42. Метод ван гізон та малорі.

ван гізон метод

Приготування фарбувального складу

Змішати 100 мл насиченого водного розчину пікринової кислоти і 5 мл 1%-ного розчину кислого фуксину. Барвник слабшає при тривалому зберіганні, в такому випадку додають декілька крапель свіжого кислого фуксину.

Видалення парафіну зі зрізів в ксилолі і проведення зрізу через спирти низхідній міцності до 80% етанолу (можливий варіант обробки: орто-ксилол - 2 порції по 3-5 хвилин, 96% етанол - 3 хв, 90% етанол - 3 хв, 80% етанол - 3 хв). Забарвлення залізним гематоксиліном Вейгерта протягом 3-15 хвилин. Промивання у проточній воді протягом декількох хвилин. Промивання дистильованою водою. Забарвлення барвником ван Гізоном протягом 5 хвилин. Швидка промивка в дистильованій воді (5-15 с). Швидка промивка в двох порціях 96% етанолу, однієї порції абсолютного етанолу (або карболену-ксилолу), просвітлить в двох порціях орто-ксилолу. Час перебування зрізів в кожній порції 1-2 хв. Закріплення препарату нейтральним бальзамом.

В результаті фарбування ядра клітин набувають чорний колір, колаген - червоний, інші тканинні елементи (включаючи м'язові волокна і еритроцити) - жовті, фібрин - жовтий або оранжевий.

метод за малоррі

Реактиви

А.Железний гематоксилін по Вейгарту, розчин В 18 мл

В.Железний гематоксилін по Вейгарту, розчин А 18 мл

C.Спиртовий розчин йодної кислоти 30 мл

D.Поліхромний розчин фуксину Понсо 30 мл

E.Раствор фосфомолібденовой кислоти 30 мл

F.Раствор анілінового синього 30 мл

Трихромний барвник для сполучнотканинних зрізів.Селективність дії барвника пояснюється різним ступенем афінності між ним і сполучнотканинних макромолекул. Зокрема, сполучна тканина помітно ацидофільна через наявність більшого числа основних групп і тому має високу афінності до кислих барвникам (пікринова кислота і помаранчевий G) і низькою по відношенню до слабких основним і амфотерним барвникам (кислий фуксин і ксилідини Понсо). Центральну роль у цьому методі грає фосфомолібденовая кислота, яка є сполучною ланкою між тканинними структурами, з якими вона зв'язується (волокна колагену, клітинні мембрани), і аніліновим синім (основний барвник з частковими амфотерними властивостями).

Опис методу

o Помістити зрізи в дистильовану воду

o Нанести на зріз 5 крапель реактиву А і. 5 крапель реактиву В, залишити на 10 хв

o Промити зрізи в дистильованій воді

o підсинити зразки під проточною водою протягом 10 хв

o Нанести на зріз 10 крапель реактиву С, залишити на 2 хв

o Промити зрізи в дистильованій воді

o Нанести на зріз 10 крапель реактиву D, залишити на 1 хв

o Промити зрізи в дистильованій воді

o Нанести на зріз 10 крапель реактиву Е, залишити на 15 хв

o Промити зрізи в дистильованій воді

o Нанести на зріз 10 крапель реактиву F, залишити на 1 хв

o дегідрірованний в спиртах зростаючої концентрації, просвітлить в ксилолі та укласти під покривне скло

Результати

Ядерця темно-коричневий

Колагенові волокнатемно-синій

Основні складові хряща, кістки, мукополісахариди,

базофільні гранули клітин гіпофіза, амілоїд різні відтінки синього

Фіброглія, нейроглії, фібрин, осьові циліндри червоний

Ацидофільні гранули клітин гіпофіза помаранчевий

Мієлін, еритроцити жовтий

Еластичні волокна від блідо рожевого до жовтого

43.Більшовского-Грос-Лаврентьєва метод-  модифікація методу Більшовского-Грос, що полягає в застосуванні для фіксаціїтканин та органів суміші рівних частин насиченого розчину миш'яковистої кислоти, нейтрального формаліну і 96% спирту.