Вероятностные методы диагностики

Вероятностные методы диагностики наиболее разработаны. Они основаны на формуле Байеса:

P(Di/S) = (P(Di)*P(S/Di))/(P(S)

Пусть оцениваются два диагноза: D₁ - рак лег­кого, D₂ - пнев­мония и пусть у больного имеется комплекс симптомов S (S₁,S₂, S₃,...,S_n). Тогда по формуле Байеса:

P(D₁/S) = (P(D₁)*P(S/D₁))/P(S), P(D₂/S) = (P(D₂)*P(S/D₂))/P(S)

P(D₁/S), P(D₂/S) - вероятность данного заболева­ния при на­личии симптомокомплекса S и при не­зависимости симптомов S₁, S ₂, S ₃, …, S _I, …,S _n

В формуле Байеса кроме условной вероятности входит P(Di), которую называют АПРИОРНОЙ ВЕРОЯТНОСТЬЮ некоторого заболевания Di. Она характеризует распространенность заболева­ния в данной группе населения. Априорной она называется пото­му, что уже известна до получе­ния симптомокомплекса данного больного. Смысл ее состоит в том, что P(Di) не постоянна и зави­сит от географических, сезонных, эпидемио­логических и других факторов, которые должны быть учтены при постановке диагноза.

P(D_i) = m_i/n

m - число больных с данным заболеванием, n^! - общее число обследованных больных, P(S / Di) - называется условной вероятностью данного сим­п­томокомплекса при заболевании Di.

P(S / D_i) = P(S₁/D₁) * P(S₂/D₁) * P(S₃/D₁) * ...

где P(S₁/D₁), P(S₂/D₁), ...- условные вероятности отдельных симпто­мов, по отношению к данному диагнозу и находятся в медицинс­кой памяти, со­держащейся в ЭВМ. Они могут быть опреде­лены статистически, а медицинскую память можно представить в виде матрицы.

Знаменатель формулы представляет полную ве­роятность на­личия симптомокомплекса при всех болезнях, т.е. сумма произве­дений априор­ной ве­роятности каждой из болезней на услов­ную ве­роятность симптомокомплекса при каждой из этих болезней

P(S) = ∑[P(Di)*P(S/Di)]

Он входит в формулу Байеса для нормировки, т.е. чтобы полу­чающиеся вероятности были вы­ражены в процентах. Болезнь, имеющая наи­большую вероятность, при наличии данного симптомокомплекса и будет рассматриваться как иско­мый диагноз.

Структурные основы функционирования мембран

Важнейшие физические и физико-химические функции клетки проявляются в метаболизме и биосинтезе, в биоэнергитических процессах за­паса энергии и ее преобразовании при реализа­ции электро- и механохимических процессов, а также регулируемо­го активного и пассивного транспорта веществ с сохранением ав­тономности внутреннего устройства клетки. Для выполнения этих жизненно важных функций клетка отделена от внешней среды по­лупроницаемой плазмати­ческой мембраной. С точки зрения структуры мембрана представляет собой мат­рицу для мем­бранных ферментов, рецепторов и других компо­нентов, создающих барьерную функцию. Моле­кулы фосфолипидов состоят из полярной го­ловки (П), в состав которой входит одно из по­лярных соединений (холин, этаноламин, серии и др.) и неполярного хвоста (Г), который содер­жит глицерин, жирные кислоты, фосфорную кислоту. Фосфолипидные молекулы обладают свойством амфифильности: полярная головка гидрофильна, т.е. смачивается водой (контакти­рует с во­дой), «хвост» является гидрофобным, т.е. не смачива­ется водой («боится воды»). По форме молекулы фосфолипидов представляют сплющен­ные ци­линдры, 1/4 которых гидро­фильна, а 3/4 гидро­фобны. В водных растворах такие молекулы са­мособираются, стараясь спрятать от воды гидро­фобные хвосты, и обра­зуют двойной фосфоли­пидный слой - собственно основу мембраны. В этот слой встраиваются поверхностные (ПБ) и интегральные (ИБ) белки. Причем, поверхност­ные белки удерживаются электро­статическими силами, а интегральные - прочными гидрофоб­ны­ми взаимодействиями. За счет этих белков частично или полнос­тью осуществляются такие функции мембран, как проницае­мость, транспорт веществ, генерация биопотенциалов и др. Пере­кисное окисление при свободном радикальном процессе одной из кислых цепей фосфолипидов или отщепление ее под действием фосфолипазы, приводит к суже­нию ее хвостовой час­ти. Такие дефектные молекулы при сборке образуют не бислой, а сферические мицеллы. Оказываясь в составе мембраны, они об­разуют поры или ка­налы (К), через которые могут проникать вода и раство­ренные в ней вещества. В результате, мем­брана час­тично теряет свои барьерные свойства. Поэтому перекисное окисление и действие фос­фолипаз являются процессами, ответ­ствен­ными за повреждение мембран при ряде заболе­ваний. Из физических свойств мембраны следует отме­тить, что моле­кулы фосфолипидов испыты­вают боковое давление, обусловлен­ное поверх­ност­ным натяжением на границе вода – липид­ная фаза. Это давление в норме определяет величину плотности упа­ковки в липидном слое. При изме­нении температуры, химическо­го состава хвоста, заряда «головки», при патологи­ческих процес­сах, изменяется и плотность упаковки.

