г натрия гидрокарбоната Р

ивстряхивают в течение 3 мин. Центрифугируют. 10,0 мл надосадочной жидкости помещают в круглодонную колбу со шлифом вместимостью 100 мл. Прибавляют 20 мл раствора железа (III) хлорида Р1 и перемешивают. Нагревают с обратным холодильником в водяной бане в течение 20 мин. Уровень воды в бане должен быть выше уровня раствора в колбе. Прибавляют 1 мл кис-

лоты хлористоводородной Р и нагревают еще в течение 20 мин, интенсивно встряхивая до растворения осадка. Охлаждают, переливают смесь в делительную воронку и встряхивают с тремя объемами, каждый раз по 25 мл, эфира Р, предварительно использованного для ополаскивания колбы. Объединенные эфирные экстракты отмывают двумя объемами воды Р порциями по 15 мл. Переносят эфирный слой в мерную колбу

идоводят эфиром Р до объема 100,0 мл. 10,0 мл полученного раствора осторожно выпаривают досуха. Остаток растворяют в 10,0 мл раствора

5 г/л магния ацетата Р в метаноле Р.

Измеряют оптическую плотность (2.2.25) полученного раствора при515 нм,используя метанол Р в качестве компенсационного раствора.

Содержание суммы гидроксиантраценгликозидов в пересчете на сеннозид В в процентах рассчитывают по формуле:

А×300 , m×240 ,

где:

240 — удельный показатель поглощения сеннозида В;

А — оптическая плотность раствора;

m — масса навески испытуемого сырья, г.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.

Синюхи корневища с корнями

Polemonii coerulei rhizomata cum radicibus

GREAT VALERIAN ROOT*

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные ранней весной или осенью, быстро отмытые от земли и высушенные корневища с корнями многолетнего травянистого расте-

ния Polemonium coeruleum L. Содержат не менее

8,0 % суммы тритерпеновых сапонинов в пересчете на β-эсцин (М.м. 1101,2) в сухом сырье.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

A. Внешние признаки (#2.8.3). Цельные или разрезанные вдоль корневища с корнями. Корневища горизонтальные, прямые или слегка изогнутые, иногда ветвящиеся, с многочисленными придаточными корнями; длина корневищ от 0,5 см до 5 см, толщина — от 0,3 см до 2 см. Поверхность корневищ морщинистая, излом ровный или зернистый. В центре часто имеется полость вследствие разрушения сердцевины. Корни тонкие, длиной от 7 см до 35 см, толщиной 1—2 мм, мелкие, шероховатые, цилиндрические, узловатые, ломкие. Цвет корневищ с поверхности серовато-коричневый, на изломе — желтовато-белый или белый. Корни снаружи желтые, на изломе — белые. Запах слабый, своеобразный.

B. Микроскопия (#2.8.3). На поперечном срезе корневища видно, что покровная ткань состоит из 1-2 слоев клеток эпидермиса с опробковевшими оболочками. Первичная кора представленаотносительнокрупнымипаренхимными клетками с межклетниками треугольной формы. Заметно кольцо эндодермы, состоящее из тонкостенных тангентально-вытянутых клеток. Во вторичной коре находятся участки флоэмы с неясными границами; паренхима коры содержит

простые и сложные крахмальные зерна. Камбий слабо выражен. Сердцевинные лучи однодвухрядные. В древесине сосуды располагаются одиночно или радиальными группами. Сердцевина состоит из крупных паренхимных клеток, заполненных крахмалом.

На поперечном срезе корня видна покровная ткань, состоящая из 1-2 слоев округлых клеток эпидермиса с тонкими опробковевшими оболочками. Первичная кора состоит из крупных, тангентально-вытянутых клеток с неравномерно утолщенными оболочками. Эндодерма хорошо выражена, клеточные оболочки ее окрашиваются раствором­ Судана III в оранжево-красный цвет. Вторичная кора значительно уже первичной и состоит из мелких клеток — проводящих элементов луба и более крупных клеток лубяной паренхимы. Камбиальная зона слабо выражена. Вдревесинекорнясосудыразногодиаметрарасполагаются без особого порядка, сердцевинные лучи незаметны. В паренхимных клетках коры и древесины содержатся капли жирного масла; изредка встречаются мелкие крахмальные зерна.

С. 2,0 г измельченного сырья (5600) помещают в колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 50 мл воды Р и нагревают в водяной бане в течение 10 мин при перемешивании. Охлаждают и фильтруют. 5 мл полученного раствора сильно встряхивают. Образуется обильная и стойкая пена.

ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)

Допустимыепримеси(#2.8.2).Несырьевые части растения: корневища с остатками стеблей длиной свыше 1 см — не более 5 %; корневища, побуревшие в изломе, — не более 3 %; частицы, проходящие сквозь сито (710), — не более 5 %. Органические примеси: не более 1 %. Минеральные примеси: не более 2 %.

Потерявмассепривысушивании(2.2.32).

Не более 14,0 %. 2,000 г измельченного сырья (2000) сушат при температуре от 100°С до

105°С.

