3 курс / Фармакология / Диссертация_Ромодановский_Д_П_Разработка_требований_для_оценки_фармакокинетики

(верхняя граница ДИ)

Примечание: AUC0-t – площадь под кривой «концентрация время» в интервале времени от 0 до момента t отбора последней пробы крови; Cmax – максимальная концентрация в крови; CVintra – коэффициент внутрииндивидуальной вариабельности; CVpooled - усредненное («пулированное») значение коэффициента внутрииндивидуальной вариабельности; ДИ – доверительный интервал; НД – нет данных (метаболит аторвастатина не определялся); * - значения, превышающие 30%.

Полученные значения коэффициентов внутрииндивидуальной вариабельности аторвастатина и метаболита были «пулированы» [63, 67].

«Пулированное» значение коэффициента вариабельности – это взвешенное среднее значений нескольких исследований, при этом наибольший вес имеют исследования с большим числом участников (при расчете также играет роль число последовательностей). Для последующих расчетов размера выборки в исследования рекомендуется использовать верхнюю границу 80% доверительного интервала усредненного значения коэффициента внутрииндивидуальной вариабельности [67].

Результаты «пулирования» данных всех исследований показали, что значения CVpooled Cmax

и AUC0-t исходного соединения не превышают 30% (27%, верхняя граница доверительного интервала 28%; и 18%, верхняя граница доверительного интервала 19%, соответственно), для метаболита CVpooled Cmax составил 31% с верхней границей доверительного интервала 32%;

CVpooled AUC0-t – 24% с верхней границей доверительного интервала 24%.

С учетом того, что множественные исследования вызвали вопросы из-за низкой численности субъектов, а также рекомендаций FDA о возможности высокой вариабельности аторвастатина, мы провели дополнительный анализ данных 12 исследований, в которых была выявлена высокая вариабельность исходного соединения. Показано, что CVpooled Cmax составил

36,10 с верхней границей доверительного интервала 37,17%; CVpooled AUC0-t – 23,18% с верхней границей доверительного интервала 23,84%.

Таким образом, для расчета размера выборки в дальнейшие исследования, мы считаем необходимо руководствоваться данными о CVintra Cmax для аторвастатина 36-37% и CVintra Cmax

для метаболита 31-32%.

Также были рассчитаны коэффициенты внутрииндивидуальной вариабельности аторвастатина и его метаболита для отдельных популяций субъектов мужского и женского пола

(см. таблицу 21). Всего в исследованиях аторвастатина в статический анализ были включены данные от 1006 субъектов, из которых 690 было мужского пола и соответственно 316 женского.

Таким образом, в исследованиях аторвастатина участвовало более 50% субъектов

111

мужского пола, и в 11 исследованиях были получены значения CVintra фармакокинетических параметров более 30% у мужчин. У женщин высокие значения CVintra были выявлены в 5

исследованиях, однако стоит отметить, что из 34 исследований аторвастатина только в 22

исследованиях участвовали субъекты женского пола.

Таблица 21. Сведения о поле субъектов исследования и внутрииндивидуальная вариабельность

аторвастатина у мужчин и женщин.

Примечание: Cmax – максимальная концентрация в плазме крови, AUC – площадь под кривой «концентрация-время», М – мужчины, Ж – женщины, Ж/M – отношение значений внутрииндивидуальной вариабельности фармакокинетического параметра у женщин к соответствующему значению у мужчин, СРЗНАЧ – среднее арифметическое значение, СРГЕОМ – среднее геометрическое значение, МАКС – максимальное значение, МИН – минимальное значение, СО – стандартное отклонение, * - значения, превышающие 30% (высокая вариабельность), ** - в расчеты включены значения только из исследований с участием субъектов обоего пола; *** - значения демонстрируют превышение внутрииндивидуальной вариабельности у женщин в сравнении с мужчинами.

Данные по внутрииндивидуальной вариабельности 2-OH-аторвастатина у мужчин и женщин приведены в таблице 22. Выявлено, что высокая вариабельность CVintra у мужчин наблюдалась в 3 из 6 исследований, у женщин в 1 из 6 исследований, в которых определяли метаболит аторвастатина у субъектов обоего пола.

Таблица 22. Внутрииндивидуальная вариабельность 2-OH-аторвастатина у мужчин и женщин.

