Білет №2
2.4. Який клінічний матеріал може бути використаний при лабораторній діагностиці вірусних інфекцій у живих системах.
- Фекалии: кишечные вирусы (рота-, адено-, астро-, калицивирусы (норовирусы), энтервирусы (полио, Коксаки, ECHO-вирусы)
- Содержимое везикул : гепресвирусы человека 1, 2, 3 антигенных типов.
- Кожные образования: папиломавирусы
- Носоглоточные смывы : ортомиксо- (грипп), парамиксовирусы (корь, паротит)
ОСНОВНЫЕ ВИДЫ КЛИНИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА ЧЕЛОВЕКА
‾ Носоглоточные смывы
‾ Мазок с глотки
‾ Спинномозговая жидкость
‾ Фекалии и ректальные тампоны
‾ Кровь
‾ Сыворотка крови
‾ Моча
‾ Жидкость из серозных полостей
‾ Мазок с конъюнктивы
‾ Содержимое везикул
‾ Секционный материал
ДРУГИЕ ВИДЫ КЛИНИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА
‾ Органы и ткани животных
‾ Биологические жидкости животных
‾ Насекомые-переносчики вирусных инфекций
‾ Пищевые продукты
‾ Объекты окружающей среды
Вкажіть мішені дії противірусних препаратів у життєвому циклі вірусів.
ПРОТИВОВИРУСНАЯ ХИМИОТЕРАПИЯ
‾ Мишень – инфицированная клетка
ХОРОШИЕ ПРЕПАРАТЫ ДОЛЖНЫ
‾ Ингибировать специфическую активность ферментов вирусов, необходимых для их репликативного цикла (РНК-зависимой-РНК-полимеразы, ревертазы, интегразы и др.)
‾ Подавлять функции клеточных структур, которые вирус использует в своем репликативном цикле.
‾ Направлено разрушать только инфицированные вирусами клетки.
‾ Активироваться (как лекарства-предшественники) только в инфицированных клетках и оставаться в не активной форме в здоровых.
Билет №3.
3.1. Особливості росту клітин в культурі.
Первичные клеточные культуры
Преимущества:
- Высокая чувствительность к многим вирусам
- Безопасность в онкогенном отношении
- Могут быть получены в больших количествах
Недостатки:
- Трудоемкость и длительность получения
- Ограниченное число пассажей (до 10)
- Возможность контаминации:
+ в процессе получения
+ латентными вирусами
Диплоидные клеточные культуры (клеточные штаммы)
Преимущества:
- Высокая чувствительность к многим вирусам
- Свободны от контаминантов
- Диплоидный набор хромосом
- Безопасность в онкогенном отношении
Недостатки:
- Ограниченное число пассажей (до 100)
- Исключительная требовательность к условиям культивирования
Перевиваемые клеточные культуры (клеточные линии)
Преимущества:
- Потенциальное безсмертие
- Свободны от контаминантов
- Относительная простота и стандартизация условий культивирования
Недостатки:
- Избирательная чувствительность к вирусам
- Не диплоидный набор хромосом
- Потенциально онкогенны
Трансформация
Совокупность изменений, приводящих к появлению у клеток первичной культуры новых свойств, в результате которых появляются клеточные линии.
Отношение клеток к субстрату
1. Субстратзависимые
2. Субстратнезависимые (суспензионные)
Особенности образования монослоя трансформированными клетками (клетки образуют мультислой)
Методи прямої і непрямої імунофлюоресценції.
Иммунофлюоресценция Иммунофлюоресцентный анализ применяют для выявления как антигенов, так и антител. Этот метод основан на использовании реагентов, меченных флюоресцентным красителем. Антитела чаще всего метят флюоресцеина изотиоцианатом. Меченые антитела связываются с антигеном, образуя комплексы, которые можно выявить с помощью флюоресцентной микроскопии. Существуют три модификации иммунофлюоресцентного анализа:
Метод непрямой иммунофлюоресценции позволяет выявить антитела к известному антигену. Антиген, сорбированный на твердой подложке, связывается с немечеными антителами. Комплексы антиген-антитело выявляются с помощью меченых антител к иммуноглобулинам.
Метод прямой иммунофлюоресценции применяют для выявления антигенов. Он основан на непосредственном связывании антигена, сорбированного на твердой подложке, с мечеными антителами. Реакцию оценивают с помощью флюоресцентного микроскопа.
Метод конкурентной иммунофлюоресценции основан на связывании стандартного меченого и присутствующего в исследуемой пробе немеченого антигенов с антителами, сорбированными на твердой подложке. Поскольку меченый и немеченый антигены конкурируют за связывание с антителами, по количеству связанного меченого антигена можно определить концентрацию антигена в исследуемой пробе.