6 курс / Судебная медицина / Современные_аспекты_судебно_медицинской_экспертизы_и_криминалистики

Подчеркнём, что изолированные трещины и дефекты клеток кутикулы наиболее часто встречаются при ударах плоскостью тупого предмета, реже при их повреждении ребром или углом. Трещины с дефектом или расщеплением наблюдаются при повреждениях волос ребром тупого предмета. Дефекты с расщеплением – при действии на волосы углом тупого предмета. Другие сочетания: трещины с расщеплением или изолированные трещины и расщепления – выявляются реже. Для установления наличия (или отсутствия) статистически устойчивого различия одноименных признаков при ударах плоскостью, ребром и углом использовали T–критерий Стьюдента.

Анализ результатов исследования указывает на тенденцию к статистически достоверному различию признаков повреждения кутикулы волос. Так при воздействии плоскостью и углом ТП есть различия по краям, по конфигурации дефекта, по расщеплению свободных краев клеток кутикулы с их отслоением; при воздействии плоскостью и ребром ТП – по виду повреждений свободных краев клеток кутикулы; при воздействии ребром и углом ТП – по количеству трещин на клетках кутикулы.

Результаты исследования электронограмм по бальной системе программ обработаны на персональном компьютере (пакет статистического анализа – Statgraf). По данным статистического анализа нами разработаны два уравнения КДА для дифференциальной диагностики ударной поверхности тупого металлического предмета по повреждениям клеток кутикулы.

Результаты исследования этих уравнений свидетельствуют, что 22 волоса, поврежденных плоскостью тупого предмета, имеют признаки повреждения характерные для удара плоскостью и 1 волос – признаки, характерные для удара углом тупого предмета. Из 25 волос, поврежденных ребром тупого предмета, только 10 волос имеют характерные признаки для удара ребром тупого предмета, а 15 из них – признаки, характерные для удара плоскостью тупого предмета. Из 15 волос, поврежденных углом тупого предмета, 7 волос имеют признаки повреждения сходные с признаками для удара плоскостью и 8 из них – для удара углом тупого предмета.

Точность диагностики, как показывают результаты дискриминантных уравнений, при воздействии плоскостью составляет 95,4%, при воздействии ребром – 40%, а углом – 53,3 %, что является недостаточным для идентификации ТП только по признакам повреждений клеток кутикулы методом РЭМ.

Выводы. Таким образом, вполне справедлив вывод о том, что метод РЭМ может дать возможность изучить дополнительные признаки микроповреждений волос при травме тупым предметом. Его целесообразнее применять лишь в комплексе с другими методами при повреждениях волос тупыми металлическими предметами. Самостоятельное использование РЭМ для задач дифференциации и идентификации орудия травмы по повреждениям волос исключается.

160

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЭТАКРИНОВОЙ КИСЛОТЫ В БИОЛОГИЧЕСКИХ ЖИДКОСТЯХ

М.И.Алиходжаева, М.О.Рихсибаева, М.А.Таджиев

Ташкентский фармацевтический институт

Актуальность исследования. Этакриновая кислота (Урегит) – является сильным диуретическим средством. Применяют при отеках у больных с недостаточностью кровообращения, при отеках почечного происхождения и др. В литературе описывается побочное и токсическое действие этакриновой кислоты. Его использование может сопровождаться развитием гипокалиемии

игипохлоремического алкалоза. В связи с этим, изучение этакриновой кислоты в химико-токсикологическом отношении является актуальной задачей.

Материалы и методы. Этакриновая кислота выделялась из крови следующим образом: к крови прибавляют насыщенный раствора натрия хлорида

иподкисляют концентрированной соляной кислотой до рН 2,0-3,0. Затем трижды экстрагируют диэтиловым эфиром. Объединенные органические извлечения упаривают и полученный сухой остаток растворяют в этаноле. Этаноловый раствор подвергают качественному и количественному анализу методами ТСХ и УФ-спектроскопии. Для хроматографирования в тонком слое используют систему растворителей хлороформ-бензол-2-пропанол (2:4:1) и, в качестве проявителей, УФ-облучение при 254 нм и 1% раствор калия перманганата.