Общая зола (2.4.16). Не более 13,0 %.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте (2.8.1). Не более 1,0 %.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

1,000 г измельченного сырья (710) помещают в круглодонную колбу со шлифом вместимостью 250 мл, прибавляют 50 мл хлороформа Р и нагревают с обратным холодильником на водяной бане в течение 30 мин. Горячее хлороформное извлечение процеживают через ватный тампон, избегая попадания на него частиц сырья. Ватный тампон переносят в колбу с сырьем, прибавляют 50 мл хлороформа Р и повторно экстрагируют на водяной бане в течение 30 мин. Горячее хлороформное извлечение процеживают через ватный тампон, избегая по-

падания на него частиц сырья. Хлороформные извлечения отбрасывают. Ватный тампон помещают в колбу с сырьем, прибавляют 50 мл спирта (40 %, об/об) Р и нагревают с обратным холодильником в водяной бане в течение

30мин. Процеживают через ватный тампон, избегая попадания на него частиц сырья, в мерную колбу вместимостью 100 мл. Ватный тампон помещают в колбу с сырьем, прибавляют

50мл спирта (40 %, об/об) Р и нагревают с обратным холодильником в водяной бане в течение 30 мин. Процеживают через ватный тампон

вту же мерную колбу. Охлаждают и доводят

спиртом (40 %, об/об) Р до объема 100,0 мл. 1,0 мл полученного раствора доводят водой Р до объема 25,0 мл (раствор А).

Испытуемый раствор. 2,0 мл раствора А помещают в полипропиленовый патрон с внутренним диаметром 10 мм, заполненный 0,2 г силикагеля гексадецилсилильного для хроматографии (патрон с сорбентом предварительно выдерживают с 0,3 мл 96 % спирта Р в течение

15мин и промывают 5 мл воды Р). Промывают 5 мл воды Р со скоростью 1 мл/мин. Водный элюат отбрасывают. Через патрон дважды пропускают 96 % спирт Р порциями по 0,5 мл. Элюаты объединяют и выпаривают досуха. К остатку прибавляют 10 мл кислоты серной Р. Выдерживают при температуре 70°С в течение

60мин и охлаждают.

Компенсационный раствор. Полипропиле-

новый патрон с внутренним диаметром 10 мм, заполненный 0,2 г силикагеля гексадецилсилильного для хроматографии (патрон с сорбентом предварительно выдерживают с 0,3 мл 96 % спирта Р в течение 15 мин и промывают 5 мл воды Р), промывают 5 мл воды Р со скоростью 1 мл/мин. Водный элюат отбрасывают. Через патрон пропускают 1 мл 96 % спирта Р. Элюат выпаривают досуха. Прибавляют 10 мл кислоты серной Р. Выдерживают при температуре 70°С в течение 60 мин и охлаждают.

Измеряют оптическую плотность (2.2.25) испытуемого раствора при 321 нм.

Содержание суммы тритерпеновых сапонинов в пересчете на β-эсцин в процентах рассчитывают по формуле:

А×12500 , m×421

где:

421 — удельный показатель поглощения продукта взаимодействия β-эсцина с серной кислотой;

А — оптическая плотность испытуемого раствора;

m — масса навески испытуемого сырья, г.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15° до 25°С.

Солодки корни (Лакричный корень)

Glycyrrhizae radices (Liquiritiae radices)

LIQUORICE ROOT

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Высушенные очищенные или неочищенные от пробки, цельные или измельченные корни и подземные побеги многолетних травянистых растений Glycyrrhiza glabra L. и/или Glycyrrhiza inflata Bat. и/или Glycyrrhiza uralensis Fisch. Со-

держат не менее 6,0 % глицирризиновой кисло-

ты (C42H62O16; М.м. 823) в пересчете на сухое сырье.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

А. Внешние признаки (#2.8.3). Куски корней и подземных побегов цилиндрической формы различной длины, толщиной от 0,5 см до 5 см и более. Встречаются куски корней, переходящие в сильно разросшееся корневище толщиной до 15 см. Поверхность неочищенных корней и побегов слегка продольно-морщинистая, покрытая коричневой пробкой; очищенное сырье снаружи от светло-желтого до коричневато-желтого цвета с незначительными остатками пробки; излом светло-желтый, волокнистый. При просматриванииприувеличениивидно,чтостроениекорнейи подземных побегов беспучковое. На поперечном срезе видны многочисленные широкие сердцевинные лучи, придающие корням ясно лучистое строение, в ксилеме широкие просветы сосудов. Вдоль сердцевинных лучей часто образуются радиальные трещины. У побегов имеется небольшая сердцевина, у корней сердцевины нет.

В. Микроскопия (#2.8.3). На поперечном срезе неочищенного корня видна многослойная пробка. Под пробкой — первичная кора, состоящая из крупных тангентально-вытянутых клеток. У очищенных корней вместе с пробкой частично удалена и первичная кора. За первичной корой идет сильно развитая широкая вторичная кора. В ней хорошо заметны широкие, кнаружи иногда расширяющиеся сердцевинные лучи, чередующиеся с лубом, состоящим из ситовидных трубок, лубяных волокон и паренхимных клеток. Ситовидные трубки, кроме узкого слоя, прилегающего к камбию, сдавлены и представляют собой так называемый деформированный луб, образующийудлиненныйконус,обращенныйшироким основанием к камбию, а вытянутая вершина проходит изгибаясь между группами лубяных волокон. Лубяные волокна с сильно утолщенными стенками и малой, почти точечной полостью собраны группами и окружены кристаллоносной обкладкой. Паренхимные клетки коры и сердцевинных лучей содержат зерна крахмала — простые, округлые или яйцевидные, величиной от

2 мкм до 12 мкм, редко до 20 мкм. Древесина состоит из сосудов разного диаметра — от узкого до очень широкого, групп склеренхимных волокон с кристаллоносной обкладкой и паренхимы, содержащей крахмал. При окрашивании раст­ воромЛюголяРсердцевинныелучиипаренхима окрашиваются в синий цвет, деформированный луб не окрашивается и остается сероватым, сосуды желтые, группы волокон коры и древесины оранжевые. На продольно-радиальном срезе в коре и древесине видны длинные, сильно утолщенные склеренхимные волокна с кристаллоносной обкладкой; в древесине узкие сосуды — сетчатые, средние — со щелевидными порами и широкие — с бочковидными короткими члениками и ромбическими окаймленными порами, расположенными косыми рядами.