Примечание: AUC0-t – площадь под кривой «концентрация время» в интервале времени от 0 до момента t отбора последней пробы крови; Cmax – максимальная концентрация в крови; CVintra – коэффициент внутрииндивидуальной вариабельности; М – мужчины; Ж – женщины; НД – нет данных (субъекты женского пола не участвовали в исследовании); - значения превышающие 30%. Показаны данные исследований, в которых определялся метаболит аторвастатина, нумерация исследований сохранена.

Таким образом, высокая внутрииндивидуальная вариабельность ФК аторвастатина и его метаболита наблюдалась и у мужчин, и у женщин.

Анализ исследований с определением исходного соединения с участием субъектов обоего пола (22 исследования из 34) показал, что с частотой 27% случаев у мужчин и 22% у женщин наблюдались высокие значения внутрииндивидуальной вариабельности Cmax и AUC0-t. Изучение ассоциации между принадлежностью к определённому полу и выявлением высокой внутрииндивидуальной вариабельности ФК параметров, изученных в исследованиях БЭ аторвастатина, мы выполнили, используя критерий χ2 для чего построена таблица сопряженности

(см. таблицу 23). Анализ влияния фактора гендерной принадлежности на частоту выявления высокой внутрииндивидуальной вариабельности не выявил статистически значимых различий

(χ2=0,121; p=0,728).

113

Таблица 23. Ассоциация между полом субъектов и частотой выявления высокой

внутрииндивидуальной вариабельности исследований аторвастатина.

Примечание: n – количество наблюдений.

Анализ исследований с определением метаболита с участием субъектов обоего пола (6

исследований из 34) показал, что с частотой 50% случаев у мужчин и 17% у женщин наблюдались высокие значения внутрииндивидуальной вариабельности Cmax и AUC0-t. Изучение ассоциации между принадлежностью к определённому полу и выявлением высокой внутрииндивидуальной вариабельности ФК параметров, изученных в исследованиях БЭ аторвастатина, мы выполнили,

используя точный критерий Фишера, для чего построена таблица сопряженности (см. таблицу

24). Анализ влияния фактора гендерной принадлежности на частоту выявления высокой внутрииндивидуальной вариабельности не выявил статистически значимых различий (Fр=0,303; p>0,05).

Таблица 24. Ассоциация между полом субъектов и частотой выявления высокой

внутрииндивидуальной вариабельности исследований метаболита аторвастатина.

Примечание: n – количество наблюдений.

Средние значения внутрииндивидуальной вариабельности Cmax были выше у мужчин чем

уженщин (20,57±14,57 и 18,14±10,37, соответственно). Значения отношений внутрииндивидуальной вариабельности между женщинами и мужчинами во всех исследованиях составило – 1,14, что говорит о незначительно большей внутрииндивидуальной вариабельности

уженщин. Анализ сравнения внутрииндивидуальной вариабельности параметров Cmax у мужчин и женщин не выявил статистически значимых различий (t=0,638; p=0,527).

Вотношении параметра AUC0-t средние значения внутрииндивидуальной вариабельности были сопоставимы у мужчин и женщин (14,40±7,97 и 14,58±7,62, соответственно). Отношение значений вариабельности между женщинами и мужчинами составило 1,37. Анализ сравнения внутрииндивидуальной вариабельности параметров AUC0-t у мужчин и женщин не выявил

114

статистически значимых различий (t=-0,079; p=0,937).

Можно судить о том, что внутрииндивидуальная вариабельность параметров ФК у женщин незначительно выше, чем у мужчин, однако, различия статистически не значимы.

Сравнительный анализ средних логарифмированных значений ФК параметров Cmax и

AUC0-t у мужчин и женщин показал, что в 5 из 22 исследований, в которых участвовали субъекта обоего пола, были обнаружены статистически значимые различия, по крайней мере, для одного из анализируемых ФК параметров (см. таблицы 25 и 26). В случае нормального распределения значений использовали критерий Стьюдента, в случае отсутствия нормального распределения значений использовали U критерий Манна-Уитни. Значения Cmax и AUC0-t были выше у женщин, за исключением исследования № 26.

Таблица 25. Гендерные различия фармакокинетики аторвастатина и/или его активного

метаболита (распределение близко к нормальному).

Примечание: Ln – натуральный логарифм; AUC0-t – площадь под кривой «концентрация время» в интервале времени от 0 до момента t отбора последней пробы крови; Cmax – максимальная концентрация в крови; * - приведены данные для метаболита аторвастатина.

Таблица 26. Гендерные различия фармакокинетики аторвастатина и/или его активного

метаболита (распределение не является нормальным).

Примечание: Ln – натуральный логарифм; AUC0-t – площадь под кривой «концентрация время» в интервале времени от 0 до момента t отбора последней пробы крови; Cmax – максимальная концентрация в крови; * - приведены данные для метаболита аторвастатина.

115

Таким образом, внутрииндивидуальная вариабельность аторвастатина незначительно выше у женщин, также в ряде исследований были получены статистически значимо большие значения Cmax и AUC0-t у женщин в сравнении с мужчинами.

Таблица 27 демонстрирует, отношение средних T/R для мужчин и женщин в проведенных исследованиях биоэквивалентности и случаи выявленной клинически значимой разницы отношений средних T/R у мужчин и женщин.

В 6 исследованиях (4 по параметру Cmax и 2 по параметру AUC0-t) были выявлены случаи наличия клинически значимой разницы T/R (≥ 0,2) у мужчин и женщин при определении исходного соединения.

Анализ сравнения отношений геометрических средних T/R фармакокинетических параметров у мужчин и женщин не выявил статистически значимых различий для Сmax

(U=218,000; Z=-0,563; p=0,573) и для AUC0-t (U=225,000; Z=-0,399; p=0,690).

Таблица 27. Клинически значимые различия отношений геометрических средних воспроизведенного и

референтного препаратов аторвастатина у мужчин и женщин.

Примечание: Cmax – максимальная концентрация в плазме крови, AUC0-t – площадь под кривой «концентрация время» в интервале времени от 0 до момента t отбора последней пробы крови, М – мужчины, Ж - женщины, М-Ж разница значений T/R у мужчин и женщин, T/R – отношение средних фармакокинетических параметров исследуемого (T) и референтного препарата (R), * - значения превышающие порог ±0,2.

Анализ исследований с определением активного метаболита не выявил случаев

116

взаимосвязи «пол-лекарственная форма».

Таким образом, выявлены случаи клинически значимых различий между воспроизведенными препаратами и рефератным препаратом у мужчин и женщин, что свидетельствует о возможности наличия различий в рецептуре и/или технологии производства воспроизведенных препаратов. В то же время для препаратов аторвастатина различия T/R Сmax и

T/R AUC0-t у мужчин и женщин статистически не значимы.

С помощью полученных в результате нашего анализа значений внутрииндивидуальной вариабельности и точечной оценки, рассчитали симуляционные 90% доверительные интервалы для 22 исследований воспроизведённых препаратов аторвастатина при допущении, что количество субъектов мужского и женского пола будет приравнено к значению общей исходной выборки. Как видно из таблицы 28, в результате проведенных расчетов, у мужчин в 4 из 22

исследований получены доверительные интервалы, не укладывающиеся в допустимый диапазон

80,00-125,00 %; у женщин в 7 из 22 исследований.

Таблица 28. 90 % доверительные интервалы для отношения геометрических средних исследуемого и

референтного препаратов аторвастатина у мужчин и женщин.

Примечание: Cmax – максимальная концентрация в плазме крови, AUC0-t – площадь под кривой «концентрация время» в интервале времени от 0 до момента t отбора последней пробы крови, М – мужчины, Ж - женщины, L – нижняя граница 90% доверительного интервала, U – верхняя граница 90% доверительного интервала, * – значения, не укладывающиеся в диапазон 80,00-125,00%.

117

Умужчин не эквивалентные результаты были получены в 18% исследований, у женщин

в31% исследований. Изучение ассоциации между принадлежностью к определённому полу и выявлением неэквивалентных результатов исследований БЭ аторвастатина, выполнили, используя критерий χ2 с поправкой Йейтса для чего построена таблица сопряженности (см. таблицу 29). Анализ влияния фактора гендерной принадлежности на частоту результатов выявления доверительных интервалов, не укладывающихся в диапазон 80,00-125,00 %, показал отсутствие статистически значимой взаимосвязи (χ2=0,485; р=0,487).

Таблица 29. Ассоциация между полом субъектов и частотой выявления не биоэквивалентных

результатов исследований аторвастатина.

