Раздел I. Химия белков. Ферменты.

Тема 1.2. Структура, свойства и функции белков.

Тема 1.3. Структура и свойства ферментов.

Тема 1.4. Ингибиторы и активаторы ферментов. Регуляция активности ферментов.

Раздел II. Биоэнергетика. Обмен углеводов.

Тема 2.1. Биологическое окисление. Окислительное фосфорилирование.

Тема 2.2. Гликолиз. Пентозофосфатный путь окисления глюкозы.

Тема 2.3. Цикл трикарбоновых кислот.

Тема 2.4. Глюконеогенез. Гликогенолиз. Гликогенез.

Тема 2.5. Регуляция и патология углеводного обмена.

Раздел III. Обмен липидов.

Тема 3.1. Обмен триацилглицеролов.

Тема 3.3. Регуляция и патология липидного обмена.

Тема 3.4. Взаимосвязь обмена углеводов и липидов.

Раздел IV. Обмен азотсодержащих соединений.

Тема 4.1. Азотосодержащие соединения пищи. Переваривание белков. Общие пути обмена аминокислот.

Тема 4.2. Источники и пути обезвреживания аммиака в различных тканях.

Тема 4.3. Обмен глицина, серина, цистеина, метионина, триптофана, аргинина.

Тема 4.4. Обмен фенилаланина, тирозина, аспарагиновой, глутаминовой кислот, валина, лейцина и изолейцина.

Раздел V. Биохимия витаминов и гормонов.

Тема 5.1. Общая витаминология. Обмен и функции витаминов В₁, В₂, В₃

Тема 5.2. Обмен и функции витаминов В₅, В₆, В₇, В₉, В₁₂, С.

Тема 5.3. Химическая природа, биосинтез, секреция и катаболизм гормонов.

Тема 5.4. Механизм действия гормонов. Гормональная регуляция обмена углеводов и липидов.

Тема 5.5. Гормональная регуляция обмена белков, кальция, воды и электролитов.

Раздел VI. Биохимия крови.

Тема 6.1. Белки и ферменты плазмы крови.

Тема 6.2. Структура гемоглобина. Нарушения синтеза гемоглобина. Метаболизм порфиринов. Желтухи.

Раздел VII. Биохимия соединительной и костной ткани

Тема 7.1. Биохимия соединительной ткани

Тема 7.2. Минерализованная соединительная ткань

Раздел VIII. Биохимия полости рта

Тема 8.2. Биохимия смешанной слюны

ЛАБОРАТОРНЫЕ РАБОТЫ ДЛЯ ВЫПОЛНЕНИЯ

НА ПРАКТИЧЕСКИХ ЗАНЯТИЯХ

Раздел I. Химия белков. Ферменты.

Тема 1.2. Структура, свойства и функции белков.

Цветные реакции на белки и аминокислоты.

Белки - полимерные соединения, построенные из аминокислот, которые соединены между собой пептидными связями. Аминокислоты – это производные карбоновых кислот, у которых три валентности a – углеродного атома всегда заняты одним атомом водорода (-Н), аминогруппой (-NН₂) и карбоксильной группой (-СООН).

Четвёртая валентность может быть занята атомом водорода (глицин) или группировкой атомов, называемой радикалом (-R).

В составе радикалов многие аминокислоты имеют реакционно-способные (функциональные) группы, например сульфгидрильную –SH (цистеин), тиометильную –S- СН₃ (метионин), гидроксильную –ОН (серин, треонин, тирозин).

Цель работы - провести цветные реакции с двумя растворами (I и II), один из которых содержит овальбумин (яичный белок), а другой желатину (овальбумин содержит все 20 аминокислот, а желатина только 17), и определить, в каком растворе овальбумин, а в каком – желатина.

Принцип метода. Ряд химических реактивов специфически взаимодействуют с функциональными группами аминокислот (как свободных, так и в составе пептидов или белков), в результате чего развивается специфическое окрашивание. Такие реакции называют цветными реакциями. Интенсивность окраски в цветных реакциях пропорциональна количеству реагирующих функциональных групп. Поэтому цветные реакции могут быть использованы для качественного и количественного определения белков, для определения присутствующих в них аминокислот или для анализа состава белков. Например:

1. с помощью биуретовой реакции определяют наличие пептидных групп в олигопептидах и в белках (универсальная реакция для любых белков);

2. с помощью нингидриновой реакции определяют наличие a-аминогрупп в свободных аминокислотах, а также в аминокислотах олигопептидов и белков (универсальная реакция для любых белков);

3. с помощью ксантопротеиновой реакции определяют наличие в белках ароматических аминокислот;

4. с помощью реакции Фоля определяют наличие аминокислоты- цистеина.

Ход определения.

Реакция	Номер пробирки	Ход работы	Окраска	Чем обусловлена
Биуретовая	1	Раствор I - 5капель, 10%-ный раствор NaOH - 5 капель,1%-ный раствор СuSО4 - 1 капля
	2	Раствор II - 5капель, 10%-ный раствор NaOH - 5 капель,1%-ный раствор СuSО4 - 1 капля
Нингидриновая	1	Раствор I - 5капель, 1%-ный раствор нингидрина в ацетоне- 2 капли; нагревают
	2	Раствор II - 5капель, 1%-ный раствор нингидрина в ацетоне- 2 капли; нагревают
Ксантопротеиновая	1	Раствор I - 5капель, HNO3(конц.)- 3 капли ; осторожно нагревают
	2	Раствор II - 5капель, HNO3(конц.)- 3 капли ; осторожно нагревают
Фоля	1	Раствор I - 5капель, , 30%-ный раствор NaOH - 5 капель,5%-ный раствор(СН3СОО)2Рb-1 капля; нагревают до кипения
	2	Раствор II - 5капель, 30%-ный раствор NaOH - 5 капель,5%-ный раствор (СН3СОО)2Рb-1 капля; нагревают до кипения

Указанные цветные реакции можно проводить на четырёх предметных стёклах^*: на один край каждого стекла наносят 1 каплю раствора I, на другой- 1 каплю раствор II.

Биуретовая реакция. К белкам на первом стекле последовательно добавляют 1 каплю10%-ного раствора NaOH и 1 каплю 1%-ного раствора СuSО_{4 ,} аккуратно перемешивая стеклянной палочкой.

Нингидриновая реакция. К белкам на втором стекле добавляют 1 каплю нингидрина, перемешивают и осторожно нагревают до кипения.

Ксантопротеиновая реакция. К белкам на третьем стекле добавляют 1 каплю концентрированной HNO_3, перемешивают и осторожно нагревают.

Реакция Фоля. К белкам на четвёртом стекле добавляют 1 каплю30%-ного раствора NaOH и 1 каплю 5%-ного раствора (СН₃СОО)₂Рb. Нагревают до кипения.

К методическим рекомендациям