С. Тонкослойная хроматография

(2.2.27).

Испытуемый раствор. 0,50 г измельченно-

го сырья (180) помещают в круглодонную колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 16,0 мл воды Р, 4,0 мл кислоты хлористоводородной Р1 и на-

гревают с обратным холодильником на водяной бане в течение 30 мин. Охлаждают и фильтруют. Круглодонную колбу и фильтр сушат при температуре 105°С в течение 60 мин. Фильтр помещают в круглодонную колбу, прибавляют 20,0 мл эфира Р и нагревают с обратным холодильником в водяной бане при температуре 40°С в течение 5 мин. Охлаждают и фильтруют. Фильтрат выпаривают досуха, остаток растворяют в 5,0 мл

эфира Р.

Раствор сравнения. 5,0 мг глицирретиновой кислоты Р и 5,0 мг тимола Р растворяют в 5,0 мл эфира Р.

Пластинка: ТСХ пластинка со слоем подходящего силикагеля с флуоресцентным индикатором, имеющим максимальную интенсивность при 254 нм.

Подвижная фаза: раствор аммиака концентрированный Р — вода Р — 96 % спирт Р — этилацетат Р (1:9:25:65, об/об/об/об).

Наносимый объем пробы: по 10 мкл в виде полос.

Фронт подвижной фазы: не менее 15 см от линии старта.

Высушивание: на воздухе в течение 5 мин. Проявление А: просматривают в ультрафио-

летовом свете при длине волны 254 нм. Результаты А: на хроматограммах испыту-

емого раствора и раствора сравнения в нижней половине обнаруживаются зоны поглощения (глицирретиновая кислота).

Проявление В: пластинку опрыскивают

раствором­ анисового альдегида Р и нагревают при температуре от 100°С до 105°С в течение 5—10 мин. Просматривают при дневном свете.

Результаты В: на хроматограмме раствора сравнения в нижней половине обнаруживается зона фиолетового цвета (глицирретиновая кис-

лота) и в верхней трети — зона красного цвета (тимол). На хроматограмме испытуемого раствора в нижней половине обнаруживается зона фиолетового цвета, соответствующая зоне глицирретиновой кислоты на хроматограмме раствора сравнения; в верхней трети обнаруживается зона желтого цвета (изоликвиридигенин) ниже зоны тимола на хроматограмме раствора сравнения. На хроматограмме испытуемого раствора могут обнаруживаться и другие зоны.

ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)

Неочищеное сырье.

Допустимые примеси (#2.8.2). Несырье-

вые части растения: корни, дряблые в изломе, желто-коричневые и остатки стеблей — не более 4 %. Органические примеси: не более 1 %. Минеральные примеси: не более 1 %.

Потерявмассепривысушивании(2.2.32).

Не более 14,0 %. 2,000 г измельченного сырья (2000) сушат при температуре от 100°С до

105°С.

Общая зола (2.4.16). Не более 8,0 %.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте (2.8.1). Не более 2,5 %.

Очищеное сырье.

Допустимые примеси (#2.8.2). Несырье-

вые части растения: корни, плохо очищенные от пробки (с остатками более трех участков темнокоричневой пробки на одном куске или поперечнике более 10 мм) — не более 15 %; корни, потемневшие и побуревшие с поверхности, но светло-желтые в изломе — не более 20 %. Органические примеси: не более 0,5 %. Минеральные примеси: не более 0,5 %.

Потерявмассепривысушивании(2.2.32).

Не более 14,0 %. 2,000 г измельченного сырья (2000) сушат при температуре от 100°С до

105°С.

Общая зола (2.4.16). Не более 6,0 %.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте (2.8.1). Не более 1,0 %.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

2,000 г измельченного сырья (180) помещают в колбу вместимостью 150 мл, прибавляют

20 мл смеси из кислоты азотной Р и ацетона Р

(1:20, об/об) и встряхивают в течение 1 ч. Извлечение фильтруют в мерную колбу вместимостью 100мл.Остатоквколбепромывают10млацетона Р и фильтруют через тот же фильтр. В колбу с остатком прибавляют 20 мл ацетона Р, которым одновременно смывают остатки сырья с фильтра и кипятят с обратным холодильником на водяной бане в течение 5 мин. Извлечение фильтруют через тот же фильтр в ту же мерную колбу. Экстракцию горячим ацетоном повторяют еще два раза. Остатки сырья промывают ацетоном Р до объема жидкости в мерной колбе 100,0 мл.

