- •Глава 7. Вещества, экстрагируемые органическими растворителями из щелочной среды
- •7.1.Общая характеристика веществ основного характера.
- •7.2. Физико-химические свойства алкалоидов.
- •7.3. Факторы, влияющие на степень экстракции алкалоидов.
- •7.4. Общие методы анализа алкалоидов.
- •7.5. Подтверждающие методы анализа алкалоидов и синтетических азотистых оснований.
- •7.6. Количественное определение алкалоидов.
- •7.7. Классификация алкалоидов.
- •Глава 8. Химико-токсикологический анализ алкалоидов и синтетических лекарственных веществ основного характера.
- •8.1. Производные тропана.
- •8.2. Производные фенотиазина.
- •8.3. Алкалоиды, производные морфинана (фенантренизохиналина) и их синтетические аналоги.
- •8.4. Промедол.
- •8.5. Хинин.
- •8.6. Папаверин.
- •8.7. Стрихнин.
- •8.8. Эфедрин.
- •8.9. Пахикарпин.
- •8.10. Анабазин
- •8.11. Никотин.
- •8.12. Новокаин и новокаинамид.
- •Глава 9. . Тсх- скрининг лекарственных соединений
- •9.1. Общая схема обнаружения неизвестного яда.
- •Подтверждающие исследования
- •9.2. Исследования веществ кислотного и слабоосновного характера в общих системах растворителей.
- •9.4. Исследование веществ основного характера в общих системах растворителей.
- •Глава 10. Группа веществ, изолируемых из биологического материала неполярными растворителями (ядохимикаты).
- •10.1. Классификации ядохимикатов
- •10.2. Общая характеристика ядохимикатов
- •10.3. Схема систематического анализа биологических жидкостей на основные группы пестицидов
- •10.4. Схемы изолирования некоторых групп пестицидов из биологических тканей
- •10.5. Извлечение пестицидов из биологических тканей
- •10.6. Методы определения пестицидов, выделенных из биоматериала или экологических проб
- •10.7. Фосфорсодержащие пестициды. Общая характеристика, свойства, токсикологическое значение, изолирование, анализ.
- •10.8. Хлорорганические соединения. Экологические аспекты, пробоподготовка, особенности метаболизма.
- •10.9. Карбамилы.
- •10.10. Синтетические пиретроиды. Токсикологическое значение, особенности строения, изолирования и анализа
- •10.11. Полихлорированные бифенилы
- •Глава 11. Вещества, изолируемые настаиванием исследуемых объектов с водой.
- •11.1. Серная кислота.
- •11.2. Азотная кислота.
- •11.3. Хлороводородная кислота.
- •11.4. Щелочи и аммиак.
- •11.5. Соли щелочных металлов.
- •Глава 12. Вещества, требующие особых методов изолирования.
- •12.1. Фториды.
- •12.2. Кремнефториды.
- •Глава 13 вещества, определяемые непосредственно в биоматериале.
- •13.1.Отравления монооксидом углерода.
- •13.2. Методы обнаружения и количественного определения монооксида углерода.
- •Глава 14. Методы лабораторной диагностики острых отравлений.
- •14.1. Общая характеристика методов.
- •14.3. Хроматографические методы.
- •Глава 15. Анализ питьевых, сточных вод и пищевых продуктов.
- •15.1. Особенности анализа сточных вод.
- •15.2. Методы концентрирования микропримесей.
- •15.3. Отбор и консервирование проб.
- •15.4. Основные показатели качества вод.
- •15.5. Химическое и биохимическое потребление кислорода.
- •15.6. Определение металлов.
- •15.7. Определение органических веществ.
- •15.8. Анализ пищевых продуктов.
- •Литература
- •Вопросы тестового контроля знаний студентов по токсикологической химии
- •Оглавление
- •Токсикологическая химия
- •210602, Витебск, Фрунзе 27
- •210602, Витебск, Фрунзе 27
14.3. Хроматографические методы.
