1.Исследование возбудителей гнилостного распада белковых веществ.

Для обнаружения возбудителей готовят препарат живых бактерий

(в раздавленной капле). Чаще других в препарате встречаются подвижные клетки Prоteus vulgaris, преобладающие на первых стадиях распада белков. Это не спорообразующие, неодинаковой длины палочки. Кроме того, на препарате много спорообразующих клеток Bac.mycoides и Bac.putrificus. У последних споры располагаются терминально и диаметр их шире клетки. Bac.mycoides вызывает аммонификацию белковых веществ в аэробных условиях, Prоteus vulgaris - факультативный анаэроб, а Bac.putrificus вызывает аммонификацию в анаэробных условиях, но может развиваться, если в среде находятся аэробные микроорганизмы, поглощающие кислород.

2.Микроскопирование азотфиксирующих бактерий свободноживущих в почве.

Из группы этих микроорганизмов наибольший интерес представляют бактерии рода Clostridium и Azotobacter.

Clostridium pasteurianum фиксируют азот из атмосферы в анаэробных условиях. Энергию для этого клетки получают за счет маслянокислого брожения. Для выявления азотфиксаторов из почвы и других мест обитания используют безазотную среду Виноградского:

глюкоза ...................20,0г

К₂НРО .......................1,0г

МgSО₄ ..........................0,5г

NаСl ........................0,5г

дистил. вода..............1000мл

Clostridium pasteurianum обычно находится в осадке мела и почвы . Для его обнаружения содержимое колбы хорошо размешивают или взбалтывают и дают осесть крупным частицам. Затем из середины субстрата пипеткой набирают суспензию и каплю наносят на предметное стекло, к которой добавляют каплю раствора Люголя и микроскопируют. Клетки Clostridium pasteurianum содержат в цитоплазме гранулезу, которая от раствора Люголя приобретает синий цвет. Среди них преобладают веретенообразные формы с продолговатыми спорами.

Для обнаружения Azotobacter используют жидкую среду Бейеринка:

манит (или глюкоза, или сахароза) ............20,0г

К₂НРО ..............................................................0,2г

СаСО₃ ...............................................................5,0г

водопроводная вода........................................1000мл

Для микроскопирования берут каплю суспензии из верхнего слоя жидкости и готовят препарат “раздавленная капля”. Обнаруживаются клетки азотобактера в виде диплококков.

3.Исследование тионовых бактерий.

Для выращивания тионовых бактерий используют среду следующего состава:

Na₂ S ₂O₃ .......................5,0г

Na HCO₃ ...................... 1,0г

K ₂HPO.......................... 0,2г

NH₄ Cl............................ 0,1г

MgCl₂ ............................. 0,1г

Из колбы каплю жидкости помещают на предметное стекло и готовят препарат “раздавленная капля”. При микроскопировании обнаруживаются бактерии Thiobacillus thioparus.

АММОНИФИКАЦИЯ

1. Белковых веществ

Аэробы: bacillus mycoides, bacillus subtilis, bacillus mesentericus

Семейство энтеробактерий (Proteus, Eschirichia).

Анаэробы: Clostridium putrificum, Clostridium sporogenes, bacillus purtificus,

Proteus vulgaris (факультативный анаэроб).

2. Аммонификация мочевины

bacillus probatus, planasarcina ureae

НИТРИФИКАЦИЯ

I – фаза: NH₄ + 1¹/₂O₂ --- NO₂ + H₂O +2H ⁺ ; 2NH₃ + O₂--- 2HNO₂ + 2H₂O

nitrosomonas, nitrosococcus, nitrosolobus, nitrosospira, nitrosovibrio.

II – фаза: NO₂ + ½ O₂ ---NO₃ ; 2HNO₂ + O₂ --- 2HNO₃.

Nitrobacter, Nitrospira Nitrococcus.

ДЕНИТРиФИКАЦИЯ

Phodopseudomonas sphaeroides, Thiobacillus denitrificans, Paracoccus denitrificans,

Группа Corynebacterium [Bacillus, Pseudomonas].

азотфиксация

Свободноживущие: Azotobacter, Clostridium

Серобактерии

2H₂S + O₂ ---- 2H₂O +2S⁰ ; 2S⁰ + 2H₂O +O₂ --- 2H₂SO₄

1) зеленные; 2) пурпурные; 3) бесцветные.

ТИОНОВЫЕ БАКТЕРИИ

Thiobacillus, Thiomicrospira, Thiodendron, Sulfolobus.

Окисление: S⁰, h₂s, s₂o₃^2-, So₃^2-, s₃o₆^2-

Сульфатредуцирующие бактерии

Desulfomaculum, Desulfovibrio, Desulfomicrobium, Desulfomonas, Desulfobulbus, Desulfobacter, Desulfococcus, Desulfosarcina, Desulfurella, Железобактерии

1. нитчатые: Leptothix, sphaeratilus, Clonothrix, Spirothrix, Toxothrix

2. одноклеточные: Sidirocapsa, Seliberia, Ochbium

3. Без клеточной стенки: Calionelia, Siderococcus, Memallogenium, Caulococcus

Контрольные вопросы.

1. Дать определение понятию “аммонификация” и какими группами микроорганизмов она вызывается?

2. По какой суммарной схеме происходит аммонификация мочевины?

3. Характеристика нитрифицирующих бактерий.

4. Возбудители и схемы окисления 1-й и 2-й фаз нитрификации.

5. Процесс денитрификации и суммарное уравнение.

6. На какие группы разделяются микроорганизмы, фиксирующие атмосферный азот?

7. Характеристика групп бактерий, окисляющих соединения серы.

8. Характеристика сульфатвосстанавливающих бактерий (СВБ).

9. Характеристика групп железобактерий.

10. Превращение микроорганизмами органических соединений фосфора.

Рекомендованный материал

1. Теппер Е.З., Шильникова В.К., Переверзева Г.И. Практикум по микробиологии. «Колос», М. 1972. Стр.121-125.

2. Гусев М.В., Минеева Л.А. Микробиология. МГУ, М. 1985. Стр.328-364.

3. Мишустин Е.Н., Емцев В.Т. Микробиология. «Колос», М. 1978. Стр. 84-125.

4. Шлегель Г. Общая микробиология.»Мир», М. 1972. Стр. 279-287, 310-320,340-380

ЗАНЯТИЕ 16

ТЕМА: Классификация, морфология и химический состав вирусов.