Содержимое мерной колбы количественно переносят в стакан вместимостью 200 мл, ополаскивая 40 мл 96 % спирта Р. Прибавляют по кап­ лям при интенсивном перемешивании раствор аммиака концентрированный Р до появления обильного светло-желтого творожистого осадка (до значения рН от 8,3 до 8,6). Маточную жидкость вместе с осадком филтьтруют через бумажный фильтр под вакуумом. Стакан и фильтр с осадком промывают 50 мл ацетона Р порциями по 10—15 мл. Осадок с фильтром переносят в стакан, в котором производилось осаждение, прибавляют 50 мл воды Р и перемешивают. Полученный раствор количественно переносят в мерную колбу вместимостью 250 мл. Фильтр несколько раз промывают небольшими порциями воды Р, прибавляя их к раствору в мерной колбе. Доводят водой Р до объема 250,0 мл. 30,0 мл полученного раствора разводят водой Р до объема

500,0 мл.

Измеряют оптическую плотность (2.2.25) полученного раствора при 258 нм, используя воду Р в качестве компенсационного раствора.

Содержание глицирризиновой кислоты в процентах рассчитывают по формуле:

А×822×416,67 , m×11000

где:

11 000 — молярный показатель поглощения глицирризиновой кислоты;

822 — молекулярная масса глицирризиновой кислоты;

А — оптическая плотность раствора;

m — масса навески испытуемого сырья, г.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.

Сосны почки

Pini gemmae

PINE GEMMA*

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные до распускания и высушенные почкиPinussilvestrisL.Содержатнеменее3мл/кг эфирного масла в пересчете на сухое сырье.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

A. Внешние признаки (#2.8.3). Почки (уко-

роченные верхушечные побеги) длиной 1—4 см, одиночные или по несколько штук в мутовках, окружающих более крупную центральную почку, без стебля или с остатком стебля, длиной не более 3 мм. Поверхность почек покрыта сухими, спирально расположенными ланцетовидными заостренными бахромчатыми чешуйками,

склеенными между собой выступающей смолой. Цвет снаружи розовато-коричневый, в изломе зеленый или коричневый. Запах ароматный, смолистый.

B. Микроскопия (#2.8.3). При просматривании чешуи почки с поверхности видны: в центральной части — трахеиды со щелевидными порами и заостренными концами и два смоляных хода, идущих от основания чешуйки до ее верхушки; в периферической части — вытянутые паренхимные клетки, концы которых часто отогнуты к основанию чешуйки; иногда они заканчиваются свободно и образуют бахромчатость края чешуйки.

ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)

Допустимыепримеси(#2.8.2).Несырьевые части растения: хвоя — не более 0,5 %; почки со стеблем длиной более 3 мм и переросшие — не более 10 %; частицы, проходящие сквозь сито (2400), — не более 5 %. Органические примеси: не более 0,5 %. Минеральные примеси: не более

0,5 %

Потерявмассепривысушивании(2.2.32).

Не более 13,0 %. 2,000 г крупноизмельченного сырья сушат при температуре от 100°C до

105°C.

Общая зола (2.4.16). Не более 2,0 %.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определяют содержание эфирного масла (2.8.12, метод В). 20,0 г крупноизмельченного сырья (без просеивания) помещают в колбу вместимостью 1000 мл, прибавляют 400 мл воды Р в качестве жидкости для перегонки. Время перегонки 90 мин.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.

Сушеницы топяной трава

Gnaphalii uliginosi herba

MARSH CUDWEED HERB*

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранная в фазу цветения и высушенная трава с корнями однолетнего травянистого рас-

тения Gnaphalium uliginosum L. s.I. Содержит не менее 0,2 % суммы флавоноидов в пересчете на гнафалозид А в сухом сырье.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

А. Внешние признаки (#2.8.3). Цельные или частично измельченные олиственные стебли длиной до 30 см с серовато-белым войлочным опушением. Корни тонкие стержневые,

ветвистые. Стебли тонкие, цилиндрические, обычно от основания распростерто-ветвистые. Листья длиной 0,5—3,5 см, шириной 0,1—0,4 см, очередные, короткочерешковые, линейнопродолговатые, с туповатой верхушкой и выдающейся срединной жилкой. Соцветие состоит обычно из нескольких яйцевидных мелких корзинок длиной 0,3—0,4 см, плотно скученных клубочками на верхушках побегов и окруженных лучисторасходящимися листьями, превышающими клубочки соцветий. Обвертка корзинки состоит из 2-3 рядов черепитчаторасположенных темно-коричневых листочков; наружные листочки яйцевидные, при основании войлочные,

вверхней половине голые, блестящие; внутренние — продолговато-яйцевидные, заостренные, голые. Цветки мелкие, желтоватые, трубчатые, пятизубчатые. Плоды — семянки с хохолком из 10 отдельных волосков. Корни стержневые, ветвистые. Цвет зеленовато-серый. Запах слабый.

В. Микроскопия (#2.8.3). При просматри-

вании листа с поверхности видны клетки эпидермиса, с обеих сторон более или менее вытянутые по длине листа. Клетки эпидермиса верхней стороны со слегка извилистыми стенками, с нижней — сильно извилистые. Устьица крупные, овальные, погруженные, окружены 4-5 клетками эпидермиса и ориентированы по длине листа (аномоцитный тип); на нижней стороне их значительно больше. На обеих сторонах листа встречаются многочисленные простые волоски с тонкими стенками с 1—3 базальными клетками и длинной извилистой конечной клеткой. Встречаются головчатые волоски, состоящие из одноклеточной ножки и многоклеточной удлиненноовальной головки; клетки головки располагаются

водин или два ряда.

ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)

Допустимые примеси (#2.8.2). Органиче-

ские примеси: не более 2 %. Минеральные примеси: не более 2 %.

Потерявмассепривысушивании(2.2.32).

Не более 13,0 %. 3,000 г измельченного сырья (2000) сушат при температуре от 100°С до

105°С.