Количественное содержание этакриновой кислоты, выделенной из биологической жидкости, определяли на спектрофотометре Agilent при 278 нм, используя в качестве растворителя этанол.

Для выделения этакриновой кислоты из мочи поступали следующим образом: модельную смесь биологической жидкости, содержащую определенное количество этакриновой кислоты, помещали в коническую колбу объемом 50 мл, прибавляли 2 г натрия хлорида и перемешивали до полного растворения. Добавляют 0,2 н раствора соляной кислоты для создания рН 2,0-3,0 и трижды экстрагировали диэтиловым эфиром. Эфирные извлечения объединяли и органический растворитель отгоняли. Сухой остаток растворяли в этаноле и проводили анализ, как указано выше.

Результаты исследования. Результаты проведённого нами исследования показали, что предложенные методики изолирования этакриновой кислоты из биологических жидкостей позволяют экстрагировать её из крови в количестве 74,5%, а также из модельной смеси мочи в количестве 81,7%.

Выводы. Разработаны методы изолирования этакриновой кислоты из крови и мочи. В извлечениях этакриновая кислота определена методами ТСХ

иУФ спектрофотометрии. Предлагаемые методы определения этакриновой кислоты в биологических жидкостях (крови и мочи) могут быть использованы при судебно-химической экспертизе в случаях отравления этим препаратом.

161

ОБНАРУЖЕНИЕ НОВОКАИНА И ПАРА-АМИНОБЕНЗОЙНОЙ КИСЛОТЫ МЕТОДОМ УФ-СПЕКТРОСКОПИИ

З.К.Садыков, И.Г.Ахмеджанов, Л.Т. Икрамов

Ташкентский фармацевтический институт Главное бюро СМЭ

Актуальность. Одной из проблем химико-токсикологического анализа является изолирование, обнаружение и определение ядовитых и сильнодействующих веществ при исследовании внутренних органов и биологических жидкостей.

Поскольку при отравлениях новокаином морфологические и гистологические изменения внутренних органов нехарактерны, для диагностики отравлений решающее значение имеют результаты идентификации и количественного определения новокаина и его метаболитов – ПАБК и диэтиламиноэтанола – в органах человека.

Учитывая широкое применение новокаина в медицинской практике и возможную токсичность для людей, а также недостаточно полную разработку методов его выделения, идентификации и количественного определения в объектах биологического происхождения, изучение новокаина и его метаболитов (ПАБК и диэтиламиноэтанола) в химико-токсикологическом отношении является одной из актуальных задач современной токсикологической (судебной) химии.

Спектроскопия в УФ-области спектра получила широкое распространение в анализе различных органических веществ благодаря высокой чувствительности, надежности, простоте и доступности. В литературных источниках имеются сведения в ряде случаев недостаточные, а иногда и противоречивые, о максимумах светопоглощения этанольных растворов новокаина и ПАБК и о значениях их удельных коэффициентов светопоглощения. По некоторым данным удельный коэффициент светопоглощения этанольного раствора новокаина при длине волны 300 нм равен 800, при 225 нм – 230. Удельный коэффициент светопоглощения этанольного раствора ПАБК при длине волны 290 нм равен 1200, при 221 нм – 540. В других источниках указано значение удельного коэффициента светопоглощения этанольного раствора ПАБК лишь при длине волны 290 нм, равное 1260.

В связи с этим мы поставили перед собой задачу проверить данные, приведенные в литературе, по максимумам светопоглощения новокаина и ПАБК в различных растворителях, а также сведения о величине удельного коэффициента светопоглощения и, исходя из полученных результатов, предложить методику обнаружения и количественного определения новокаина и ПАБК в биологическом материале методом УФ-спектроскопии.

