- •2.4. Який клінічний матеріал може бути використаний при лабораторній діагностиці вірусних інфекцій у живих системах.
- •Вкажіть мішені дії противірусних препаратів у життєвому циклі вірусів.
- •3.1. Особливості росту клітин в культурі.
- •Особенности образования монослоя трансформированными клетками (клетки образуют мультислой)
- •Методи прямої і непрямої імунофлюоресценції.
- •Метод "летающих стекол"
- •Стандартизація лабораторних тварини за генетичними характеристиками.
- •1. Инбредные (линейные):
- •Отбор клинического материала для исследования
- •Основні групи сучасних дезінфікуючих засосбів, їх характеристики, механізми дії.
- •Галоїдовмісні сполуки
- •Альдегідовмісні сполуки
- •Пероксиданти
- •Четвертинні амонієві сполуки
- •Похідні гуанідину
- •Третинні алкіламіни (амфотензиди)
- •Композиційні препарати
- •4.5. Протигерпетичні препарати
- •5.3. Відповідно класифікації всі лабораторні тварини поділяються на 4 категорії
- •Що таке сд50, лд50, мпк, особливості їх визначення у біологічних системах.
- •6.1.Джерела одержання клітинних культур
- •Види клінічного матеріалу, що використовуються у лабораторній діагностиці вірусних інфекцій
- •6.3. Гнотобіоти і гнотобіологія
- •Які існують способи введення інфекційного матеріалу лабораторним тваринам
- •6.5.Категорії дезінфікуючих засобів в залежності від кінцевої мети їх застосування
- •7.2. Підготовка клінічного матеріалу до лабораторних досліджень в біологічних системах.
- •7.3. Стандартні умови утримання і годівлі лабораторних тварин.
- •7.4 За якими ознаками можна визначити, що в організмі лабораторної тварини відбувається репродукція вірусів.
- •7.5. Вимоги до тест-вірусів при дослідженні віруліцидної дії дезінфікуючих засобів.
- •8.1. Живильні середовища для культивування клітинних культур, їх призначення і основні характеристики.
- •8.2. Особливості деконтамінації клінічного матеріалу, що містить складні віруси.
- •8.3. Яке значення має вибір певного виду і кількості лабораторних тварин для валідації вірусологічних досліджень.
- •8.4. .Що таке лд50 та інфекційний титр вірусу, визначений на лабораторних тваринах, як між собою пов’язані ці величини.
- •8.5.Чому необхідно використовувати тест-віруси при дослідженні віруліцидної дії дезінфікуючих засобів.
- •Билет №9
- •Сольові розчини для культивування клітинних культур, їх призначення і основні характеристики.
- •9.2. Що таке стандартні умови утримання лабораторних тварин.
- •Алгоритми дослідження віруліцидної дії дезінфікуючих засобів.
- •Які основні принципи гуманного ставлення до лабораторних тварин викладені у Європейській конвенції про захист лабораторних тварин.
- •13.4.В чому полягають основні методичні прийоми при типуванні вірусів в рн у біологічних системах.
- •13.5.Визначення віруліцидної дії дезінфікуючих засобів суспензійним методом.
- •Роль ростових факторів при культивуванні культур клітин, джерела їх одержання.
- •14.2.Титрування вірусів в культурі клітин.
- •14.3.Категорій лабораторних тварин відповідно до наявності у них патогенів та умов утримання.
- •14.4.Противірусні препарати розширеного спектру дії.
- •Призначення живильних середовищ в залежності від вмісту в них сироватки.
- •15.2.Який взаємозв’язок існує між генетичним статусом тварин і об’ємом їх вибірки у групах при проведенні вірусологічних досліджень.
- •15.3.Що таке типування вірусів і як воно проводиться на лабораторних тваринах.
- •15.4Алгоритми визначення специфічної дії противірусних препаратів.
- •Визначення віруліцидної дії дезінфікуючих засобів методом тест-об"єктів.
- •Сироватка тварин як джерело ростових факторів.
- •В чому полягають основні небезпечні чинники при роботі з лабораторними тваринами.
- •16.3 Що є критерієм визначення серотипу вірусу при його типуванні в рн.