Общая зола (2.4.16). Не более 20,0 %.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте (2.8.1). Не более 10,0 %.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

5,000 г измельченного сырья (2000) помещают в патрон из фильтровальной бумаги и экстрагируют 96 % спиртом Р в аппарате Сокслета с рабочим объемом 150 мл на водяной бане в течение 5 ч (20—25 сливов). Извлечение выпаривают по частям досуха в водяной бане в кругло­ донной колбе вместимостью 100 мл.

К сухому остатку в колбе прибавляют 5 мл раствора 100 г/л натрия хлорида Р. Колбу на-

гревают на водяной бане в течение 2 мин, растирая осадок стеклянной палочкой до растворения. Охлаждают и количественно переносят на колонку, заполненную полиамидом для коло-

ночной хроматографии Р (1,5 г полиамида для колоночной хроматографии Р помещают в ста-

канчик вместимостью 50 мл, прибавляют 30 мл воды Р, перемешивают и выливают через воронку в колонку диаметром 1,2 см и высотой 25 см. В нижнюю часть колонки предварительно помещают небольшой ватный тампон, смоченный водой Р. Колонку заполняют при открытом кране. Элюирование проводят со скоростью 4 мл/мин, не допуская обнажения поверхности сорбента). Элюат повторно пропускают через колонку. Слив производят через воронку с ватным тампоном, предварительно смоченным водой. Колонку промывают 10 мл воды Р, затем убирают ватный тампон и промывают колонку еще 20 мл воды Р. Водный элюат отбрасывают. Флавоноиды элюируют 50 мл 96 % спирта Р со скоростью 4 мл/мин. Когда зона темно-желтого цвета (обнаруживается в ультрафиолетовом свете при длине волны 365 нм) подойдет к нижней части сорбента, элюат собирают в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят 96 % спиртом Р до объема 50,0 мл.

Испытуемый раствор. 1,0 мл извлечения доводят 96 % спиртом Р до объема 25,0 мл.

Раствор сравнения. 0,0300 г дихромата ка-

лия Р, высушенного до постоянной массы, раст-

воряют в 1000, 0 мл 0,005 М раствора серной кислоты.

Компенсационный раствор (а). 50 мл 96 %

спирта Р пропускают через колонку, заполнен-

ную полиамидом для колоночной хроматогра-

фии Р. Доводят объем элюата 96 % спиртом Р

до 50,0 мл.

Компенсационный раствор (b). 0,005 М раствор серной кислоты.

Измеряют оптическую плотность (2.2.25) испытуемого раствора и раствора сравнения при 338 нм, используя компенсационный раствор (а) и компенсационный раствор (b) соответственно.

Содержание суммы флавоноидов в пересчете на гнафалозид А в процентах рассчитывают по формуле:

A×m0 ×0,202×250×1,03 ,

A0 ×m

где:

0,202 — коэффициент пересчета дихромата калия на гнафалозид А;

1,03 — поправочный коэффициент на неполное элюирование гнафалозида А с полиамидного сорбента;

A — оптическая плотность испытуемого раствора;

ненияA0;— оптическая плотность раствора срав- m0 — масса навески дихромата калия, г;

m — масса навески испытуемого сырья, г.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.

Тимьяна трава

Thymi herba

THYME

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранная во время цветения, высушенная и обмолоченная трава Thymus vulgaris L. или Thymus zygis L. или смесь обоих видов.

Содержит:

––эфирного масла: не менее 12 мл/кг в пересчете на безводное сырье;

––тимола и карвакрола (оба C10H14O; M.м. 150,2) суммарно: не менее 40 % в эфирном масле или не менее 0,5 % летучих фенолов в пересчете на тимол (C10H14O; M.м. 150,2) в безводном сырье.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

Первая идентификация: А, В, С, D. Вторая идентификация: А, В, С.

A. Внешние признаки (#2.8.3). Листья

Thymus vulgaris обычно длиной от 4 мм до 12 мм и шириной до 3 мм; сидячие или с очень коротким черешком. Листовая пластинка жесткая, цельная, ланцетная до овальной, с отчетливо завернутыми вниз краями, опушены с обеих сторон от серого до зеленовато-серого цвета; главная жилка вдавлена с верхней стороны и сильно выступает с нижней стороны. Чашечка трубчатая зеленая, часто с фиолетовыми точками; двугубая верхняя губа изогнута назад и оканчивается тремя долями, нижняя — длиннее и имеет два опушенных зубца. После цветения чашечка закрывается своеобразной короной из длинных жестких волосков. Венчик в два раза длиннее чашечки, обычно коричневатый после сушки, слегка двугубый.

Листья Thymus zygis обычно длиной от 1,7 мм до 6,5 мм и шириной от 0,4 мм до 1,2 мм; Листовая пластинка от игольчатой до линейноланцетной, с отчетливо завернутыми вниз краями. Обе поверхности листовой пластинки от зеленого до зеленовато-серого цвета; главная жилка иногда фиолетовая; по краям, особенно у основания, с длинными белыми волосками. Высушенные цветки такие же как у Thymus vulgaris.