Материалы и методы. Мы снимали спектры поглощения новокаина и ПАБК в различных растворителях, используя спектрофотометр СФ-46, в диапазоне длин волн 210-320 нм в кюветах с рабочей длиной 1 см. В качестве раствора сравнения служил чистый растворитель.

162

Для новокаина и ПАБК использовали следующие растворители: дистиллированная вода, 0,1 н раствор соляной кислоты, этанол. При снятии спектров поглощения новокаина было установлено, что этанольный раствор новокаина имеет два максимума светопоглощения при длинах волн 221 и 295 нм, водный раствор – два максимума при длинах волн 221 и 291 нм, а раствор в 0,1 н соляной кислоте – два максимума светопоглощения при длинах волн

225 и 270 нм.

Результаты исследования. Изучение спектра поглощения ПАБК в различных растворителях показало, что этанольный раствор имеет два максимума поглощения при длинах волн 222 нм, водный раствор – один максимум светопоглощения при длине волны 265 нм, а раствор в 0,1 н соляной кислоте имеет два максимума поглощения при длинах волн 225 и 270 нм.

Выводы. Таким образом, в результате проведенного исследования мы выяснили, что для химико-токсикологического исследования новокаина и ПАБК при анализе различных объектов могут быть использованы спектральные характеристики обоих веществ, значения максимумов поглощения которых в УФ-области спектра значительно различаются в испытанных растворителях. Для количественного определения, исходя из полученных данных, целесообразно проводить УФ-спектрофотометрию для новокаина при длине волны 295 нм и для ПАБК – при 290 нм. При этих длинах волн наблюдается наибольшее молярное поглощение (23502,6 для новокаина, 17469,60 – для ПАБК).

ПРИМЕНЕНИЕ МЕТОДА КАПИЛЛЯРНОГО ЭЛЕКТРОФОРЕЗА ПРИ ИССЛЕДОВАНИИ НЕКОТОРЫХ НАРКОТИЧЕСКИХ СРЕДСТВ

М.У.Абдуллаева, Т.Х.Халиков, Р.К.Ахмедова, Л.В.Захарова

Республиканский центр судебной экспертизы имени Х.Сулеймановой

В последнее десятилетие наблюдается колоссальный рост не только производства и предложения незаконных наркотических средств, что отражается в их огромных и всевозрастающих количествах, изымаемых национальными и международными органами, но и масштабов злоупотребления наркотическими средствами, то есть незаконного спроса на наркотики. Вследствие изобретательности незаконных производителей и распространителей, на черном рынке, наряду с традиционными наркотиками, такими как опиаты, продукты каннабиса, неожиданно появляются новые фальсифицированные полусинтетические и синтетические наркотические средства или их комбинации (кокаин, амфетамин, метамфетамин и родственные соединения), что требует быстрых и адекватных действий судебных химиковтоксикологов. Кроме того, если раньше достаточно было провести анализ на качественном уровне, то теперь требуется представлять надежные как качественные, так и количественные результаты. При этом, для получения неопровержимых доказательств в раскрытии преступлений, для повышения науч-

163

ной обоснованности и доказательственной значимости экспертных заключений, необходимо использовать более чувствительные, точные и специфические методы анализа, основанные на новых технологиях с использованием последних достижений науки и техники.

До недавнего времени в РЦСЭ при исследовании наркотических средств применялись методы тонкослойной и газожидкостной хроматографии, хромато-масс-спектрметрии, ИК-спектроскопии.

Пополнение приборной базы Центра прибором для капиллярного электрофореза фирмы Аgilent Tecnologies позволило экспертам, наряду с указанными методами, использовать при исследовании наркотических средств метод капиллярного электрофореза.