Хроматографические методы можно рассматривать как комбинированные (гибридные) методы, в которых разделение веществ производится методами хроматографии, а регистрация и количественное определение может осуществляться спектральными, электрохимическими и другими методами. Выбор метода хроматографического анализа зависит от свойств анализируемого вещества. В химико-токсикологическом анализе широкое применение находят газо-жидкостная (ГЖХ) и высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ). Ранее были рассмотрены примеры определения летучих и других веществ этими методами.
ГЖХ имеет некоторые преимущества перед ВЭЖХ:
- дешевле приборы;
- колонки можно приготовить в лаборатории;
- выше чувствительность, особенно в случае применения масс-спектрального детектора, ДЭЗ;
- требуется малый объем пробы.
Однако при определении веществ этим методом требуется достаточная летучесть определяемых веществ, сложная пробоподготовка, удаление не летучих примесей, приготовление безводного раствора.
Известные способы перевода не летучих веществ в летучие сложны и трудоемки. Проведение анализа при высоких температурах колонки (200 – 3000С) приводит к деструкции определяемого вещества, что является причиной ошибок.
Метод ВЭЖХ позволяет анализировать водные растворы, сокращается время анализа, быстрое установление равновесия между подвижной и неподвижной фазами, отпадают ограничения по термоустойчивости, не требуется летучесть веществ. Применение специфических и неразрушающих методов детектирования позволяет, например, снимать электронные спектры отдельных фракций.
К недостаткам ВЭЖХ можно отнести: малая чувствительность детекторов, ограниченные возможности спектрофотометрического детектора (180 – 700 нм), более дорогостоящая аппаратура и сложность заполнения колонок. ВЭЖХ- методики требуют значительных количеств высокочистых органических растворителей. Очистка растворителей в лабораториях весьма трудоемкий процесс, а очищенные растворители дорогие. Чувствительность метода определяется типом используемого детектора. Наиболее чувствительными являются флуоресцентный и МС-детекторы, наиболее универсальными – спектрофотометрический.
Вариант распределительной хроматографии с обращенной фазой наиболее часто применяется и позволяет определять большое количество веществ. В качестве подвижной фазы используется водно-органические смеси, как правило, это буферные растворы с добавкой смешивающихся с водой органических растворителей (метанол, ацетонитрил, реже - ацетон).
Предложены методики прямого ВЭЖХ – определения лекарственных веществ в биологических жидкостях после предварительного осаждения белков. В настоящее время в основном применяются обращенные фазы с «пришитыми» алкильными заместителями (С18, реже С8).
Рассмотрим использование метода ВЭЖХ на примере анализа производных барбитуровой кислоты. Анализ состоит из трех основных этапов:
Выделение барбитуратов из биологического материала.
Идентификация.
Количественное определение.
1. Выделение барбитуратов из мочи проводится методом сорбции. 50 мл мочи подкисляют до рН 2 и пропускают через колонку с активированным полимерным сорбентом Полисорб-1. Элюирование барбитуратов с колонки проводят 20 мл этилацетата. Элюат упаривают и остаток подвергают анализу методом ВЭЖХ.
2. Идентификацию производных барбитуровой кислоты осуществляют путем их разделения на микроколонке Сепарон С-18 в токе элюента (0,05 М раствора двузамещенного фосфата аммония и метанола 60:40) с использованием УФ-детектора с регистрацией поглощения 240 нм. Барбитураты элюируются из колонки в следующей последовательности: барбитал, фенобарбитал, циклобарбитал, барбамил, этаминал натрия. Для повышения надежности идентификации в момент выхода пика определяемого соединения останавливается поток элюента и производится развертка УФ спектра в диапазоне 220-340 нм.
3. Количественное определение производится методом стандартных добавок. Предел обнаружения до 110-8 г во вводимой пробе.
Метод ТСХ наряду с идентификацией веществ позволяет проводить и количественное определение: по интенсивности флуоресценции, по отражению или пропусканию пятна. Выпускаемые промышленностью приборы для количественного ТСХ – анализа пока труднодоступны ввиду высокой их стоимости.