Запах сильный, ароматный, подобен тимолу. B. Микроскопия (#2.8.3). При просматривании листа с поверхности видны слабоизвилистые клетки эпидермиса верхней стороны, часто с четковидным утолщением и складчато-

стью кутикулы, нижней — извилистые. Устьица на верхней стороне редкие, на нижней — многочисленные, окружены двумя околоустьичными клетками, расположенными перпендикулярно устьичной щели (диацитный тип). Эфиромасличные железки круглые, состоят из 8 (реже из 12) выделительных клеток, расположенных радиально. Волоски трех типов: одно- (реже двух-) клеточные прямые с бородавчатой поверхностью, сосочковидные; у основания, на нижней стороне и по краю листа имеются двухили трехклеточные коленчато-согнутые бородавчатые волоски; по всей поверхности листа — мелкие головчатые волоски с одноклеточной овальной головкой на короткой одноклеточной ножке.

Исследуют измельченное сырье (355). Цвет от серовато-зеленого до зеленоватокоричневого. Эпидермис листьев имеет клетки с извилистыми антиклинальными стенками

счетковидными утолщениями; устьица диацитные; большое количество железок, состоящих из 12 секреторных клеток, кутикула над которыми приподнята секретом, образуя шаровидное до овального пузыревидное покрытие; железистые волоски имеют одноклеточную ножку и шаровидную до овальной головку; покровные волоски на верхней стороне листа характерны для обоих видов, имеют бородавчатые стенки, в очертании

состроконечием; бородавчатые волоски на нижней стороне могут быть: одноклеточные, прямые или слегка изогнутые, двухили трехклеточные, часто коленчато изогнутые (Thymus vulgaris); двухили трехклеточные, более или менее прямые (Thymus zygis). Фрагменты чашечки покрыты многочисленными простыми пятиили шестиклеточными волосками со слабо складчатой кутикулой. Фрагменты венчика имеют многочисленные простые волоски, часто разрушенные, и железки, состоящие из 12 секреторных клеток. Зерна пыльцы, встречающиеся относительно редко, сферические и гладкие, с шестью зародышевыми разрезоподобными порами, диаметром около 35 мкм. Thymus zygis также содержит многочисленные толстые пучки волокон главных жилок и фрагментов стеблей.

C. Тонкослойная хроматография (2.2.27).

Испытуемый раствор. К 1,0 г измельченно-

го сырья (355) прибавляют 5 мл метиленхлорида Р, встряхивают в течение 3 мин и фильтруют через бумажный фильтр с 2 г натрия сульфата безводного Р.

Раствор сравнения. 5 мг тимола Р и 10 мкл карвакрола Р растворяют в 10 мл метиленхлорида Р.

Пластинка: ТСХ пластинка со слоем сили-

кагеля F254 Р.

Подвижная фаза: метиленхлорид Р. Наносимый объем пробы: по 20 мкл в виде

полос.

Фронт подвижной фазы: не менее 15 см от линии старта.

Высушивание: на воздухе.

Проявление А: просматривают в ультрафиолетовом свете при длине волны 254 нм.

Результаты А: ниже приведена последовательность зон хроматограмм раствора сравнения и испытуемого раствора.

Верх хроматографической пластинки

Проявление В: пластинку опрыскивают

раствором­ анисового альдегида Р, расходуя

10 мл на квадратную пластинку со стороной 200 мм, и нагревают в течение 10 мин при температуре от 100°С до 105°С.

Результаты В: ниже приведена последовательность зон хроматограмм раствора сравнения и испытуемого раствора. На хроматограмме испытуемого раствора в нижней трети могут обнаруживаться и другие зоны. Интенсивность зон тимола и карвакрола зависит от вида растения.

Верх хроматографической пластинки

D. Просматривают хроматограммы, полученные в разделе «Количественное определение. Определение содержания тимола и карвакрола». Характерные пики на хроматограмме испытуемого раствора по времени удерживания соответствуют характерным пикам на хроматограмме раствора сравнения.

ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)

Допустимыепримеси(#2.8.2).Несырьевые части растения: стебли толщиной более 1 мм и длиной более 15 мм — не более 10 %; листья с длинным волосками в основании, а также слабо опушенные другие части не допускаются (Thymus serpyllum L.). Органические примеси: не более 2 %. Минеральные примеси: не более 2 %.

Вода (2.2.13). Не более 100 мл/кг. Определение проводят из 20,0 г измельченного сырья

(355).

Общая зола (2.4.16). Не более 15,0 %.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте (2.8.1). Не более 3,0 %.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение эфирного масла (2.8.12,

метод А). 30,0 г испытуемого сырья помещают в колбу вместимостью 1000 мл, прибавляют 400 мл воды Р в качестве жидкости для перегонки. Перегоняют без использования ксилола Р со скоростью 2—3 мл/мин в течение 2 ч.

Определение содержания тимола и карвакрола. Газовая хроматография (2.2.28): определение проводят методом внутренней нормализации.

Испытуемый раствор. Полученное при количественном определении эфирное масло фильтруют через бумажный фильтр с неболь-

шим количеством безводного сульфата натрия

Ри доводят гексаном Р до объема 5,0 мл, ополаскивая прибор для определения эфирного масла и фильтр с сульфатом натрия этим же растворителем.

Раствор сравнения. 0,20 г тимола Р и 50 мг карвакрола Р растворяют в гексане Р и доводят до объема 5,0 мл этим же растворителем.

Условия хроматографирования:

––колонка кварцевая капиллярная длиной 30—60 м и диаметром 0,25 мм, покрытая слоем макрогола 20 000 Р (толщина слоя 0,25 мкм);

––детектор: пламенно-ионизационный;

––газ-носитель: азот для хроматографии

Рили гелий для хроматографии Р;

––скорость газа-носителя: 1-2 мл/мин;

––деление потока: 1:100;

––объем вводимой пробы: 0,2 мкл;

––температура:

Порядок выхода пиков: тимол, карвакрол. Пригодность хроматографической систе-

мы: раствор сравнения:

––разрешение: не менее 1,5 между пиками тимола и карвакрола.

