Контрольные вопросы

1. Почему сенезеленые водоросли относят к бактериям?

2. Какие пигменты содержат цианобактерии?

3. Объяснить понятия: «трихом», «гормогонии».

4. Какие порядки выделяют у цианобактерий? Их характеристика.

5. Какие виды цианобактерий способны к азотфиксации?

Рекомендованный материал

5. Шлегель Г. Общая микробиология. «Мир», М. 1972. Стр.103-107.

6. Мишустин Е.Н., Емцев В.Т. Микробиология «Колос». М. 1978. Стр. 41-42.

7. Гусев М.В., Минеева Л.А. Микробиология. МГУ. М. 1985. Стр.265-284.

Занятие 6

ТЕМА: Виды стерилизации. Приготовление питательных сред.

Вопросы для рассмотрения

1. Оборудование, используемое в микробиологии для стерилизации.

2. Питательные среды и их ингредиенты.

3. Виды стерилизации.

4. Подготовка посуды к микробиологическому анализу.

Задание для выполнения лабораторной работы

1. Приготовить питательную среду (МПА)

2. Подготовить посуду к стерилизации

3. Стерилизация среды в автоклаве

Микроорганизмам для роста, развития и размножения необходимы все входящие в состав микробной клетки элементы. Они также должны быть обеспечены энергией. Синтетические способности микроорганизмов и способы получения ими энергии разнообразны. В связи с этим различны и требования микроорганизмов к источникам питания.

Разнообразие обмена веществ у микроорганизмов связано, в большинстве случаев, с их отношением к источникам углерода и азота, обычно эти соединения определяют специфичность питательных сред. Для одного и того же микроорганизма могут быть использованы разные среды. Это зависит от задач исследования. Особые среды нужны для образования спор. Для получения определенных продуктов обмена необходимы специальные среды, отличны от тех, в которых микроорганизмы культивируются длительное время.

По составу питательные среды подразделяют на две группы: натуральные (естественные) и синтетические. Натуральными называют среды, имеющие неопределенный химический состав, так как они состоят из продуктов растительного или животного происхождения, используемых в виде настоев или экстрактов (овощи, фрукты, их отвары, солод, дрожжи, части растений, молоко, мясо, животные ткани, куриное яйцо). В таких средах трудно учесть потребление микроорганизмами отдельных веществ – продуктов обмена микробных клеток. Поэтому натуральные среды малопригодны для изучения физиологии микроорганизмов.

В синтетические среды входят в точно указанных концентрациях только известные химически чистые соединения. Синтетические среды могут быть простыми по составу или иметь относительно большой набор компонентов. Их широко используют для изучения обмена веществ микроорганизмов.

Существуют и так называемые “полусинтетические” среды, относящиеся к средам с неопределенным составом, они содержат соединениями известной химической природы, наряду с веществами неопределенного состава. Примером полусинтетических сред являются следующие: мясопептонная среда, в которую наряду со сложными и неопределенными по химическому составу веществами (мясной бульон) иногда входят пептон, глюкоза или сахароза, поваренная соль, фосфорнокислый калий; картофельные среды с глюкозой и пептоном. Полусинтетические среды широко используются в промышленной микробиологии для получения витаминов, антибиотиков, аминокислот и других продуктов жизнедеятельности микроорганизмов.

По физическому состоянию среды разделяют на жидкие, плотные и сыпучие.

Жидкие среды используют для накопления биомассы или продуктов обмена при выяснении физиолого – биохимических особенностей микроорганизмов

Плотные среды готовят из жидких, добавляя 1,5-2,5% агар-агара или 10-15% желатины.

Агар-агар – растительный коллоид, состоящий главным образом из полисахаридов с низким содержанием азотистых веществ.

Желатина – кислый азотсодержащий продукт, добываемый путем выварки костей и хрящей.

Основой плотной среды может служить кремнекислый гель, введенный в микробиологическую практику С.Н. Виноградским.

Сыпучие среды – разваренное пшено, отруби, пропитанные питательным раствором, - используют в промышленной микробиологии.

С.Н. Виноградским и М. Бейеринком введены в микробиологическую практику элективные (или избирательные) среды. Эти среды создают условия для преимущественного развития одного вида или группы родственных микроорганизмов и мало пригодны или совсем непригодны для развития других

Методы стерилизации

Приготовленные среды, как правило, стерилизуют (Sterilis - бесплодный). Методы стерилизации (обеспложивания) основаны на двух принципах:

а) уничтожение клеток микроорганизмов и их спор в питательных средах, на посуде, инструментах и других предметах – методы термической и лучевой (холодной) стерилизации;

б) отделение клеток микроорганизмов – метод фильтрования (холодная стерилизация).

1. Холодная стерилизация:

1. Фильтрование;

2. стерилизация ультрафиолетовыми лучами;

3. химическая стерилизация и дезинфекция.