Различного вида исследования показали, что липидный бислой может находиться в двух состояниях:

1. Твердого двухмерного кристалла

2. Бимолекулярной жидкой пленки (жидкокри­сталлической).

В обоих состояниях сохраняется плотная гекса­гональная упа­ковка фосфолипидных молекул, однако плотность упаковки уменьшается при пе­реходе к жидкой фазе. Жидкое и твердое со­стоя­ние различается также по вязкости липидной фазы, раствори­мости различных веществ в ней. Будет ли состояние бислоя твердым или жидким, не вдаваясь в подробности, зависит от химиче­ского состава липидов, числа за­ряженных групп на поверхности мембраны, содержания воды и температуры. Проницаемость мембран для раз­личных веществ, работа мем­бранных фермен­тов и рецепторов непосредственно зависит от физи­ческих свойств липидной фазы биологиче­ских мембран (по­верхностного заряда и межфаз­ного скачка потенциала).

Поверхностный заряд мембраны образуется за­ряженными фосфолипидами, которые создают на поверхности мембраны, пре­имущественно от­рицательный заряд, стабилизирующий мем­брану и клеточные элементы. В связи с этим мембраны напоминают плоско-параллельный конденсатор (электростатическая емкость).

C = (εε₀S)/d

Толщина мембраны составляет (0,4 - 0,9) нм. Если е = 13, тогда величина этой емкости (0,5 - 1,3)10^-2 нм на единичной пло­щади. Вязкость мембраны на два порядка выше вязкости воды и со­ставляет (30 - 100) МПа*с. Поверхностное на­тяжение мембраны (0,03 - 1,0) нН/м. Распреде­ле­ние электрического потенциала мембраны и ее границ можно считать важным фактором, опре­деляющим ско­рость переноса веществ через мембрану.

Поскольку живая клетка, как термодинамическая система, об­менивается с окружающей средой веществом, энергией и информацией, то транс­порт веществ через мембрану является неотъем­лемым свойством существования клетки. Он обеспечивает био­энергетику клетки (синтез АТФ), формирование специальных структур внутри клетки, осуществляет действие лекарст­венных ве­ществ на цитоплазму, саму мембрану, ферментативные системы и рецепторы.

Различают два вида транспорта веществ: пас­сивный, когда ча­стицы переносятся по градиенту без затрат энергии, и активный, требующий за­трат химической энергии, которая освобождается при гидролизе АТФ.

По пути простой диффузии в клетке обеспечива­ется проницаемость мембран для 0₂ и СО₂, боль­шинства ядов и лекар­ственных веществ. Это са­мый медленный и мало управляемый процесс. Для переноса питательных веществ и необходи­мых для жизне­деятельности ионов эволюция вы­работала специальные белковые поры (ка­налы). Диффузия через поры происходит при возбуж­дении мембраны. В этом случае в ней открыва­ются специ­альные каналы, через кото­рые по гра­диенту устремляются потоки веществ и ионов.