По временам удерживания компонентов раствора сравнения определяют состав испытуемого раствора. Рассчитывают содержание каждого из компонентов в процентах (пренебрегают пиком гексана).

Определение содержания летучих фенолов. Полученное при количественном определении эфирное масло, избегая попадания воды, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 50 мл с помощью спирта (90 %, об/об) Р и доводят до объема 50,0 мл этим же растворителем. К 5,0 мл полученного раствора прибавляют 40 мл спирта (90 %, об/об) Р и доводят водой Р до объема 100,0 мл. 5,0 мл полученного раствора помещают в делительную воронку,

прибавляют 45 мл воды Р, 0,5 мл раствора аммиака разведенного Р2, 1 мл раствора 20 г/л ами-

нопиразолона Р и перемешивают. Прибавляют 4 мл свежеприготовленного раствора 20 г/л калия феррицианида Р и перемешивают. Выдерживают в течение 5 минут, прибавляют 25 мл метиленхлорида Р и встряхивают. Отделяют слой метиленхлоридаипроцеживаютчерезватныйтампон, смоченный метиленхлоридом Р, в мерную колбу вместимостью 100 мл. Водный слой еще дважды встряхивают с метиленхлоридом Р, порциями по 25 мл и 10 мл, каждый раз процеживая слой метиленхлорида через ватный тампон, который затем промывают метиленхлоридом Р и доводят до объема 100,0 мл этим же растворителем.

Измеряют оптическую плотность (2.2.25) полученного раствора при 450 нм, используя метиленхлорид Р в качестве компенсационного раствора.

Содержаниелетучихфеноловвпересчетена тимол в процентах рассчитывают по формуле:

А×20000 , m×805

где:

805 — удельный показатель поглощения тимола;

А — оптическая плотность раствора;

m — масса навески испытуемого сырья, г.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.

Тмина плоды

Сarvi fructus

CARAWAY FRUIT

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Зрелые и высушенные плоды двухлетнего травянистого растения Carum carvi L. Содержат не менее 20 мл/кг эфирного масла в пересчете на безводное сырье.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

А. Внешние признаки (#2.8.3). Плод — вис-

лоплодник, состоящий из двух полуплодников (мерикарпиев), чаще распавшийся. Мерикарпий продолговатой формы, часто более или менее серповидно изогнутый, сжатый с боков, к верхушке слегка суженный, с надпестичным диском и остатком столбика. Наружная сторона мерикарпия выпуклая, внутренняя плоская. Каждый мерикарпий имеет пять сильно выступающих продольных ребрышек: три из них находятся на выпуклой стороне, два по бокам. В мерикарпии одно семя, сросшееся с околоплодником. Длина плодов от 3 мм до 7 мм, ширина от 1 мм до 1,5 мм. Цвет плодов темно-коричневый с тонкими светлыми полосками на ребрах. Запах сильный, ароматный.

В. Микроскопия (#2.8.3). На поперечном срезе мерикарпия видны: перикарпий (околоплодник) и семя. Эпидермис околоплодника (экзокарпий) состоит из одного слоя овальных клеток. В паренхиме мезокарпия видны проводящие пучки, расположенные в ребрышках. Между ребрышками расположены эфиромасличные канальцы: два на плоской стороне и четыре на выпуклой. Эндокарпий состоит из одного слоя овальных клеток, плотно сросшихся с желтокоричневыми сдавленными клетками семенной кожуры. Клетки эндосперма семени имеют утолщенные стенки и содержат алейроновые зерна, капли жирного масла и очень мелкие друзы оксалата кальция.

С. Тонкослойная хроматография (2.8.3).

Испытуемый раствор. К 0,5 г измельченно-

го сырья (710) прибавляют 5,0 мл этилацетата Р, встряхивают в течение 2—3 мин и фильтруют через бумажный фильтр с 2 г натрия сульфата безводного Р.

Раствор сравнения. 2 мкл карвона Р и 5 мкл оливкового масла Р растворяют в 1,0 мл этил­ ацетата Р.

Пластинка: ТСХ пластинка со слоем подходящего силикагеля.

Подвижная фаза: этилацетат Р — толуол Р (5:95, об/об).

Наносимый объем пробы: 10 мкл раст-

вора сравнения и 20 мкл испытуемого раствора в виде полос.

Фронт подвижной фазы: не менее 10 см от линии старта.

Высушивание: на воздухе.

Проявление А: просматривают в ультрафиолетовом свете при длине волны 254 нм.

Результаты А: на хроматограммах испытуемого раствора и раствора сравнения в центральной части обнаруживаются зоны поглощения (карвон).

Проявление В: пластинку опрыскивают

раствором­ анисового альдегида Р и нагревают при температуре от 100°С до 105°С в течение 2—4 мин. Просматривают при дневном свете.

Результаты В: ниже приведена последовательность зон хроматограмм раствора сравнения и испытуемого раствора. На хроматограмме испытуемого раствора в нижней части обнаруживаются несколько слабых зон в основном фиолетово-серого и коричневатого цвета.

Верх хроматографической пластинки

ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)

Допустимые примеси (#2.8.2). Несырье-

вые части растения: поврежденные, недоразвитые плоды тмина и другие части растения — не более 2 %. Органические примеси: не более 2 %. Минеральные примеси: не более 0,5 %.