Капиллярный электрофорез – новый высокоэффективный метод разделения и анализа компонентов сложных смесей. При анализе этим методом пробу небольшого объема вводят в кварцевый капилляр, заполненный электролитом. К капилляру прикладывают напряжение от 5 до 30 кВ. Под действием электрического поля компоненты пробы начинают двигаться по капилляру с разной скоростью, зависящей от их структуры, заряда и молекулярной массы, и, соответственно, в разное время достигают детектора.

Полученная электрофореграмма представляет собой последовательность пиков, по которым, как и в хроматограмме, можно идентифицировать и количественно определить конкретное соединение.

Исследование стандартных образцов таких наркотических средств как ацетилдигидрокодеин, амфетамин, бупренорфин, катин, кокаин, эфедрон, метамфетамин, метаквалон, метадон, этонитазен проводили на приборе Аgilent HPCE. Для этого применили метод “Drug.M”, с условиями: размеры капилляра – 50 мкм i.d., l=8,5 cm, L=64.5, температура – 200С, напряжение отрицательное -25 kV, введение образца –200 мbar, буфер- 8,5 mМ КН2РО4 + 8,5 mM borate +85 mМ SDS при pH=7, на длине волны 210/15 nm. Подготовка пробы к анализу осуществлялась экстрагированием исследуемых образцов этиловым спиртом (0,01 %-раствор).

Анализ полученных в этих условиях электрофореграмм свидетельствует о том, что все исследованные вещества проявляются на электрофореграммах в виде индивидуальных пиков, со стабильным показателем времен миграции, которые также имеют характерные УФ-спектры.

Результаты обработки данных и УФ-спектров суммированы в таблице.

164

Таблица.

Спектрально-электрофоретические характеристики изученных наркотических средств

Таким образом, апробированная методика капиллярного электрофореза для криминалистического исследования ряда полусинтетических и синтетических наркотических средств позволяет идентифицировать, а также количественно определять их содержание в исследуемых образцах.

АНАЛИЗ ГАЛОПЕРИДОЛА МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

М. А.Таджиев, У. К.Жипсыбаева

Ташкентский фармацевтический инситут

Актуальность исследования. Галоперидол представляет собой микрокристаллический порошок, растворим в спирте, нерастворим в воде. Галоперидол обладает выраженным противорвотным и потенцирующим свойствами, является эффективным средством для купирования разного рода возбуждения, особенно при маниакальных состояниях, остром бреде. Галоперидол в судебно–химическом отношении изучен мало. Исходя из вышеуказанного и того, что галоперидол является токсикологически важным вешеством, разработка хроматографического метода его обнаружения является актуальной.

Материалы и методы исследования. С целью осуществления хромато-

графического метода проводилось подбирание систем органических растворителей, проявителей и определение чувствительности этих реактивов к галоперидолу. При проведении хроматографического процесса использовались пластинки “Силуфоль” и пластинки с закрепленным слоем силикагеля марки ЛС 5/40 (ЧССР), содержащие 13% гипса, а также высокоэффективные хрома-

165

тографические пластинки. В качестве подвижных фаз были использованы системы нескольких органических растворителей. Для воспроизведения опытов каплю спиртового раствора (50 мкг галоперидола) наносили на стартовую линию хроматографических пластинок и подсушивали в потоке тёплого воздуха, затем вносили в камеру для хроматографирования, предварительно насышенную в течение 30 минут соответствующие системой. Камеру плотно закрывали крышкой, хроматографировали до тех пор пока жидкость поднималься по слою сорбента до высоты 10 см выше линии старта. Затем пластинку внимали из камеры, подсушивали на воздухе. Пятно препарата детектировали различными способами.

Результаты исследования. С целью обнаружения пятен галоперидола использовали УФ-лучи, а также реактив Драгендорфа. На месте локализации препарата отмечалась светло-фиолетовая флюоресценция, а в случае реактива Драгендорфа желтое пятно. Rf галоперидола при хроматографировании на тонком слое силикагеля составляет 0,27, ВЭТСХ – 0,30, на пластинке “Силуфоль” – 0,32.

Для выбора наиболее подходящих хроматографических систем использовали различные органические растворители и их смеси. Анализ полученных результатов показал, что самой подходящей для ТСХ-анализа галоперидола оказалось смесь растворителей, состоящая из бензола-этанола- диэтиламина в соотношении (9:1:1).

Выводы. На основании проведенных исследований нами подобраны оптимальные условия для хроматографического метода исследования галоперидола.

СУД-КИМЁ АМАЛИЁТИДА ПЕШОБ ТАРКИБИДАГИ ЛИДОКАИН ТАҲЛИЛИНИ АМАЛГА ОШИРИШ

М.А.Тожиев, М.К.Муслимов, Х.А.Нишонова, У.Тошматов, Т.Мирхаитов

Тошкент фармацевтика институти

Тиббиётда кучли маҳаллий оғриқ қолдирувчи дори воситаси сифатида лидокаин кенг қўлланиб келинмоқда. Лидокаин тез таъсир қилувчи, чуқур давомли оғриқ қолдириш хусусиятига эга бўлиб, асосан 1% – 10,0 ва 20,0, 2%

– 2,0 ва 10,0 ҳамда 10% – 2,0 эритмалари ишлаб чиқрилмоқда.

Ишнинг долзарблиги. Тиббиёт кенг қўлланиб келишига қарамасдан кейинги вақтда суд-кимё амалиётида лидокаин билан заҳарланиш холатлари учраб турибди. Улардан бири Тошкент вилояти суд-тиббиёт экспертизасига юборилган далолатномага асосан Бўстонлиқ туманида “Ш” исмли 1976 йилда туғилган бемор бурун бўшлиғини жарроҳлик жараёнини ўтказиш учун 15 мл лидокаин эритмасидан юборилган. Бир неча дақиқадан сўнг, беморда клиник шок бошланган. Кўрсатилган тиббий ёрдамга қарамасдан фуқорани қутқариб қолиш имконияти бўлмаган. Суд экспертизасининг йўлланмасига асосан суд-

166

кимё лабораториясида мурданинг пешобини кимёвий таҳлили амалга оширилди.

Материал ва усуллар: 50 мл хажмли ажратгич варонкасига 10 мл пешоб ўлчаб олиниб, маълум вақтдан кейин 10 мл хлороформ ёрдамида икки маротаба чайқатиб олинди. Ҳар бир хлороформли ажратмани сувли қатламдан ажратиб алоҳида колбага ўтказилди. Сўнгра 5 г сувсиз натрий сульфат сақлаган фильтр орқали қуруқ чинни косачага фильтрлаб олинди. Хлороформли эритмани қуруқ қолдиқ қолгунча учририлиб, қолдиқни 5 мл этил спиртида эритилиб, лидокаинга таҳлил усуллари олиб борилади.

1. Юпқа қатлам хроматографик усулида силикагел сақлаган хроматографик пластинкада амалга оширилди. Жараённи олиб боришда органик эритувчилар системаси диоксан-бензол-25% аммиакни (13:5:2) насбатдаги аралашмасидан фойдаланилди. Пластинкада ҳосил бўлган доғларни тасдиқлаш мақсадида УБ-нуридан фойдаланилди. Унда хроматографик пластинкада Rf = 0,64 қиймат оралиғида бинафша рангдаги доғни кўриниши лидокаинни тасдиқлашга далолат берди.

