Эталоны ответов к тестовым заданиям
Вид 1. 1.1. – б; 1.2 –в;
Вид 2. 2.1. 1-В; 2-А; 3-Б; 4-Г;
2.2.: 1-б; 2-а; 3-а; 4-б; 5-в;
2.3.: 1-А; 2-В; 3-Б; 4-Г; 5-Д;
Вид 3.3.1.- 2, 4; 3.2.- 1, 2, 3;
Вид 4.4.1. -Д (-, +, -); 4.2. - С (+, -, -).
Эталоны ответов на ситуационные задачи
Задача 1. График Лайнуивера-Берка – график двойных обратных величин (1/V против 1/S).
Отрезок
на горизонтальной оси =
Отрезок
на вертикальной оси =
Тип ингибирования неконкурентный, т.к. в присутствии ингибитора Кm (т.е. сродство фермента к субстрату ) не изменилось.
Задача 2. В присутствии ингибитора прямая прошла через ту же точку на оси ординат, тогда как отрезок на оси абсцисс, с помощью которого можно рассчитать Km уменьшился. Исходное значение Km=-1/-1 =1 ммоль/л, в присутствии ингибитора- Km=-1/-0,5=2 ммоль/л. Увеличение значения Km отражает уменьшение сродства к ферменту, что наблюдается при конкурентном ингибировании.
Задача 3. Сигмоидный характер кривой зависимости скорости ферментативной реакции от концентрации субстрата характерен для аллостерических ферментов, являющихся, как правило, олигомерными белками. S-образная форма кривой отражает кооперативное взаимодействие субъединиц при связывании субстарата. При воздействии солей ртути происходит диссоциация олигомера и высвобождается каталитически более активная субъединица, имеющая характеристики, подчиняющиеся кинетике Михаэлиса-Ментен. Подобным образом активируется и фермент протеинкиназа А, в данном случае диссоциация неактивного олигомера инициируется циклическим АМФ.
Занятие № 7. Количественное определение активности ферментов. Основные принципы энзимодиагностики и энзимотерапии.
Цель занятия освоить методы определения активности ферментов и единицы выражения активности ферментов, охарактеризовать значение определения активности ферментов для диагностики заболеваний.
|
Студент должен | |
|
знать: |
уметь: |
|
-изоферменты, мультиэнзимные комплексы; -единицы измерения активности ферментов; -условия определения активности ферментов; -основные направления медицинской энзимологии - энзимопатологию, энзимодиагностику, энзимотерапию. |
-решать ситуационные задачи по энзимопатологии и энзимодиагностики; -оценить диагностическую значимость определения активности ферментов в биологических средах. |
Содержание занятия. На данном занятии после проверки выполнения заданий по самоподготовке студентам предстоит ответить на тесты программированного контроля и вопросы преподавателя. Лабораторный практикум включает определение активности амилазы слюны, лактатдегидрогеназы и ее изоферментов в сыворотке крови.
УИРС. Обсуждение реферативных сообщений, решение ситуационных задач, исследование активности амилазы мочи.
Методические указания к самоподготовке
Для усвоения темы выполните следующие задания.
|
№№ |
Задание |
Указания к выполнению задания |
|
1 |
2 |
3 |
|
1. |
Изучите изоферменты, множественные формы ферментов и мультиферментные комплексы. |
1. Охарактеризуйте изоферменты, дайте определение терминам «изоферменты» и «множественные формы ферментов». 2. Приведите примеры ферментов, имеющих изоферментный спектр. 3. Объясните, каков биологический смысл того, что многие регуляторные ферменты имеют изоферменты. Приведите примеры. 4. Напишите, сколько изоферментов имеют лактатдегидрогеназа (ЛДГ) и креатинкиназа, щелочная фосфатаза, дайте характеристику каждому из них. 5. Объясните, какое диагностическое и прогностическое значение имеет определение изоферментного спектра ферментов сыворотки крови и мочи в клинике. 6. Дайте определение понятию «мультиферментный комплекс». 7. Приведите примеры мультиэнзимных комплексов. |
|
2. |
Изучите методы определения активности ферментов. |
1. Укажите, на каком свойстве ферментов основано определение их активности в биологических жидкостях. 2. Какими методами можно следить за превращением субстрата и образованием продуктов реакций при действии амилазы слюны и фосфатазы в сыворотки крови. 3. Напишите, что принимается за единицу каталитической активности фермента. Что такое катал, международные единицы активности? 4. Напишите, что называется числом оборота или молекулярной активностью, удельной активностью фермента. 5. В каких условиях производят измерение активности ферментов для того, чтобы скорость ферментативной реакции была пропорциональна концентрации фермента ? |
|
3. |
Изучите основные направления медицинской энзимологии. |
1.Что такое энзимопатология? Приведите примеры заболеваний, связанных с генетическими дефектами различных ферментов. 2. Приведите примеры использования ферментов в качестве лекарственных средств. 3. Что такое энзимодиагностика? Выпишите примеры ферментов (таблица), используемых в диагностике заболеваний. Что такое органоспецифичные ферменты? |
|
4. |
Изучите иммобилизованные ферменты (ИФ) |
1. Что означает термин «иммобилизованные ферменты»(ИФ)? 2. Выпишите преимущество ИФ при использовании их в практических целях. 3. Выпишите сведения о способах иммобилизации ферментов и материалах (носителях), используемых в современной практике. 4. Охарактеризуйте применение ИФ в медицине, промышленности. 5. Ознакомьтесь с принципом метода иммуноферментного анализа (ИФА), в котором ферменты, иммобилизованые на поверхности антител, используются в качестве реагентов тест-системы. |
Ферменты, наиболее широко используемые в диагностике
|
фермент |
Заболевания, при которых активность фермента повышается в крови |
|
АлАТ (аланинаминотрансфераза) АсАТ (аспартатаминотрансфераза) Амилаза Лактатдегидрогеназа
Креатинкиназа
γ-Глутамилтранспептидаза Панкреатическая липаза Кислая фосфатаза Щелочная фосфатаза (изоферменты)
Глутаматдегидрогеназа Сорбитолдегидрогеназа |
Гепатиты, инфаркт миокарда
Инфаркт миокарда, гепатиты, заболевания почек
Острый панкреатит, паротит Инфаркт миокарда (изофермент ЛДГ1), гепатиты. заболевания скелетных мышц (изоферменты ЛДГ4,.5) Инфаркт миокарда (изофермент МВ-типа), заболевания скелетных мышц (преимущественно КК- ММ), инсульт мозга (ВВ-)тип Гепатиты, цирроз, алкогольное повреждение печени Острый панкреатит, рак поджелудочной железы Карцинома предстательной железы Заболевания костей, гепатиты, желчнокаменная болезнь и др. заболевания, сопровождающиеся холестазом (задержка выделения желчи) Острые гепатиты Острые гепатиты |