Вода (2.2.13). Не более 100 мл/кг. Определение проводят из 10,0 г измельченного сырья

(710).

Общая зола (2.4.16). Не более 8,0 %.

Зола, нерастворимая в кислоте хлористоводородной (2.8.1). Не более 1,5 %.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определяют содержание эфирного масла (2.8.12, метод В, С). 10,0 г измельченного сырья (710) помещают в колбу вместимостью 1000 мл, прибавляют 400 мл воды Р в качестве жидкости для перегонки. Время перегонки 4 ч.

Хранение

В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.

Толокнянки листья

Uvae ursi foliа

BEARBERRY LEAF

Определение

Cобранные весной до и в начале цветения или осенью с начала созревания плодов до появления снежного покрова, высушенные листья

вечнозеленого кустарничка Arctostaphylos uvaursi (L.) Spreng. Содержат не менее 6,0 % арбутина (С12Н16О7; М.м. 272,3) в пересчете на сухое сырье.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

А. Внешние признаки (#2.8.3). Листья мелкие, с верхней стороны блестящие, темнозеленые, с нижней стороны светлее, матовые, длиной от 7 мм до 30 мм и шириной от 5 мм до 12 мм. Листовая пластинка обратнояйцевидной или удлиненно-овальной формы, с гладким, слегка завернутым к нижней стороне краем, с очень коротким черешком, на верхушке закруг­ ленная, иногда с небольшой выемкой, плотная, кожистая. Жилкование перистое, с хорошо заметным с обеих сторон листовой пластинки сетчатым рисунком. Листья с верхней стороны с ясно заметными вдавленными жилками, шероховатые на ощупь. Запах отсутствует.

В. Микроскопия (#2.8.3). Исследу-

ют измельченное сырье (355). От зеленого до зеленовато-серого или желтовато-зеленого цвета. Видны: фрагменты эпидермиса, состоящего из полигональных клеток, покрытых толстой гладкой кутикулой, с прямыми и довольно толстыми, иногда выемчатыми стенками; устьица крупные, округлые, аномоцитного типа, окруженные 5—11 клетками эпидермиса; редкие основания волосков расположены только на нижнем эпидермисе; фрагменты палисадной паренхимы с тремя или четырьмя рядами клеток неравной длины и губчатая паренхима; группы одревесневших волокон с обкладками клеток, содержащих кристаллы оксалата кальция в виде призм, их сростков и друз; редкие конические одноклеточные покровные волоски.

С. Тонкослойная хроматография

(2.2.27).

Испытуемый раствор. К 0,5 г измельченно-

го сырья (355) прибавляют 5 мл смеси из равных объемов метанола Р и воды Р, нагревают с обратным холодильником в течение 10 мин. Горячее извлечение фильтруют. Фильтр промывают смесью из равных объемов метанола Р и воды Р и доводят до объема 5 мл этим же растворителем.

Раствор сравнения. 25 мг арбутина Р, 25 мг галловой кислоты Р и 25 мг гидрохинона Р

растворяют в метаноле Р и доводят до объема 10,0 мл этим же растворителем.

Пластинка: ТСХ пластинка со слоем силикагеля G Р.

Подвижная фаза: кислота муравьиная безводная Р — вода Р — этилацетат Р (6:6:88, об/об/об).

Наносимый объем пробы: 10 мкл раствора сравнения и 20 мкл испытуемого раствора в виде полос.

Фронт подвижной фазы: не менее 15 см от линии старта.

Высушивание: при температуре от 105°С до 110°С до исчезновения запаха растворителей.

Проявление: пластинку опрыскивают раст­ вором 10 г/л дихлорхинонхлоримида P в мета-

ноле Р. Затем опрыскивают раст­вором 20 г/л

натрия­ карбоната безводного Р. Просматрива-

ют при дневном свете.

Результат: ниже приведена последовательность зон хроматограмм раствора сравнения и испытуемого раствора. На хроматограмме испытуемого раствора могут обнаруживаться

идругие зоны: две или три зоны синего цвета

инесколько зон коричневого или коричневатосерого цвета.

Верх хроматографической пластинки

ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)

Допустимые примеси (#2.8.2). Несырье-

вые части растения: другие части растения (веточки, плоды) — не более 4 %; побуревшие и потемневшие с обеих сторон листья — не более 3 %. Органические примеси: не более 0,5 %. Минеральные примеси: не более 0,5 %.

Потерявмассепривысушивании(2.2.32).

Не более 12,0 %. 2,000 г измельченного сырья (2000) сушат при температуре от 100°С до

105°С.

Общая зола (2.4.16). Не более 4,0 %.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте (2.8.1). Не более 2,0 %.

Количественное определение

0,500гизмельченногосырья(710)помещают в колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 50 мл воды Р и нагревают с обратным холодильником, поддерживая слабое кипение, в течение 30 мин. Горячее извлечение фильтруют в мерную колбу вместимостью 100 мл через бумажный фильтр, избегая попадания частиц сырья на фильтр. В колбу с сырьем повторно прибавляют 25 мл воды Р и кипятят в течение 20 мин. Горячее извлечение вместе с сырьем переносят на тот же фильтр и остаток на фильтре дважды промывают горячей водой Р порциями по 10 мл. К фильтрату прибавляют 3 мл раствора свинца (II) ацетата основного Р, перемешивают, охлаждают и доводят водой Р до объема 100,0 мл. Колбу