- •16.4 Як визначити оптимальний режим дії противірусних хіміопрепаратів у культурі клітин.
- •16.5 Визначення віруліцидної дії дезінфікуючих засобів при знезаражуванні білизни.
- •Билет 17
- •17.1 Основні етапи підготовки сироватки крові тварин до використання у біотехнології клітинних культур.
- •17.2 Яких правил слід дотримуватись при роботі з кров’ю та біологічними рідинами інфікованих або померлих тварин.
- •17.3 Особливості виділення вірусів з клінічного матеріалу, їх титрування та типування у біологічних системах
- •17.4 Розрахунок хіміотерапевтичного індексу противірусного хіміопрепарату.
- •17.5 Визначення віруліцидної дії дезінфікуючих засобів при знезаражуванні води. (в лекциях просто приведены все методы, именно для воды нету)
Визначення віруліцидної дії дезінфікуючих засобів методом тест-об"єктів.
Застосовується за відсутності прийнятних способів припинення дії дезінфектанту або миючого засобу
Дозволяє краще змоделювати ситуацію з використанням реальних предметів
Дозволяє безпосередньо вивчати ефективність дезінфекції
Не дозволяє створення високого вірусного навантаження на тест-об’єктах.
Тест-об'єкти – це шматочки батисту розміром (1 х 0,5 см), попередньо звільненого від крохмалю.
Батистові тест-об'єкти кладуть у стерильну чашку Петрі і змочують вірусовмісною рідиною, додаючи її з розрахунку 0,05-0,1 мл на кожний тест-об’єкт. Кількість вірусу на тест-об’єктах повинна бути максимально можливою, що важливо для компенсування його втрати при наступній обробці тест-об’єктів.
Через 20 хвилин зайву рідину промокають стерильним фільтрувальним папером, а шматочки батисту підсушують.
Готові тест-об’єкти використовують в день приготування, для запобігання інактивації вірусу під дією зовнішніх чинників.
ПРОВЕДЕННЯ ВИПРОБУВАНЬ
Готують робоче розчини дезінфекційного засобу у стерильній дистильованій воді в кінцевій концентрації, що відповідає зазначеній в інструкції, в об’ємі, достатньому для повного змочування тест- об’єкт ів з розрахунку 1,0 мл розчину на кожний з них.
Одержаним розчином повністю змочують всі тест-об'єкти. Через 30, 60, 90 і 120 хвилин експозиції тест-обєкти обробляють розчином відповідного нейтралізатора.
Тест-об'єкти ретельно відмивають стерильним фізрозчирном. Одержаною рідиною інфікують по 4 клітинних моношари.
Інфіковані клітини інкубують при 37 оС, впродовж 1-5 діб. Щоденно спостерігають за розвитком ЦПД тест-вірусу.
За відсутності ЦПД вірусу додатково роблять 2 сліпі пасажування.
За відсутності специфічної зміни в клітинних культурах тест-віруси вважають повністю інактивованими
Результат
Дезінфекційний засіб вважається таким, що відповідає вимогам, якщо він повністю інактивує інфекційну активність тест-вірусу при використанні його за умов, зазначених в інструкції або знижує інфекційний титр тест-вірусу не менше ніж на 4 lg ТЦД50/мл в порівнянні з контролем.
Білет №16.
Сироватка тварин як джерело ростових факторів.
Содержит факторы прикрепления (фибронектин) и факторы роста
Применяется:
Сыворотка крови крупного рогатого скота
Эмбриональная (эмбрионы поздних сроков)
Новорожденных телят (до 10 дней)
Молодых телят (до 12 месяцев)
Молодых телят, обогащенная железом (4-6 месяцев)
Взрослых коров (1-6 лет)
Сыворотка крови и эмбрионов других животных
В чому полягають основні небезпечні чинники при роботі з лабораторними тваринами.
Острые предметы: когти, зубы, хирургические инструменты, ребра на клетках животных
Зоонозы: инфекции, патогенные для человека, которые у животных протекают безсимптомно
Контакты: кровь, биологические жидкости
Аллергены: перхоть, шерсть, пыль, подстилка
Переносчики (векторы): насекомые и паразиты