Газ хроматографик усулда таҳлилни амалга ошириш. Буни бажариш учун асосан органик моддаларни аланга ёрдамида аниқлайдиган хроматограф Цвет-500 дан фойдаланилди. Унда асосан сорбент сифатида Хроматон N-AW HMDS кукунидан (0,25-0,30 мм) ва қўзғалмас суюқ фаза сифатида 5% SE-30 сорбентларини 100 х 0,3 см ўлчамли шишали колонкага жойлаштирилган. Колонкани ҳарорати 1900С, инжекторни харорати 2300С ва детокторни ҳарорати 2300С сақлаган холатда, қўзғалувчи фаза сифатида соф азотдан тезлиги 30 мл/дақ ҳамда водородни, 30 мл/дақ кислород газини 400 мл/дақ тезлигини сақлаган ҳолда ва диаграмма лентасини тезлиги 240 мм/соатга тўғри келадиган шароитда амалга оширилди. Таҳлил учун юборилган текширилувчи намунанинг хажми 2,5 мкл ташкил этди.

Тажриба учун лидокаинни тасдиқлашда солиштирувчи эритма сифатида 1 мл 1% новакаинни спиртли эритмасидан фойдаланилди. Бажарилган таҳлил натижаларига асосан лидокаин 2 дақиқа ва стандарт сифатида қўлланилган новакаин 8 дақиқа оралиғида аниқ хроматографик чўққиларни ҳосил бўлиши асосида лидокаинни тасдиқлаб олишга эришилди.

Хулоса: Суд-кимё амалиётида пешоб таркибидан лидокаинни таҳлилини олиб боришда юпқа қатлам ҳамда газ-суюқлик хроматография усулларида таҳлил олиб борилди. Юпқа қатлам хроматографик усулда органик эритувчилар системаси диоксан-бензол-25% аммиакни 13:5:2 нисбатдаги эритмаси ёрдамида Rf = 0,64 қиймат оралиғида аниқлашга эришилди. Газсуюқлик хроматографик усулда лидокаинни 2 дақиқа оралиғида тасдиқлаб олинди.

167

ОБНАРУЖЕНИЕ ДИАКАРБА МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

М.И.Алиходжаева, Х.Н.Бекчанов

Ташкентский фармацевтический институт

Актуальность исследования. Диакарб (ацетозоламид) обладает преимущественным действием на карбоангидразу, вызывая угнетение активности фермента. В результате этого рН мочи повышается, уменьшается щелочной резерв крови и может развиться ацидоз. Ацетозоламид в химикотоксикологическом отношении не изучен. Поэтому разработка методов обнаружения и определения диакрба, пригодных для исследования биологических объектов является актуальной задачей.

Материалы и методы. Анализ диакарба проводили на жидкостном хроматографе высокого давления фирмы Agilent Technologies модели Agilent 1100 Series, снабженном спектрофотометрическим детектором переменной длиной волны и инжектором типа Rheodyne. Детектирование проводили при 270 нм. Хроматографическая колонка размером 4,6х150 мм, заполненная сорбентом Zorbax Eclipse ХDВ С-18, размером частиц 3,5 мкм, той же фирмы. Мобильная фаза представляет собой дегазированную смесь ацетонитрила и 1% раствора уксусной кислоты (30:70 объем/объем), скорость потока элюента 0,75 мл/мин. Температура колонки комнатная.

Анализ элюирования проводили в условиях изократического режима. Идентификацию диакарба (ацетозоламида) проводили сравнением по временам удерживания cтандартных и испытуемых образцов. Предварительная оценка разрешающей способности колонки проводилась с использованием модельной смеси исследуемого вещества с мобильной фазой. Смесь готовили, взвешивая на аналитических весах 10 мг ацетозоламида и растворяя его в 10 мл смеси ацетонитрила и 1% раствора уксусной кислоты (30:70). Концентрация ацетозоламида составило по 1 мкг/мкл. Разработанные условия анализа использовали для идентификации и количественного определения диакарба из крови.

Результаты исследования. В результате хроматографирования был подобран оптимальный вариант для качественного и количественного определения ацетозоламида, действуюшего компонента лекарственного препарата диакарб, где время удерживания ацетозоламида составляет 1,77 минуты.