Ряд веществ служит ионофорами - переносчи­ками катионов. К ним относится циклический антибиотик валиномицин (подвиж­ный перенос­чик). Он представляет собой нейтральную моле­кулу с высокой поляризуемостью, обра­зующую с ионами К⁺ сферические комплексы, которые снижают барьер для прохожде­ния иона. Присое­диняя ион К⁺, он транспортирует его внутрь клетки. На внутренней поверхности ионы К⁺ вы­свобождаются. Пе­реносчик возвращается к на­ружной поверхности мембраны. Да­лее цикл по­вторяется. Вторым переносчиком является гра­мицидин, который образу­ет в мембране поляр­ную пору. Транспорт, облегченный образова­нием пор, имеет эстафетный характер - пора мо­жет быть образована несколькими последова­тельно расположенными молекулами, между ко­торыми происходит передача иона. Ион может переноситься не одной, а сразу несколь­кими мо­лекулами ионофора - это коллектив­ный про­цесс.

Пассивный транспорт описывается уравнением Нернста - Планка.

Ф = -uRT(dC/dx) – ucZF(dφ/dx)

где: Ф - поток вещества,

u - подвижность иона, молекулы,

R - универсальная газовая постоянная,

Т - температура по шкале К⁰,

dC/dx - концентрационный градиент,

С - концентрация в молях,

Z - величина заряда иона,

F - число Фарадея,

dφ/dx - градиент потенциала.

В этом уравнении первое слагаемое определяет поток незаря­женных частиц, второе - заряжен­ных, знак « - » показывает, что суммарная плот­ность потока вещества при диффузии направ­лена в сторону уменьшения концентра­ции.

Для описания диффузии незаряженных частиц используют уравнение Фика:

Ф = -D(dC/dx)

В этом виде уравнение Фика определяет поток незаряженных частиц через единичную площадь в случае, если не существует перегородки (мем­браны), которая может затруднять перенос, где: D - коэффициент диффузии, dC/dx -градиент концентрации.

Для клеточной мембраны : dx = L - толщина мембраны, dC = Сi - Сe , где Сi и Сe - концентра­ция частиц внутри и снару­жи клетки. В уравне­ние Фика для клетки добавляется коэффици­ент К (коэффициент распределения), который опреде­ляет соотно­шение концентрации частиц между средой и мембраной и в ко­нечном итоге скорость переноса. Учитывая это, уравнение Фика для клеточной мембраны представляется в виде:

Ф = -((DK)/L)(Ce – Ci)

DK / L = Р - называют эффективным коэффици­ентом прони­цаемости, тогда Ф = - Р (Сe- Ci)

Мембраны обладают также селективной прони­цаемостью, т.е. различным коэффициентом про­ницаемости, который при про­стой диффузии оп­ределяется коэффициентом распределения К, а в случае облегченной диффузии - избирательно­стью канала и переносчика.

Хорошо известны четыре основные системы активного транспорта ионов в живой клетке: 1. Na⁺-K⁺, 2. Са⁺⁺, 3. Н⁺, 4. Протонный (в дыха­тельной цепи митохондрий). Во всех случаях перенос ионов через мембрану произво­дится за счет энергии гидролиза АТФ (специаль­ными ферментами переносчиками), на­зывае­мыми транспортными АТФ-азами. Мы рассмот­рим только механизмы Na⁺-К⁺-АТФ-азы. Не­смот­ря на значительные различия в структуре Na⁺-K⁺ и Са⁺⁺- АТФ-аз, в механизме их осущест­вления много общего.

Ионы Na⁺ и К⁺ определяют водно-электролит­ный обмен орга­низма. В норме в живых клетках животных существует асиммет­рия концентраций этих ионов внутри (i) и снаружи (е) клетки.

[К⁺]i > [К⁺]e

[Na⁺]i < [Na⁺]e

Клеточная мембрана одинаково проницаема для обоих ионов. Поэтому, для поддержания асим­метрии осуществляется противо-градиентный перенос при помощи Na+-K+- АТФ-азы или Na+- K+ насоса (помпы), за счет энергии освобо­ждающейся при гидроли­зе АТФ

ФТФ + HOH → АДФ + Ф_Н + ΔG , где Ф - неор­ганический фосфат.