5.2. Макроскопическая характеристика печени животных

Поскольку, по данным литературы, увеличение массы печени закономерно сопровождает ОТП вследствие отека и цитолитического процесса, нам показалось важным исследовать этот показатель в динамике эксперимента.

Масса печени животных на 2 сутки эксперимента существенно возрастала во всех группах по сравнению с нормой (р<0,05), однако при сравнении показателя между группами достоверных различий выявлено не было (табл. 5.1).

На 4 сутки эксперимента масса печени достоверно повышалась в обеих контрольных группах по сравнению с предыдущим значением (p=0,002), нормой (p=0,002) , а различия по этому показателю с основной группой также оказались значимыми (p=0,007). В то же время при сравнении массы печени крыс основной группы на 2,4,6 сутки значимых различий не установлено. Следует отметить, что масса печени у животных основной группы на 6 сутки была повышена по сравнению с нормой (p=0,02).

 

 

 

Таблица 5.1

Масса печени в динамике эксперимента

 

Норма (n=6)	№ группы	2 сутки (n=7)		4 сутки (n=7)		6 сутки (n=7)
10,6   10,1 – 11,2	1 (ОГ)	12,0   11,3 – 12,7	P1=0,006 P3=* P4=*	11,7 11,2 – 12,2	P1=0,007 P2=* P3=0,002 P4=*	11,5 10,8 –12,2	P1=0,02 P2=*
	2 (КГ 1)	11,9   11,6 – 12,2	P1=0,002 P5=*	13,1 12,7 – 13,5	P1=0,002 P2=0,002 P5=0,004	-	-
	3 (КГ 2)	11,5 11,0 - 12,0	P1=0,03	13,7 12,6 – 14,7	P1=0,002 P2=0,002	-

Примечания: значимость различий определена по критерию U (Манна-Уитни); * - значимость различий отсутствует; Р1- значимость различий показателя по сравнению с нормой; Р2- значимость различий по сравнению с предыдущим показателем в группе; Р3- значимость различий в группах 1 и 2 (те же сутки); Р4- значимость различий в группах 1 и 3 (те же сутки); Р5- значимость различий в группах 2 и 3 (те же сутки).

 

Макроскопические изменения в печени были различными в основной и контрольных группах. Так в основной группе печень плотной консистенции и по цвету близка к печени интактных крыс. В группах контроля печень была увеличена в размерах, имела рыхлую консистенцию и светлый желто-коричневый цвет со своеобразным рисунком мускатности. Рассмотрим теперь строение печени животных при ОТП в зависимости от характера лечебного воздействия.

5.3. Характеристика строения печени при световой микроскопии

При морфологическом исследовании печени животных основной и контрольных групп на 2-е сутки эксперимента с применением световой микроскопии структурных различий не выявлено. Очаги некрозов центролобулярной локализации, участки дискомплексации балочных структур, вакуолизация гепатоцитов и их липидная инфильтрация характеризовали однотипную картину токсического повреждения печени. Наиболее выраженные изменения, характерные для ОТП, были обнаружены на светооптическом уровне в центральных областях печени.

Патоморфологическая картина в печени животных на 4 сутки становилась различной в основной и контрольных группах (рис. 5.2). В печени животных основной группы отмечали умеренные гемодинамические нарушения в виде гидропической и балонной дистрофии единичных ГЦ и мононуклеарной инфильтрации таких участков. Отмечается восстановление архитектоники балок и сохранность дольчатого строения печени. Среднее значение неповрежденных паренхиматозных клеток на один некротизированный ГЦ у животных основной группы составило 7,5±0,9 и было достоверно выше (p<0,05) по сравнению с контрольными значениями (контрольная группа 1 - 3,5±0,4; контрольная группа 2 - 3,7±0,9). Размеры очагов некроза, локализованных в центре долек, сокращались, при этом сохранялась незначительная мелкокапельная жировая дистрофия печени. У животных контрольных групп наблюдалась картина выраженных деструктивных изменений. Синусоидальные капилляры расширены, в них отмечается скопление эритроцитов. Около некротически измененных ГЦ наблюдаются скопления нейтрофилов и лимфоцитов. Ядра ретикулоэндотелиальных клеток значительно увеличены в объеме и часто выступают в просвет капилляров. В ГЦ преобладали признаки прогрессирующей жировой и гидропической дистрофии, приобретающие к 5 суткам исследования тотальный характер.

