- •Министерство здравоохранения украины
- •Практическое занятие №1 Тема: "Организация бактериологической лаборатории. Красители и простые методы окраски микроорганизмов. Микроскопия"
- •Рекомендации по оформлению протокола. Правила работы в учебной микробиологической лаборатории
- •Структура бактериологической лаборатории
- •Организация рабочего места врача-бактериолога
- •Методика изготовления бактериального препарата-мазка
- •Анилиновые красители
- •Практическое занятие №2 Тема: "Окраска бактерий по Граму"
- •5. Содержание темы:
- •Рекомендации по оформлению протокола.
- •Тинкториальные свойства некоторых микроорганизмов
- •Особенности химического состава клеточной стенки грамположительных и грамотрицательных бактерий
- •6. Вопросы для самоконтроля:
- •Практическое занятие №3 Тема: "Морфология и структура бактерий"
- •4. Задания для самостоятельной работы во время подготовки к занятию.
- •4.1. Перечень основных терминов, параметров, характеристик, которые должен усвоить студент при подготовке к занятию:
- •4.2. Теоретические вопросы к занятию:
- •4.3. Практические задания, которые выполняются на занятии:
- •Рекомендации по оформлению протокола.
- •Методы микроскопии
- •4. Люминесцентная микроскопия.
- •Іі. Электронная микроскопия
- •6. Вопросы для самоконтроля:
- •Практическое занятие №4 Тема: "Морфология и структура спирохет, актиномицетов, грибов, простейших"
- •1. Актуальность темы:
- •2. Конкретные цели:
- •4. Задания для самостоятельной работы во время подготовки к занятию.
- •Рекомендации по оформлению протокола.
- •6. Вопросы для самоконтроля
- •Практическое занятие №5 Тема: "Питательные среды для культивирования микроорганизмов. Стерилизация"
- •Рекомендации по оформлению протокола.
- •2. По происхождению
- •Практическое занятие №6 Тема: Рост и размножение микроорганизмов. Выделение чистых культур бактерий (1-ое занятие)
- •1. Актуальность темы.
- •2. Конкретные цели:
- •4. Задания для самостоятельной работы во время подготовки к занятию.
- •4.1. Перечень основных терминов, параметров, характеристик, которые должен усвоить студент при подготовке к занятию.
- •4.2. Теоретические вопросы к занятию:
- •4.3. Практические задания, которые выполняются на занятии:
- •5. Содержание темы
- •Рекомендации по оформлению протокола.
- •Методы и принципы выделения чистых культур бактерий.
- •I. Методы, которые основываются на принципе механического разъединения микроорганизмов:
- •II. Методы, которые основываются на принципе использования биологических особенностей микроорганизмов:
- •6. Вопросы для самоконтроля.
- •Практическое занятие №7 Тема: "Рост и размножение микроорганизмов. Выделение чистых культур бактерий (2-ое занятие)"
- •1. Актуальность темы.
- •2. Конкретные цели:
- •4. Задания для самостоятельной работы во время подготовки к занятию.
- •4.1. Перечень основных терминов, параметров, характеристик, которые должен усвоить студент при подготовке к занятию.
- •4.2. Теоретические вопросы к занятию:
- •4.3. Практические задания, которые выполняются на занятии:
- •5. Содержание темы.
- •Рекомендации по оформлению протокола.
- •Классификация пигментов бактерий
- •6. Вопросы для самоконтроля.
- •Практическое занятие №8 Тема: "Выделение чистых культур бактерий (3-е занятие)"
- •1. Актуальность темы.
- •2.Конкретные цели:
- •4. Задания для самостоятельной работы во время подготовки к занятию.
- •4.1. Перечень основных терминов, параметров, характеристик, которые должен усвоить студент при подготовке к занятию.
- •4.2. Теоретические вопросы к занятию:
- •4.3. Практические задания, которые выполняются на занятии:
- •5. Содержание темы.
- •Рекомендации по оформлению протокола.
- •Посев на цветной ряд Гисса позволяет:
- •6. Вопрос для самоконтроля.
- •Практическое занятие №9 Тема: "Химиотерапевтические препараты. Антибиотики"
- •4.2. Теоретические вопросы к занятию:
- •4.3. Практические задания, которые выполняются на занятии:
- •5. Содержание темы.
