Sbornik-2014

После визуализации усредненных значений по Урбаху (рис. 1) наглядно продемонстрировано, что образец № 87 МН обладает наилучшими качествами для использования его при операциях на органах брюшной полости.

Вывод: По результатам сравнительного анализа выявлено, что образец № 87 МН обладает наилучшими морфологическими и манипуляционными свойствами для использования в абдоминальной хирургии.

161

ПЛАНИМЕТРИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА РАНОЗАЖИВЛЯЮЩЕЙ АКТИВНОСТИ ACHYROPHORUS MACULATUS L

Малютина А.Ю., Григорьян А.Ю., Белозерова А.В., Зотов Д.С., Голятина С.С., Борсук Д.И., Емельянов И.Н., Смердов И.А.

Курский государственный медицинский университет Кафедра оперативной хирургии и топографической анатомии им. профессора А.Д. Мясникова

Харьковский национальный медицинский университет Кафедра оперативной хирургии

Современная медицина предлагает большое количество методов для терапии раневых процессов различной этиологии, преимущественно обусловленных микрофлорой и развитием воспалительной реакции. Разработано и предложено множество антимикробных препаратов, однако явление резистентности у микроорганизмов к используемым лекарственным препаратам, снижение общей и местной иммунологической активности требуют совершенствования уже имеющихся и поиска новых методов лечения и препаратов, способных оказывать комплексное антибактериальное, противовоспалительное и репаративное воздействие.

Внародной медицине трава прозанника крапчатого (Achyrophorus maculatus L.) широко известна как противовоспалительное, антисептическое и ранозаживляющее средство, на чем основано его использование при лечении кожных заболеваний. С этой целью свежие измельченные листья прикладывают к гнойным ранам для их очищения и заживления.

Цель исследования состояла в изучении ранозаживляющей активности фитогеля густого экстракта травы прозанника крапчатого на основании планиметрического метода исследования.

Вэкспериментах на животных изучена ранозаживляющая активность 15 % геля на основе густого экстракта травы прозанника крапчатого. Изучение ранозаживляющей активности проводилось в экспериментах in vivo на 54 белых крысах-самцах породы Wistar.

Животным под наркозом моделировалась инфицированная рана (по методике П.И. Толстых), для чего на выбритом от шерсти участке спины иссекали кожу с подкожной клетчаткой размером 15x15 мм.

Всерии 1 животным производилась только ежедневная обработка раны 3 % раствором перекиси водорода. В серии 2 ежедневно производилась обработка раны 3 % раствором перекиси водорода и наложение маревой салфетки с 5 % гелем натрия карбоксиметилцеллюлозы. В серии 3 ежедневно производилась обработка раны 3% раствором перекиси водорода и наложение марлевой салфетки с 15 % гелем на основе густого экстракта травы прозанника крапчатого. Перевязки экспериментальным животным во всех сериях производили один раз в день, ежедневно в течение 10 суток.

162

Для объективной оценки скорости заживления раны по изменению

ееплощади использовали метод Л.Н. Поповой в модификации В.И. Бирюкова. Площадь ран определяли следующим образом: на рану накладывали прозрачную пленку, на которую черным маркером наносили

ееконтур (данную процедуру выполняли поочередно всем исследуемым животным).

Площадь ран рассчитывали следующим образом:

1.Пленка с полученными контурами сканировалась на белом фоне. Разрешение при сканировании - 100-300 пикс/дюйм. Далее производилась обработка изображения с помощью программы «Adobe Photoshop» версии 3.0 и выше;

2.Фрагмент с контуром раны «вырезается» в отдельное окно и его контуры закрашиваются черным цветом с помощью опции «Заливка»;

3.Производится максимальное контрастирование изображения и удаление артефактов с помощью «ластика». Таким образом, получается изображение, состоящее только из черного и белого цветов, без полутонов;

4.Определяется размер изображения (его высота и ширина) используя опцию меню «Изображение» - «Размер изображения» и вычисляется его площадь. Площадь изображения = высота изображения х ширина изображения;

5.В меню «Изображение» - «Гистограмма» определяют, какую часть площади изображения в процентах занимает черный цвет (т.е. площадь раны) и вычисляют эту площадь.

Площадь раны=(площадь изображения/100%)*% черного цвета

Определив площадь ран у экспериментальных животных в каждой серии, вычисляли среднюю площадь (M±m).

Процент уменьшения площади ран от исходного размера (т.е. процент заживления раны) вычисляли по формуле:

ПУП=((S0-S)/S0)*100%

где ПУП – процент уменьшения площади;

S0 – исходная средняя площадь ран на начало лечения, мм2; S – средняя площадь ран на момент измерения, мм2.

Скорость заживления ран (т.е. процент уменьшения площади за сутки) вычисляли по формуле:

СЗ=(ПУП1-ПУП0)/Т

где СЗ – скорость заживления;

163

ПУП1 – процент уменьшения площади ран от исходной на момент измерения; ПУП0 – процент уменьшения площади ран при предыдущем измерении;

Т – количество дней между измерениями.

Анализ полученных данных показал (таб. 1 и 2), что исходные экспериментальные раны у всех животных были сопоставимы по своей площади. С течением времени во всех сериях происходило постепенное уменьшение площади ран в сравнении с предыдущим сроком наблюдения.

Таблица 1 Динамика изменения площади ран у экспериментальных животных в

процессе лечения (М m)

Примечание. 1р<0,05 (сравнивались между собой серия 2 и 3 с серией 1)

В сериях 2 и 3 по сравнению с контрольной серией достоверное различие по проценту уменьшения площади ран отмечается с первых по седьмые сутки, на десятые сутки достоверных различий не выявлено в

164

серии 2. Между сериями 2 и 3 достоверное различие по проценту уменьшения площади ран отмечается только на десятые сутки.

Процент сокращения площади ран в сериях 2 и 3 близок по значениям в первые и третьи сутки. На седьмые сутки процент уменьшения площади ран в серии 3 превысил таковой на 2,84% в серии 2 и

на 11,82% – в серии 1.

К десятым суткам от начала лечения в контрольной серии площадь ран уменьшилась на 229,46 мм2, в серии 2 – на 235,04 мм2, в серии 3 – на

239,16 мм2.

Динамика изменения скорости заживления ран в экспериментальных сериях представлена в таблице 45. Из анализа данных следует, что скорость заживления ран в сериях 2 и 3 по сравнению с контролем достоверно выше на первые-третьи сутки.

Таким образом, полученные данные планиметрического исследования подтверждают наличие ранозаживляющей активности 15% геля на основе густого экстракта травы прозанника крапчатого. Он способствует уменьшению площади ран к десятым суткам более чем на 96%, тогда как 5% NaКМЦ показывает уменьшение площади 93,98%. Высокая скорость заживления ран в первые семь суток наблюдения свидетельствует об активности 15% геля на основе густого экстракта травы прозанника крапчатого в фазу экссудации.

165

МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ

ACHYROPHORUS MACULATUS L. В ЛЕЧЕНИИ РАН

Малютина А.Ю., Жиляева Л.В., Григорьян А.Ю., Белозерова А.В., Зотов Д.С., Голятина С.С., Борсук Д.И., Емельянов И.Н., Смердов И.А.

Курский государственный медицинский университет Кафедра оперативной хирургии и топографической анатомии им. профессора А.Д. Мясникова

Харьковский национальный медицинский университет Кафедра оперативной хирургии

Незаменимой лекарственной формой в лечении раневых повреждений остаются мази, кремы и гели, интерес к которым в последние годы сильно возрос в связи с новой тенденцией включения в их состав фитокомплексов разной степени очищенности. Препараты растительного происхождения выступают не только в роли биодобавок, но и в качестве основных действующих компонентов. Их включение в состав мазей и гелей объясняется не только высокой терапевтической эффективностью, но и благоприятным воздействием на структуру кожи и организм в целом: способностью ускорять клеточную регенерации, глубоко проникать в подкожную клетчатку, регулируя водно-солевой баланс, активизировать ферментные системы, нормализовать гормональный и общий обмен.

Учитывая эффективность и безопасность наружных лекарственных форм, приготовленных с использованием различных растительных объектов и фитокомпозиций, мы остановились на геле, как на оптимальной форме для введения в ее состав комплекса биологически активных соединений травы прозанника крапчатого с целью последующего изучения его ранозаживляющей активности.

Цель исследования состояла в изучении микробиологической активности фитогеля густого экстракта травы прозанника крапчатого.

Определение спектра антимикробного действия осуществляли в опытах in vitro методом диффузии в агар на плотных питательных средах с использованием тест-штаммов микроорганизмов: Staphylococcus aureus

ATCC 6538-P, Bacillus cereus ATCC 10702, Escherichia coli ATCC 25922,

Proteus vulgaris NCTC 4636 и Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Candida albicans ATCC 885-653.

Культуры предварительно выращивали на мясопептонном агаре в течение 24-48 ч. Смыв тест-штаммов микроорганизмов производили стерильным изотоническим раствором натрия хлорида и разводили согласно стандарту мутности Государственного контрольного института медицинских и биологических препаратов им. Л.А. Тарасевича до необходимой концентрации 1 млрд микробных тел в 1 мл.

Расплавленные питательные среды охлаждали до 40±1°С, засевали их соответствующей тест-культурой и разливали по 10 мл в чашки Петри, установленные на горизонтальной плоскости, затем подсушивали в

166

термостате в течение 30 мин при 37±1°С. На поверхность засеянной среды помещали на равном расстоянии от края чашки и друг от друга стерильные цилиндры одного размера и массы. В каждый цилиндр вносили по 0,1 г исследуемого образца лекарственного препарата. Выдерживали чашки в течение 1 ч при комнатной температуре для устранения колебаний во времени между внесением экспериментального образца и началом термостатирования. Затем чашки инкубировали в термостате при 36±1°С в течение 18 ч. По истечении срока инкубации измеряли зоны ингибирования роста тест-штаммов (мм).

Вэкспериментах на животных изучена степень обсемененности ран

впроцессе лечения 15 % геля на основе густого экстракта травы прозанника крапчатого. 54 крысам-самцам породы Вистар под наркозом моделировалась инфицированная рана (по методике П.И. Толстых), для чего на выбритом от шерсти участке спины иссекали кожу с подкожной клетчаткой размером 15x15 мм.

Всерии 1 животным производилась ежедневная обработка раны 3 % раствором перекиси водорода. В серии 2 ежедневно производилась обработка раны 3 % раствором перекиси водорода и наложение маревой салфетки с 5 % гелем натрия карбоксиметилцеллюлозы. В серии 3 ежедневно производилась обработка раны 3% раствором перекиси водорода и наложение марлевой салфетки с 15 % гелем на основе густого экстракта травы прозанника крапчатого. Перевязки экспериментальным животным во всех сериях производили один раз в день, ежедневно в течение 10 суток.

Микробиологическое исследование включало количественное определение микроорганизмов в динамике в 1 г ткани инфильтрата по следующей методике. После выведения животного из эксперимента в стерильных условиях осуществляли забор участка инфильтрата раны массой 0,1-0,5 г, взвешивали и вычисляли коэффициент пересчета на 1 г ткани (К). Затем участок инфильтрата раны растирали в стерильной ступке и суспензировали в изотоническом растворе натрия хлорида из расчета 1:10. Далее делали десятикратные разведения суспензии в изотоническом растворе натрия хлорида до 10-3, а при необходимости и более. Из каждого разведения производили посев 0,1 мл суспензии в чашки Петри с плотной питательной средой (агар). Посевы инкубировали в термостате при температуре 37±1°С в течение 20 ч, затем 1 сутки выдерживали при комнатной температуре. После этого производили подсчет колоний, выросших на чашке, и делали соответствующий пересчет на 1 г ткани. Подсчет колоний производили на тех чашках, где колонии росли изолированно и количество их не превышало 300.

Количество микроорганизмов на 1 г ткани вычисляли по формуле:

N = n x 10 x 10 (или 100, или 1000) x K ,

167

где N – количество микроорганизмов в 1 г биоптата;

n – количество микроорганизмов, выросших на чашке; 10 – пересчет на 1 г суспензии;

10, 100 или 1000 – разведение материала, засеянного на чашку, с которой ведут подсчет колоний;

К – коэффициент пересчета навески на 1 г биоптата.

Результаты исследования спектра антимикробного действия 5 % NaКМЦ и 15 % геля на основе густого экстракта травы прозанника крапчатого в отношении тест-штаммов Staphylococcus aureus ATCC 6538- P, Bacillus cereus ATCC 10702, Escherichia coli ATCC 25922, Proteus vulgaris NCTC 4636, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027 и Candida albicans ATCC 885-653 представлены в таблице 1.

Примечание: 1 высокая чувствительность, 2 умеренная чувствительность

Между степенью чувствительности микроорганизмов к антибактериальному компоненту и размером диаметра зоны угнетения роста культур имеются следующие соотношения:

менее 10 мм – нет чувствительности; 10 мм – умеренная чувствительность;

более 10 мм – высокая чувствительность.

Из анализа данных, представленных в таблице 1, следует, что 15% гель на основе густого экстракта травы прозанника крапчатого обладает бактерицидным действием в отношении всех исследуемых тест-штаммов. За исключением Proteus vulgaris, проявившего умеренную чувствительность к фитопрепарату, все остальные штаммы показали высокую чувствительность.

Анализ полученных результатов микробиологического исследования ран представлен в таблице 2.

168

(сравнивались между собой серия 3 с серией 2)

Во всех сериях микробная обсемененность ран на первые сутки составляла в среднем 4,83±0,92х108 КОЕ/г. В контрольной серии микробная обсемененность ран остается на высоком уровне на всех сроках наблюдения. Только на десятые сутки в серии 2 она достоверно меньше, чем в контрольной, и составляет 4,5±1,00х107 КОЕ/г, что в 3,25 раза меньше.

В серии 3 микробная обсемененность ран достоверно меньше относительно контрольной серии и серии 2 на всех сроках наблюдения. К десятым суткам микробная обсемененность достигла 10,0±0,01х106 КОЕ/г, что в 14,65 и 4,5 раза меньше данных, показанных серией 1 и 2 соответственно.

Таким образом, анализ результатов, полученных при микробиологическом исследовании, показал, что 15 % гель на основе густого экстракта травы прозанника крапчатого обладает широким спектром антимикробной активности в отношении как грамположительных, так и грамотрицательных микроорганизмов, а также проявляет фунгицидную активность относительно дрожжеподобного гриба Candida albicans. Использование при лечении инфицированных ран 15 % гелем на основе густого экстракта травы прозанника крапчатого способствует скорейшему уменьшению микробной обсемененности ран, по сравнению с использованием 5 % водного геля NaКМЦ, и способствует более быстрому заживлению раневой поверхности.

169

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ ЛЕЧЕБНО-ПРОФИЛАКТИЧЕСКОЙ ТЕРАПИИ НАЧАЛЬНОГО КАРИЕСА ЗУБОВ

Моисеева Н.С., Кунин А.А., Кумирова О.А., Панкова С.Н.

Воронежская государственная медицинская академия им. Н.Н. Бурденко

Кафедра факультетской стоматологии

Проблема ранней диагностики и профилактики кариеса в терапевтической стоматологии остается актуальной в связи с высокой распространенностью данной патологии [8]. В связи с этим выявление ранних форм кариеса и мониторинг состояния эмали остается приоритетной задачей и способствует разработке новых методов диагностики и профилактики кариеса. Многие годы ранней диагностикой считалось выявление начального кариеса, когда очаг поражения можно было обнаружить визуальным методом [6]. В настоящее время внимание стоматологов в большей мере обращено на применение современных высокотехнологичных методик ранней диагностики, а также на проведение целенаправленной профилактики данной патологии [5].

Одним из методов профилактики и лечения ранних стадий кариеса является воздействие низкоэнергетического лазерного излучения [7, 10]. Одним из распространенных излучателей является лазерная физиотерапевтическая установка УЛФ-01 «Ягода», которая положила начало лазерной терапии [1]. Для массовой профилактики и лечения начальных стадий кариеса в настоящее время используют портативный полупроводниковый лазерный аппарат «Оптодан» [11, 14].

Последним является диодный свет, который полностью подтверждает все свойства лазерного, так как при попадании на объект теряются все свойства лазерного излучения, такие как когерентность.

На основании экспериментальных и клинических исследований авторами установлено, что диодный красный свет обладает всеми положительными свойствами гелий-неонового и полупроводникового лазеров; обладает противовоспалительным и противоотечным действиями, нормализует микроциркуляцию, понижает проницаемость сосудистых клеток, стимулирует обменные процессы и трофику тканей, включая кислородный режим, снижает гипоксию тканей, обладает нейротропным и анальгезирующим эффектом [12, 13].

Однако физиотерапия с использованием только светодиодного излучения является недостаточной. Для достижения оптимального эффекта профилактики необходим комплекс мероприятий воздействия на зубы (световыми и медикаментозными методами) и на организм (коррекция нарушений пищеварительного тракта, сердечно-сосудистой, нервной, эндокринной и других систем) [9]. Это возможно только в рамках

170