Рекомендации по оформлению протокола. Правила работы в учебной микробиологической лаборатории
В микробиологических лабораториях работают с материалом, который содержит микроорганизмы. В связи с этим необходимо придерживаться правил работы, которые обеспечивают ее стерильность и предотвращение возможности возникновения внутрилабораторного заражения:
В лабораторию можно входить в халате и шапочке.
Запрещается вносить в лабораторию посторонние вещи.
Каждый студент должен работать на своем рабочем месте.
Рабочее место необходимо содержать в чистоте.
Материал для практической работы получает дежурный в лаборантской комнате и раздает студентам группы в присутствии преподавателя.
Использованные в работе инфицированные материалы, пробирки с культурами бактерий необходимо обеззаразить, для чего дежурный сдает отработанный материал в лаборантскую.
Если случайно разобьется посуда с заразным материалом или разольется жидкий заразный материал, студент должен немедленно известить преподавателя и вместе с ним обеззаразить инфицированное место.
После окончания работы студент должен:
Сдать дежурному материал, полученный в начале занятия;
Сдать весь отработанный материал, который подлежит обеззараживанию, а также свои посевы в термостат;
Привести в порядок рабочее место, продезинфицировать его;
Вымыть руки дезинфицирующим раствором и мылом.
Дежурный студент контролирует порядок на рабочих местах студентов в группе и сдает в лаборантскую все, что получил для работы в начале занятия.
Структура бактериологической лаборатории
Приемная материала.
Кабинет врача-бактериолога.
Бактериологическая.
Микроскопическая.
Термостатная.
Серологическая.
Стерилизационная.
Лаборатория питательных сред.
Моечная.
Виварий.
Организация рабочего места врача-бактериолога
Бактериологическая петля.
Микроскоп с осветителем.
Штатив для пробирок.
Пробирка со стерильным физиологическим раствором.
Пастеровская пипетка.
Анилиновые красители.
Иммерсионное масло.
Лоток с мостиком для окрашивания мазков.
Покровные, предметные стекла.
Стерильные мерные пипетки.
Фильтровальная бумага.
Стеклограф.
Спиртовка.
Стакан с дезинфицирующим раствором.
Газовая горелка.
Стерильные пробирки, чашки Петри.
Дозаторы и наборы стерильных наконечников.
Методика изготовления бактериального препарата-мазка
Приготовление суспензии бактерий на предметном стекле.
Высушивание суспензии бактерий и получения мазка.
Фиксация мазка. Цель фиксации: убить микробов, закрепить их на стекле и обеспечить лучше их окрашивание.
Окрашивание мазка.
Промывание.
Высушивание препарата-мазка.
Анилиновые красители
Для окраски микроорганизмов используют анилиновые красители. Это, в основном, производные органических соединений (анилина и других). Это порошки, которые не растворяются в воде, но хорошо растворяются в органических растворителях (спирт, ацетон). Для окрашивания микроорганизмов используют спиртово-водные растворы.
Анилиновые красители бывают: основные, кислые и нейтральные. Для окрашивания бактерий используют основные красители. Методы окрашивания микроорганизмов делятся на простые и сложные. Простые методы используют 1 краситель. Сложные используют 2 и больше красителей, или 1 краситель и вещества, которые не окрашивают микробы, но принимают участие в процессе окрашивания.
Анилиновые красители
|
Цвет |
Основные |
Кислые |
|
Красный |
Нейтральный красный Фуксин Сафранин Пиронин |
Кислый фуксин Эозин |
|
Фиолетовый |
Генцианвиолет Кристалвиолет |
|
|
Синий |
Метиленовый синей |
|
|
Зеленый |
Малахитовый зеленый Брилиантовий зеленый |
|
|
Черный |
Инулин |
Нигрозин |
|
Желтый |
|
Конго Аурантил |
|
Коричневый |
Хризоидин |
|
Схема лучей при сухой (А) и масляной (Б) системах;
1-фронтальная линза объектива; 2-иммерсионное масло; 3-предметное стекло.
Задание №1. Приготовить бактериальные препараты из кокков и палочек, окрасить простыми методами, исследовать в микроскопе.
Окрашивание
метиленовым синим
Чистая культура
Staphylococcus saprophyticus
Окрашивание фуксином
Чистая культура
Escherichia coli
Вывод:
Вопросы для самоконтроля:
Что изучает медицинская микробиология?
Какова структура бактериологической лаборатории и каково назначение ее подразделений?
Для чего окрашивают микроорганизмы?
Какие свойства микроорганизмов можно исследовать при микроскопии окрашенных препаратов?
Как готовят красящие растворы из анилиновых красителей?
С какой целью делают фиксацию мазков на предметном стекле?
Каким объективом пользуются при микроскопии бактериальных препаратов? Какие признаки такого объектива?
Как рассчитать общее увеличение микроскопа?
Что такое разрешающая способность микроскопа и чему она равняется?