- •Рекомендации по оформлению протокола
- •Классификация антибиотиков по механизмам действия на микроорганизмы
- •6. Вопросы для самоконтроля.
- •Рекомендованная литература. Основная:
- •Дополнительная:
5. Содержание темы:
На практическом занятии студенты изучают методику окрашивания по Граму, готовят мазки из чистых культур стафилококка и кишечной палочки, красят мазки по методу Грама, изучают изготовленные препараты с использованием иммерсионного объектива, знакомятся с особенностями грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов, тинкториальными свойствами отдельных групп микроорганизмов. Выполненные задания студенты записывают в протокол и подписывают его у преподавателя.
Рекомендации по оформлению протокола.
СВОЙСТВА ГРАМПОЛОЖИТЕЛЬНЫХ И ГРАМОТРИЦАТЕЛЬНЫХ МИКРООРГАНИЗМОВ
|
ГРАМПОЛОЖИТЕЛЬНЫЕ |
ГРАМОТРИЦАТЕЛЬНЫЕ |
|
Нечувствительны к действию пепсина, трипсина, панкреатина. |
Перевариваются ферментами желудочно-кишечного тракта. |
|
Чувствительны к лизоциму, пенициллину. |
Мало чувствительны. |
|
Слабо выражены иммуногенные свойства. |
Хорошо выражены иммуногенные свойства. |
|
Могут быть кислотостойкими. |
Чувствительны к действию кислот.
|
|
Могут образовывать эндоспоры. |
Эндоспор не образуют.
|
|
Ресничек не образуют. |
Могут образовывать реснички.
|
|
Могут образовывать экзотоксин. |
Редко продуцируют экзотоксин. При разрушении клеток выделяется эндотоксин. |
Тинкториальные свойства некоторых микроорганизмов
|
ГРАМПОЛОЖИТЕЛЬНЫЕ |
ГРАМОТРИЦАТЕЛЬНЫЕ |
|
1. Стафилококк. 2. Стрептококк. 3. Коринебактерии дифтерии. 4. Микобактерии туберкулеза. 5. Возбудитель столбняка. 6. Возбудитель газовой гангрены. 7. Возбудитель ботулизма. 8. Актиномицеты. |
1. Менингококки. 2. Гонококки. 3. Кишечная палочка. 4.Сальмонеллы. 5. Шигеллы. 6. Возбудитель чумы. 7. Возбудитель туляремии. 8. Холерный вибрион. |
ФАКТОРЫ, ВЛИЯЮЩИЕ НА ОКРАШИВАНИЕ БАКТЕРИЙ ПО ГРАМУ
1. Клеточная стенка грамположительных бактерий содержит до 90% пептидогликана (гликопептида, муреина), содержит тейхоевые кислоты. Муреин многослоен. У грамположительных бактерий, проницаемость клеточной стенки ниже, чем у грамотрицательных бактерий. Комплекс генцианвиолет-йод задерживается в стенке после действия спирта, поскольку при этом уменьшается диаметр пор в гликопептиде. Стенка грамотрицательных бактерий содержит гликопептида гораздо меньше, его молекула "сшита" слабее сравнительно со стенкой грамположительных бактерий. Считают, что после обработки этиловым спиртом поры в молекуле гликопептида грамотрицательных бактерий остаются широкими, что позволяет экстрагировать комплекс генцианвиолет-йод.
2. У грамположительных бактерий выявлено большое количество рибонуклеината магния (соотношение РНК:ДНК у грамположительных бактерий равняется 8:1, а у грамотрицательных бактерий 1:1). Считается, что рибонуклеинат магния образует большие стойкие комплексы с красителем и йодом, которые не вымывает спирт.
3. Отличие в кислотности белков цитоплазмы у грамположительных и грамотрицательных бактерий. Изоэлектрическая точка белков цитоплазмы грамположительных бактерий находится в пределах рН 4-5, у грамотрицательных бактерий - в пределах рН 5-6. Кислые белки грамположительных бактерий имеют сродство к основным анилиновым красителям, образуют с йодом и генцианвиолетом более стойкие к действию спирта комплексы.