Выводы. Таким образом, на основании проведенных исследований, нами подобраны условия для обнаружения диакрба в лекарственных средствах, а также в биологических жидкостях и показана возможность анализа их с применением изократического режима ВЭЖХ. Эти данные могут быть использованы для стандартизации и контроля качества лекарственного препарата диуретического действия, диакарба, а также для решения вопросов су- дебно-химической экспертизы в случае отравления диакарбом.

168

БИОЛОГИК ОБЪЕКТ ТАРКИБИДАГИ ГЕКСАМИДИННИ ТАҲЛИЛ УСУЛИНИ ЎРГАНИШ

Ф.С.Жалилов, М.А.Тожиев

Тошкент фармацевтика институти

Ишнинг долзарблиги: Гексамидин (пиримидон) кенг миқёсида тиббиёт амалиётида тутқаноққа қарши дори сифатида қўлланилади. Гексамидиннинг қондаги дозаси 8 мкг/мл дан ошса заҳарловчи таъсир кўрсатади, унинг летал дозаси эса 5,0 г. Бу дори моддасини кўп миқдорда ва узоқ вақт мобайнида қўлланилишида бош айланиши, бош оғриши, руҳий ўзгаришлар, кўнгил айниши, қусиш, лимфоцитоз ва лейкопения ҳолатлари рўй бериши натижасида тиббиёт амалиётида заҳарланиш ҳолатлари кузатилиб турибди.

Суд-кимё амалиётида гексамидинни биологик объект таркибидан ажратиб олиш усуллари кам ўрганилганлигини инобатга олиб, уни биологик объект таркибидан ажратиб олиш усулларини ўрганиш ва сезгир таҳлил усулини яратишни мақсад қилиб олинди.

Материал ва усуллар: 100 г биологик объект (жигар) (50 мг гексамидиннинг суъний аралашмасидан) олиб, устига 0,02 н сульфат кислотадан ойна қатлам ҳосил бўлгунча солиб, шиша таёқча билан аралаштириб, рН шароитини 2,5 дан кам бўлса, 20% ли сульфат кислота билан 2,5 га келтириб олинди. Аралашмани икки соатга вақти-вақти билан аралаштирилган ҳолда қўйиб қўйилди ва аралашма дока орқали сузиб олинди. Бу жараён яна икки маротоба такрорланди. Олинган кислотали муҳитдаги ажратмалар бирлаштирилиб, 3000 ай/дақ тезликда центрифугаланди ва центрифугат алоҳида колбага қуйиб олинди. Чўкмани 30 мл 0,02 н сульфат кислота билан рН=2,5 шароитда икки соатга қўйилиб, центрифугаланди. Ажратиб олинган эритмалар бирлаштирилиб, сўнгра кристаллик аммоний сульфатдан тўйингунча тўйинтириб, 1-2 соатга қолдирилди. Ҳосил бўлган чўкмани центрифугалаб, центрифугат (рН=2,5 сақлаган ҳолда) икки маротаба 40 мл ва бир марта 20 мл хлороформ билан экстракция қилиб олинди. Ҳар бир хлороформли эритмалар бирлаштирилиб, хлороформни қуруқ қолдиқ қолгунча порлатилди. Қолдиқни 10 мл 96о этил спирти билан ювилиб, олинган спиртли эритмадан гексамидинни ЮҚХ усулида органик эритувчилар системаси хлороформ-этил спирти-бензол (1:1:4) аралашмасидан фойдаланиб Rf=0,51 қиймат оралиғида доғ ҳосил бўлиши ва УБ-спектрофотометрия усулида λ=258 нм тўлқин узунлигида юқори нур ютиш хусусиятига асосланган ҳолда сифат таҳлили амалга оширилди.

Хулоса: Биологик объект (жигар) таркибидан гексамидинни ажратиб олиш усули ўрганилди ва ЮҚХ, УБ-спектрофотометрия усулларида сифат таҳлили амалга оширилди.

169