7.3. Стандартні умови утримання і годівлі лабораторних тварин.

^{Для забезпечення надійності і відтворюваності імунобіологічних досліджень, використовувані в них тварини повинні бути стандартізовані по:}

• ^{Умовам змісту}

• ^{Мікробіологічними параметрами}

• ^{Генетичним характеристикам;}

^{Стандартизація умов змісту лабораторних тварин}

При змісті тварин в умовах віваріїв вони повинні бути забезпечені в достатній кількості:

• Кормом

• Водою

• Підстилкою

У приміщеннях де містяться тварини необхідне дотримання оптимальних:

• Світлового і звукового режиму

• Вологості

• Тепмператури

• Достатній вентиляції

Годування і догляд за тваринами повинен здійснювати компетентний і грамотний персонал

7.4 За якими ознаками можна визначити, що в організмі лабораторної тварини відбувається репродукція вірусів.

Виявляються основні симптоми захворювання

Загибель тварин

У уражених вірусом органах виявляються характерні патоморфологічні зміни

Інфіковані новонароджені тварини відстають в зростанні, розвитку і гинуть

В окремих випадках основні ознаки захворювання у тварин виявляються тільки після трьох послідовних сліпих пасажів

7.5. Вимоги до тест-вірусів при дослідженні віруліцидної дії дезінфікуючих засобів.

1. Адаптація до культивування в культурі клітин

2. Здатність викликати характерну тканинну цитопатичну дію (тцд) в культурі клітин

3. Високий вихід при культивуванні в чутливій культурі клітин (інфекційний титр повинен бути не нижчим за 5-8 lgтцд₅₀/мл);

4. Безпечність для персоналу лабораторії

Модельні тест-віруси

Вірус грипу, типу а – складний рнк-геномний вірус, представник родини ортоміксовірусів, відносно чутливий до дії зовнішніх чинників.

Поліовірус 2типу, вакцинний штам себіна [p712(ch-2ab)] – простий рнк-геномний вірус, представник родини пікорнавірусів, стійкий до дії зовнішніх чинників

Модельні тест-віруси

Аденовірус типу 2,– простий днк-геномний вірус, представник родини аденовірусів, стійкий до дії зовнішніх чинників;

Ротавірус мавп штам sa-11 – простий рнк-геномний вірус, представник родини реовірусів, дуже стійкий до дії зовнішніх чинників

Білет №.8.

8.1. Живильні середовища для культивування клітинних культур, їх призначення і основні характеристики.

Для культивування клітин використовують спеціальні стерильні живильні середовища, сольові розчини, детергенти, розчини ферментів, сироватки крові, антибіотики. Всі процедури, пов’язані з культивуванням, проводять в стерильних умовах. Для культивування клітин використовують природні і синтетичні живильні середовища. При виготовленні природних живильних середовищ використовують екстракти тканин, продукти гідролізу молока (гідролізат лактоальбуміну), гемогідролізати. Такі середовища частіше застосовуються для приготування первиннотрипсинізованих клітинних культур. Умови культивування клітин в таких живильних середовищах подібні тим, у яких перебувають клітини в організмі. Проте суттєвим недоліком природних живильних середовищ є неможливість створення контрольованих умов культивування, що пов’язано з варіюючою кількістю компонентів, які входять до їх складу. Синтетичні живильні середовища мають сталий хімічний склад і можуть бути одержані при додаванні до збалансованих сольових розчинів визначеної кількості амінокислот, вітамінів, гормонів, біологічно активних речовин. Найбільш вживаними є синтетичні живильні середовища Ігла, Ігла-МЕМ, ДМЕМ, 199, RPMI-1640.

За своїм призначенням живильні середовища діляться на ростові і підтримуючі. Ростові живильні середовища містять біологічні фактори росту. Крім того, обов’язковими компонентами їх є гормони: інсулін, гідрокортизон, кортикостероїди; фактори прикріплення і розпластування (колаген, фібронектин), ліпіди, мінеральні речовини, іони Cu, Zn, Co, Va, Se.

Як основні фактори росту ростові живильні середовища містять від 5 до 20 % сироватки крові тварин, найчастіше великої рогатої худоби, новонароджених телят або ембріонів корів. Підтримуючі живильні середовища можуть бути без додавання сироватки або містити її до 2,5 %.