Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ В МИКРОБИОЛОГИИ.doc
Скачиваний:
21
Добавлен:
14.04.2019
Размер:
9.38 Mб
Скачать

II. По составу:

1. Минимальные  соответствуют минимальным потребностям микроорганизмов в питательных веществах. Мини­мальные среды используют в ге­нетических исследованиях.

2. Полные  содержат все необходимое для роста бактерий.

III. По консистенции:

  1. Жидкие (мясо-пептонный, сахарный, кровяной, желчный бульоны, пептонная вода, молоко).

  2. Полужидкие - содержат 0,5% агара (полужидкий агар).

  3. Плотные – содержат уплотнители, придающие среде желеобразную консистенцию. В качестве уплотнителей могут использоваться:

  • агар (по-малайски желе) – очищенный полисахарид из морских водорослей, который добавляют к жидким средам в концентрации 1–3% (обычно 15–20г/л). Плавится при 1000С, застывает  ниже +450С; разлагают его немногие бактерии;

  • желатин - он разжижается многими микроорганизмами и имеет низкую температуру плавления (26300С), поэтому редко используется в качестве уплотнителя;

  • силикагель - используется в случаях, когда требуются плотные среды, не содержащие органических компонентов (для хемолитотрофов).

  1. Свёрнутые  плотные среды, содержащие сыворотку крови или яичный белок, которые в процессе температурной коагуляции приобретают плотность.

  2. Сыпучие  пшено, отруби и др., используют для длительного хранения микроорганизмов на поверхности среды.

IV. По назначению:

  1. Общего назначения, основные (МПБ, МПА). На них растут многие нетребовательные микроорганизмы (псевдомонады, энтеробактерии, стафилококки).

  2. Элективные (селективные, избирательные) содержат вещества, подавляющие рост сопутствующей микрофлоры и усиливающие рост определенных видов или родов микроорганизмов. В качестве селективных добавок используют антибиотики, антисептики (фурагин), анилиновые красители (феноловый красный, метиленовый синий, эозин, малахитовый зеленый), соли (теллурит калия, 4-9% NaCl, селенит натрия), желчь. Примеры элективных сред: для стафилококков  желточно-солевой агар, для синегнойной палочки – фурагиновый агар.

  3. Дифференциально-диагностические позволяют отдифференцировать по внешнему виду колоний и биохимической активности одну группу микроорганизмов от другой при посеве биологического материала со смешанной микрофлорой. Содержат углеводы, индикаторы рН, селективные добавки. Примеры дифференциально-диагностических сред: для энтеробактерий  Эндо, Левина, Плоскирева, для клебсиелл  лактозо-бромтимоловый агар с пенициллином, для Clostridium difficile  фруктозо-циклосерин-цефокситиновый агар.

  4. Индикаторные. В состав таких сред кроме индикатора рН (табл. 6) входят углеводы, либо аминокислоты, при разложении которых изменяется рН и как следствие этого  цвет среды.

Таблица 6

Наиболее часто используемые индикаторы рН в питательных средах

Название индикатора

Окраска индикатора в зависимости от значения рН

щелочное

нейтральное

кислое

Андреде

бесцветный

бесцветный

красный

Бромтимоловый синий

бирюзовый

зеленый

желтый

ВР

(водный голубой+розоловая кислота)

малиновый

бесцветный

синий

Феноловый красный

малиновый

красный

желтый

Изначально рН среды устанавливают 7,2±0,2. Эти среды позволяют изучать биохимические свойства чистых культур микроорганизмов и не обладают селективными свойствами. Примеры индикаторных сред: среды Гисса, Клиглера, Олькеницкого.

  1. Хромогенные. Новый тип диагностических сред, получающий в последнее время широкое распространение в ускоренной диагностике инфекционных заболеваний. На хромогенных средах по цвету колоний можно проводить предварительную идентификацию микроорганизмов (рис. 18).

В состав таких сред, кроме ростовых и селективных компонентов, входит меченый хромогеном субстрат (субстраты). Колонии микроорганизмов, которые разлагают хромогенный субстрат, окрашиваются в определенный цвет. Разработаны хромогенные среды для выделения и предварительной идентификации листерий, сальмонелл, шигелл, E. coli О157, кандид, устойчивых к метициллину стафилококков (MRSA) и др.

Рис. 18. Хромогенная среда CHROMagar OrientationTM позволяет быстро идентифицировать основных возбудителей инфекций мочевых путей

V. По цели использования в схеме бактериологической диагностики инфекционных заболеваний: