3 курс / Фармакология / Диссертация_Ромодановский_Д_П_Разработка_требований_для_оценки_фармакокинетики

из анализируемых ФК параметров симвастатина или метаболита (см. таблицы 48, 49). В случае нормального распределения значений использовали критерий Стьюдента, в случае отсутствия нормального распределения значений использовали U критерий Манна Уитни. В 2

исследованиях значения Cmax и/или AUC0-t были выше у женщин, в 2 – наоборот.

Таблица 48. Гендерные различия фармакокинетики симвастатина и/или его активного метаболита

симвастатина (распределение близко к нормальному).

Примечание: Ln – натуральный логарифм; AUC0-t – площадь под кривой «концентрация время» в интервале времени от 0 до момента t отбора последней пробы крови; Cmax – максимальная концентрация в крови; * - приведены данные для метаболита симвастатина.

Таблица 49. Гендерные различия фармакокинетики симвастатина и/или его активного метаболита

симвастатина (распределение не является нормальным).

Примечание: Ln – натуральный логарифм; AUC0-t – площадь под кривой «концентрация время» в интервале времени от 0 до момента t отбора последней пробы крови; Cmax – максимальная концентрация в крови; * - приведены данные для метаболита симвастатина.

Таблицы 50 и 51 демонстрируют, отношение средних T/R для мужчин и женщин в проведенных исследованиях БЭ и случаи выявленной клинически значимой разницы отношений средних T/R у мужчин и женщин. Выявлено 3 случая наличия разницы отношений средних T/R

у мужчин и женщин для симвастатина и 4 случая для метаболита симвастатина.

Анализ сравнения отношений геометрических средних T/R ФК параметров симвастатина у мужчин и женщин не выявил статистически значимых различий для Сmax (t=-0,023; p=0,982) и

для AUC (t=-0,257; p=0,803).

141

Таблица 50. Клинически значимые различия отношений геометрических средних воспроизведенного и

референтного препарата у мужчин и женщин для симвастатина.

Примечание: Cmax – максимальная концентрация в плазме крови, AUC0-t – площадь под кривой «концентрация время» в интервале времени от 0 до момента t отбора последней пробы крови, М – мужчины, Ж - женщины, М-Ж разница значений T/R у мужчин и женщин, T/R – отношение средних фармакокинетических параметров исследуемого (T) и референтного препарата (R), * - значения превышающие порог ±0,2.

Анализ сравнения отношений геометрических средних T/R ФК параметров метаболита симвастатина у мужчин и женщин не выявил статистически значимых различий для Сmax

(U=48,000; z=-0,152; p=0,912) и для AUC0-t (U=46,000; z=-0,303; p=0,796).

Таблица 51. Клинически значимые различия отношений геометрических средних воспроизведенного и

референтного препарата у мужчин и женщин для метаболита симвастатина.

Примечание: Cmax – максимальная концентрация в плазме крови, AUC0-t – площадь под кривой «концентрация время» в интервале времени от 0 до момента t отбора последней пробы крови, М – мужчины, Ж - женщины, М-Ж разница значений T/R у мужчин и женщин, T/R – отношение средних фармакокинетических параметров исследуемого (T) и референтного препарата (R), * - значения превышающие порог ±0,2.

Таким образом, выявлены случаи клинически значимых различий между воспроизведенными препаратами и рефератным препаратом у мужчин и женщин, что свидетельствует о возможности наличия различий в рецептуре и/или технологии производства воспроизведенных препаратов. В то же время для препаратов симвастатина различия T/R Сmax и

T/R AUC0-t у мужчин и женщин статистически не значимы.

С помощью полученных в результате нашего анализа значений внутрииндивидуальной вариабельности и точечной оценки, рассчитали симуляционные 90% доверительные интервалы для исследований воспроизведённых препаратов симвастатина и его активного метаболита при допущении, что количество субъектов мужского и женского пола будет приравнено к значению

142

общей исходной выборки. Как видно из таблицы 52, в результате проведенных расчетов, для симвастатина в 3 из 5 исследований у мужчин и в 2 из 5 исследований у женщин получены доверительные интервалы, не укладывающиеся в допустимый диапазон 80,00-125,00 %.

Таблица 52. 90 % доверительные интервалы для отношения геометрических средних исследуемого и

референтного препарата симвастатина у мужчин и женщин.

Примечание: Cmax – максимальная концентрация в плазме крови, AUC0-t – площадь под кривой «концентрация время» в интервале времени от 0 до момента t отбора последней пробы крови, М – мужчины, Ж - женщины, L – нижняя граница 90% доверительного интервала, U – верхняя граница 90% доверительного интервала, * – значения, не укладывающиеся в диапазон 80,00-125,00%.

У мужчин не эквивалентные результаты были получены в 60% случаев, у женщин в 40%.

Изучение ассоциации между принадлежностью к определённому полу и выявлением неэквивалентных результатов исследований БЭ симвастатина, выполнили, используя критерий точный критерий Фишера, для чего построена таблица сопряженности (см. таблицу 53). Анализ влияния фактора гендерной принадлежности на частоту результатов выявления доверительных интервалов, не укладывающихся в диапазон 80,00-125,00 %, показал отсутствие статистически значимой взаимосвязи (Fр=0,603; р>0,05).

Таблица 53. Ассоциация между полом субъектов и частотой выявления не биоэквивалентных

результатов исследований симвастатина.

Для метаболита симвастатина получены доверительные интервалы, не укладывающиеся

в допустимый диапазон 80,00-125,00 % (см. таблицу 54).

Таблица 54. 90 % доверительные интервалы для отношения геометрических средних исследуемого и

референтного препаратов метаболита симвастатина у мужчин и женщин.

Примечание: Cmax – максимальная концентрация в плазме крови, AUC0-t – площадь под кривой «концентрация время» в интервале времени от 0 до момента t отбора последней пробы крови, М – мужчины, Ж - женщины, L – нижняя граница 90% доверительного интервала, U – верхняя граница 90% доверительного интервала, * – значения, не укладывающиеся в диапазон 80,00-125,00%.

У мужчин не эквивалентные результаты были получены в 4 исследованиях (30%), у женщин в 1 исследовании (10%). Изучение ассоциации между принадлежностью к определённому полу и выявлением неэквивалентных результатов исследований БЭ метаболита симвастатина, выполнили, используя критерий Фишера, для чего построена таблица сопряженности (см. таблицу 55). Анализ влияния фактора гендерной принадлежности на частоту результатов выявления доверительных интервалов, не укладывающихся в диапазон 80,00-125,00

%, показал отсутствие статистически значимой взаимосвязи (Fр=0,334; р>0,05).

Таблица 55. Ассоциация между полом субъектов и частотой выявления не биоэквивалентных

результатов исследований метаболита симвастатина.

Примечание: n – количество наблюдений.

Препараты симвастатина могут быть включены в Перечень высоковариабельных лекарственных средств (Приложение №3), что требует применения подхода с масштабированием границ БЭ в исследовании с повторным дизайном.

При планировании и оценке результатов исследований БЭ симвастатина следует руководствоваться принципами, описанными в Приложении №2.

3.4.1.2. Оценка внутрииндивидуальной вариабельности ингибиторов ангиотензинпревращающего фермента.

Каптоприл

Каптоприл – селективный конкурентный ингибитор АПФ первого поколения. Его активность обусловлена исходным соединением. При приеме внутрь быстро всасывается в ЖКТ, максимальная концентрация достигается в течение 30-90 минут, период полувыведения составляет 2-3 часа, метаболиты не обладают активностью21.

Проведенный анализ 10 исследований БЭ показал, что во всех рассмотренных

21 Капотен®. Инструкция по медицинскому применению [Электронный ресурс] // Государственный реестр лекарственных средств. URL: https://grls.rosminzdrav.ru/InstrImg/0001417667/%D0%9F_N013055_01-

040419[2019]_1.pdf (дата обращения: 11.05.2020).

144

исследованиях был выбран стандартный простой перекрёстный дизайн. Препаратом сравнения в большинстве исследований был референтный препарат Капотен®, изучались различные дозы от

25 до 50 мг. Период отмывки составил 7 дней, длительность отбора и количество временных точек отбора значительно варьировало в различных исследованиях. Количество субъектов,

включённых в статистический анализ параметров ФК, варьировало от 12 до 18 добровольцев

(Приложение №1).

Во всех исследованиях в крови определяли в качестве аналита – каптоприл. В качестве биоаналитического метода определения аналитов в большинстве исследований использовали высокоэффективную жидкостную хроматографию с масс-спектрометрической или тандемной масс-спектрометрической детекцией аналитов, НПКО варьировал в диапазоне 5 – 30 нг/мл

(Приложение №1).

В результате анализа значений концентраций каптоприла были рассчитаны ФК параметры

Cmax, AUC0-t, tmax. В таблице 56 представлены усредненные ФК параметры. На рисунке 25

представлены усредненные ФК профили.

Таблица 56.

Усредненные фармакокинетические параметры каптоприла.

Примечание: Cmax – максимальная концентрация в крови; AUC0-t – площадь под кривой «концентрация время» в интервале времени от 0 до момента t отбора последней пробы крови; tmax – время достижения максимальной концентрации; T – исследуемый препарат; R – референтный препарат; Mean – среднее арифметическое; SD – стандартное отклонение.

145

Рисунок 25.

Усредненные фармакокинетические профили каптоприла.

а

б

Примечание: а) фармакокинетические профили воспроизведенных препаратов; б) фармакокинетические профили препаратов сравнения; Т2-Т18 и R2-R18 – нумерация исследований биоэквивалентности, вошедших в анализ.

Полученные результаты позволяют судить о том, что tmax каптоприла находиться в диапазоне 0,5-1,5 часов после приема, средние значения Cmax находились на уровне 40-400 нг/мл в зависимости от чувствительности аналитического метода и дозировки (25-50 мг) (см. таблицу

56). В исследованиях с наибольшей чувствительностью аналитического метода средние Cmax

были на уровне 40 нг/мл.

Аналитическую методику определения каптоприла следует планировать с учетом НПКО около 2 нг/мл для дозировки 25 мг и 8-20 нг/мл для дозировки 50 мг. В проанализированных исследованиях НПКО варьировал в диапазоне 5 – 30 нг/мл, таким образом, правило 5% от Cmax

не было соблюдено в ряде исследований.

Период полувыведения каптоприла, по данным референтного препарата, составляет 2-3

146

часов, поэтому при выборе точек забора образцов крови для ФК анализа препаратов с немедленным высвобождением следует учитывать общую длительность 24 часа. Более частый отбор образцов крови следует планировать в диапазоне времени достижения Сmах около 0,5-1,5

часа. Период отмывки с учетом длительности периода полувыведения должен быть 7 дней

(общепринятый минимальный период отмывки в исследованиях БЭ).

Результаты анализа внутрииндивидуальной вариабельности каптоприла представлены в таблице 57. Показано, что ни в одном из исследований каптоприла не была обнаружена высокая вариабельность Cmax и AUC0-t.

Таблица 57.

Внутрииндивидуальная вариабельность каптоприла.

(верхняя граница ДИ)

Примечание: MSE – среднеквадратичная ошибка; AUC0-t – площадь под кривой «концентрация время» в интервале времени от 0 до момента t отбора последней пробы крови; Cmax – максимальная концентрация в крови; CVintra – коэффициент внутрииндивидуальной вариабельности; CVpooled - усредненное («пулированное») значение коэффициента внутрииндивидуальной вариабельности; ДИ – доверительный интервал.

Результаты оценки взвешенного среднего значения CVintra («пулированного» значения

CVintra) 10 исследований каптоприла показали, что значение для Cmax составило 13% (верхняя граница доверительного интервала 14%), для AUC0-t составило 14% (верхняя граница доверительного интервала 15%).

Таким образом, каптоприл не является высоко вариабельным. Для расчета размера выборки следует ориентироваться на значение внутрииндивидуальной вариабельности 13-15%.

Также были рассчитаны коэффициенты внутрииндивидуальной вариабельности каптоприла для отдельных популяций субъектов мужского и женского пола (см. таблицу 58).

Всего в исследованиях каптоприла в статический анализ были включены данные от 150

субъектов, из которых 76 было мужского пола и соответственно 92 женского. Значения коэффициента внутрииндивидуальной вариабельности более 30% не были выявлены ни у мужчин, ни у женщин (см. таблицу 58).

147

Таблица 58. Данные о внутрииндивидуальной вариабельности каптоприла у мужчин и женщин.

Примечание: Cmax – максимальная концентрация в плазме крови, AUC0-t – площадь под кривой «концентрация время» в интервале времени от 0 до момента t отбора последней пробы крови, М – мужчины, Ж – женщины, Ж/M – отношение значений внутрииндивидуальной вариабельности фармакокинетического параметра у женщин к соответствующему значению у мужчин, СРЗНАЧ – среднее арифметическое значение, СРГЕОМ – среднее геометрическое значение, МАКС – максимальное значение, МИН – минимальное значение, СО – стандартное отклонение, * - значения демонстрируют превышение внутрииндивидуальной вариабельности у женщин в сравнении с мужчинами.

Таким образом, изучение ассоциации между принадлежностью к определённому полу и выявлением высокой частоты внутрииндивидуальной вариабельности ФК параметров не проводили.

Средние значения вариабельности Cmax были выше у женщин (12,91±3,43 и 12,06±6,22,

соответственно). Значения отношений внутрииндивидуальной вариабельности между женщинами и мужчинами во всех исследованиях составило – 1,42, что говорит о незначительно большей внутрииндивидуальной вариабельности у женщин. Анализ сравнения внутрииндивидуальной вариабельности параметров Cmax у мужчин и женщин не выявил статистически значимых различий (t=-0,380; p=0,709).

В отношении параметра AUC0-t была обнаружена аналогичная тенденция, средние значения у женщин и мужчин - 12,76±4,99 и 11,61±5,54, соответственно. Отношение значений вариабельности между женщинами и мужчинами составило 1,48. Анализ сравнения внутрииндивидуальной вариабельности параметров AUC0-t у мужчин и женщин не выявил статистически значимых различий (t=-0,486; p=0,633).

Можно судить о том, что внутрииндивидуальная вариабельность параметров ФК каптоприла у женщин незначительно выше, чем у мужчин, однако, различия статистически не значимы.

148

Таблица 59 демонстрирует, отношение средних T/R для мужчин и женщин в проведенных исследованиях БЭ и случаи выявленной клинически значимой разницы отношений средних T/R

у мужчин и женщин. Обнаружили 5 случаев (2 - для Cmax и 3 - для AUC0-t) значимой взаимосвязи «пол – готовая ЛФ» в 4 из 10 исследований (40%) для AUC0-t и для Cmax. Частота выявления взаимосвязи «пол – готовая ЛФ» в исследованиях БЭ каптоприла согласуется с данными литературы.

Таблица 59. Клинически значимые различия отношений геометрических средних воспроизведенного и

референтного препарата у мужчин и женщин.

Примечание: Cmax – максимальная концентрация в плазме крови, AUC0-t – площадь под кривой «концентрация время» в интервале времени от 0 до момента t отбора последней пробы крови, М – мужчины, Ж - женщины, М-Ж разница значений T/R у мужчин и женщин, T/R – отношение средних фармакокинетических параметров исследуемого (T) и референтного препарата (R), * - значения превышающие порог ±0,2.

Анализ сравнения отношений геометрических средних T/R ФК параметров у мужчин и женщин выявил наличие статистически значимых различий для Сmax (t= -2,396; p=0,028) и не выявил статистически значимых различий для AUC0-t (t=-0,551; p=0,588). Отношение геометрических средних T/R для Сmax было выше у женщин, что может быть обусловлено наличием в составе воспроизведенных препаратов вспомогательных веществ, которые привели к установленным различиям между лекарственными формами воспроизведенных и референтных препаратов.

Однако, сравнительный анализ средних логарифмированных значений ФК параметров

Cmax и AUC0-t каптоприла у мужчин и женщин показал, что только в 2 из 10 исследований (20%),

были обнаружены статистически значимые различия по параметрам Cmax и/ или AUC0-t (у мужчин средние значения были выше) см. таблицы 60, 61. В случае нормального распределения значений использовали t критерий Стьюдента, в случае отсутствия нормального распределения значений использовали U критерий Манна-Уитни.

149

Таблица 60. Гендерные различия фармакокинетики каптоприла (распределение близко к

нормальному).

Примечание: Ln – натуральный логарифм; AUC0-t – площадь под кривой «концентрация время» в интервале времени от 0 до момента t отбора последней пробы крови; Cmax – максимальная концентрация в крови.

Таблица 61. Гендерные различия фармакокинетики каптоприла (распределение отличается от

нормального).

Примечание: Ln – натуральный логарифм; AUC0-t – площадь под кривой «концентрация время» в интервале времени от 0 до момента t отбора последней пробы крови.

С помощью полученных в результате нашего анализа значений внутрииндивидуальной вариабельности и точечной оценки, рассчитали симуляционные 90% доверительные интервалы для 10 исследований воспроизведённых препаратов каптоприла при допущении, что количество субъектов мужского и женского пола будет приравнено к значению общей исходной выборки.

Как видно из таблицы 62, в результате проведенных расчетов, в 4 из 10 исследований у мужчин и в 3 из 10 у женщин, получены доверительные интервалы, не укладывающиеся в допустимый диапазон 80,00-125,00 %.

Таблица 62. 90 % доверительные интервалы для отношения геометрических средних исследуемого и

референтного препаратов каптоприла у мужчин и женщин.

Примечание: Cmax – максимальная концентрация в плазме крови; AUC – площадь под кривой «концентрация-время»; N – количество субъектов; М – мужчины; Ж – женщины; L – нижняя граница 90% доверительного интервала; U – верхняя граница 90% доверительного интервала; * – значения, не укладывающиеся в диапазон 80,00-125,00%.

150