4.3.4. Агрегация тромбоцитов
Вторые сутки исследования показывали исходное существенное повышение агрегации тромбоцитов во всех группах по сравнению с нормой (р£0,004). На протяжении последующих суток у животных основной группы происходило уменьшение этого показателя до нормы, а в контроле – существенное угнетение (р£0,01).
Таким образом, клеточная метаболическая терапия предотвращала характерную для ОТП депрессию функциональной активности тромбоцитов.
Исследованные показатели системы гемостаза (за исключением гематокрита) нормализовались к 6 суткам исследования, т.е. не имели значимых различий с нормальными значениями.
Резюме
Обобщим полученные результаты. В первой серии экспериментов нами установлено существенное (р=0,0001) снижение летальности животных, получивших КТ криоконсервированной эмбриональной ККП, по сравнению с тройным контролем (введение физиологического раствора для исключения лечебного влияния инъекции, введение питательной среды с целью исключения саногенного влияния ее компонентов, КТ плацентарного детрита для исключения воздействия неспецифических биологически активных веществ).
Во второй серии экспериментов установлены закономерности изменения показателей, характеризующих белковосинтетическую функцию печени (альбумин, фибриноген), липидный (холестерин) и пигментный (билирубин, общая и прямая фракции) обмены, печеночный цитолиз в условиях индуцированной ОПН. Показано, что подкожная инъекция 2 х 106 культивированных эмбриональных клеток свиной печени способствует активации компенсаторных механизмов. Это выражается в нормализации показателей гомеостаза у животных основной группы к шестым суткам эксперимента. В группах контроля наблюдали прогрессирующие расстройства, характерные для ОПН, вызванной гепатотропным ядом.
Для выяснения процессов, происходящих в печени под влиянием клеточной терапии, рассмотрим закономерности изменения морфологической картины.
Глава 5. Структурная оценка влияния ксенотрансплантации культуры эмбриональных клеток печени
5.1. Морфологическое исследование зоны трансплантации
Для определения судьбы пересаженных клеток была выполнена световая микроскопия зоны ксенотрансплантации. Макроскопически зона трансплантации в подкожной основе представляла собой узелок ткани красно-коричневого цвета, напоминающий по размерам и форме рисовое зерно, в пленочной капсуле с мелкими капиллярами. Описанное образование обнаруживали у каждого животного основной группы, выведенного из эксперимента на 6 сутки. Микроскопически капсула имела вид гомогенной гиалинизированной пленки с единичными малодифференцированными фибробластами. По периферии этой пленки в соединительной ткани дермы определялась высокая концентрация малодифференцированных фибробластов (рис. 5.1). Обнаруживали комплексы клеток, по форме и структуре соответствующие гепатоцитам, расположенные по периферии трансплантата, без перифокальной лейкоцитарной инфильтрации. Ядра клеток без явлений кариолиза, с четкими границами. Центральная зона трансплантата была представлена зоной некроза с единичными клетками ближе к периферии. Таким образом, ксеногенные эмбриональные гепатоциты, пересаженные под кожу животного с индуцированной ОПН, частично выживают к 6 суткам после введения. Структура трансплантата соответствует классическим описаниям перенесенной ткани при свободной алло- и аутотрансплантации, что говорит о низкой иммуногенности приготовленной культуры клеток эмбриональной печени.
Рис.5.1. Структура трансплантата у крыс основной группы через 6 суток после введения культуры клеток печени. 1 - клетки соединительной ткани, 2 - слой сохранившихся гепатоцитов, 3 - центральная зона некроза. Окраска гематоксилином и эозином. А - ув.10х10; Б – ув. 10х40.