 

Рис. 5.2. Структура печени при ОТП. 4-е сутки эксперимента, световая микроскопия. А - основная группа, Б - контрольная группа 1, В - контрольная группа 2. Окраска гематоксилином и эозином. Ув.10х10. 1 – балки ГЦ; 2 – вакуолизированные ГЦ; 3 – очаги соответствующие локализации липидов при окраске суданом III.

 

Для проведения морфометрического исследования весь спектр клеток печени крысы был условно разделен нами на три группы. Выделяли ГЦ без признаков повреждения и ГЦ с разной степенью вакуолизации цитоплазмы (с крупными вакуолями) и непаренхиматозные фагоцитирующие клетки (макрофаги, нейтрофильные лейкоциты, эндотелиальные клетки) - табл.5.2.

Как следует из табл. 5.2., соотношение клеточных элементов в печени животных основной и 1 контрольной групп оказалось различным. Так, в основной группе к 4 суткам эксперимента удельный вес неповрежденных ГЦ был существенно (p< 0,001) выше, а вакуолизированных – ниже (р=0,002), чем в контроле. В дальнейшем отмечено достоверное повышение (р=0,002) количества неповрежденных ГЦ в печени крыс основной группы с одновременным уменьшением (р=0,0001) числа вакуолизированных клеток.

Таблица 5.2.

Результаты количественной морфометрии печени животных по данным световой микроскопии

 

Клеточный состав	№ группы	4 сутки		5* и 6 сутки
Неповрежденные ГЦ	1	31,9 (n=25) 28,1- 35,7	P1=0,00001		46,7 (n=30) 41,1 – 52,3	P1=0,0001 P2=0,002
	2	21,5 (n=30) 16,8 – 26,3			14,7 (n=30) 12,2 – 17,3	P2=0,07
Вакуолизирован-ные ГЦ	1	3,2 (n=25) 1,8 – 4,7	P1=0,002		0,2 (n=30) 0,1 – 0,4	P1=0,0001 P2=0,0001
	2	6,6 (n=30) 5,2 – 8,0			15,2 (n=30) 13,1 – 17,4	P2=0,0001
Эндотелиальные фагоцитирующие клетки печени	1	14,4(n=25) 12,8 – 16,1	P1=*		20,9 (n=30) 17,7-24,0	P1=* P2=0,003
	2	16,8 (n=30) 14,5-19,1			21,9 (n=30) 19,6-24,2	P2=0,002

Примечание: * - морфология на 5 сутки исследована у животных 2 группы; ** - незначимые различия по критерию Манна-Уитни (p>0,1); р1 – значимость различий показателя в группе 1 по сравнению с показателем в группе 2 (5 и 6 сутки исследования); р2 - значимость различий показателя по сравнению с предыдущим в группе.

 

В группе контроля, напротив, к 5 суткам количество ГЦ с сохраненной структурой несколько снижалось, а поврежденных – существенно (р=0,0001) возрастало. Лишь в отношении пула фагоцитирующих клеток был определен однонаправленный сдвиг - количество этих элементов не имело межгрупповых различий и существенно (p<0,003) возрастало к следующему сроку исследования по сравнению с предыдущим.

Таким образом, в исследовании на светооптическом уровне нами установлены существенные различия строения печени животных опытной и контрольной групп в динамике эксперимента. Для уточнения саногенных механизмов воздействия трансплантации эмбриональной ККП было предпринято исследование на ультраструктурном уровне.