Примечание: n – количество наблюдений.

Симуляционные 90% доверительные интервалы для 6 исследований воспроизведённых препаратов аторвастатина с определением активного метаболита продемонстрировали неэквивалентность в 1 исследовании у мужчин (17%) и в 3 у женщин (50%). Изучение ассоциации между принадлежностью к определённому полу и выявлением неэквивалентных результатов исследований БЭ, выполнили, используя точный критерий Фишера, для чего построена таблица сопряженности аналогично таблице 29. Анализ влияния фактора гендерной принадлежности на частоту результатов выявления доверительных интервалов, не укладывающихся в диапазон

80,00-125,00 %, показал отсутствие статистически значимой взаимосвязи (Fр=0,303; р>0,05).

Препараты аторвастатина могут быть включены в Перечень высоковариабельных лекарственных средств (Приложение №3), что требует применения подхода с масштабированием границ БЭ в исследовании с повторным дизайном.

При планировании и оценке результатов исследований БЭ аторвастатина следует руководствоваться принципами, описанными в Приложении №2.

Ловастатин.

Ловастатин - гиполипидемическое средство, селективный ингибитор ГМГ-КоА-

редуктазы. Максимальная концентрация в плазме крови достигается через 2-4 часа после приема внутрь, прием с пищей увеличивает биодоступность на 30%, период полувыведения составляет

3часа16.

Всилу того, что препараты ловастатина не пользуются широкой известностью, а также их

16 Медостатин®. Инструкция по медицинскому применению [Электронный ресурс] // Государственный реестр лекарственных средств. URL: https://grls.rosminzdrav.ru/InstrImg/0001421332/%D0%9F_N012832_01[2012]_0.pdf (дата обращения: 11.05.2020).

118

эффективность и безопасность уступает более современным статинам, на рынке в России зарегистрированы 6 препаратов. Референтным препаратом указан неоригинальный препарат Медостатин®. Согласно архиву ФГБУ «НЦЭСМП» Минздрава России доступны 3 исследования БЭ ловастатина.

Анализ показал результатов исследований показал, что исследования были выполнены в стандартном простом перекрёстном дизайне. Препаратом сравнения в двух исследованиях был препарат Мевакор®, в одном исследовании Ловастерол. Подробная информация о дозах, временных точках, периоде отмывки, биоаналитической методике и НПКО метода определения ловастатина представлены в Приложении №1.

В результате анализа значений концентраций ловастатина и его метаболита были рассчитаны ФК параметры Cmax, AUC0-t, tmax (см. таблицу 30) и внутрииндивидуальная вариабельность параметров Cmax, AUC0-t (см. таблицу 31).

Таблица 30. Усредненные фармакокинетические параметры ловастатина и активного метаболита.

Примечание: Cmax – максимальная концентрация в крови; AUC0-t – площадь под кривой «концентрация время» в интервале времени от 0 до момента t отбора последней пробы крови; tmax – время достижения максимальной концентрации; T – исследуемый препарат; R – референтный препарат; Mean – среднее арифметическое; SD – стандартное отклонение.

Рисунок 20.

Усредненные фармакокинетические профили ловастатина.

Примечание: фармакокинетические профили ловастатина воспроизведенного (T) и референтного (R) препаратов.

119

Рисунок 21. Усредненные фармакокинетические профили активного метаболита ловастатина.

Примечание: фармакокинетические профили активного метаболита ловастатина воспроизведенного (T) и референтного (R) препаратов.

Полученные результаты позволяют судить о том, что tmax ловастатина находиться в диапазоне 1,5-2,5 часов после приема, средние значения Cmax находились на уровне 12 нг/мл.

Таким образом, при выборе схемы забора образцов крови следует планировать более частый отбор в интервале времени 1,5-2,5 часа с целью получения наиболее точных значений

Cmax. Аналитическую методику определения ловастатина следует планировать с учетом НПКО не более 0,6 нг/мл (5% от 12 нг/мл).

Для определения метаболита ловастатина следует ориентироваться на значения tmax в

диапазоне 2-4 часов; средние значения Cmax находились на уровне 23 нг/мл, соответственно можно предположить, что НПКО аналитического метода не должно превышать 1,15 нг/мл.

Период полувыведения ловастатина, по данным референтного препарата, составляет 3

часа, поэтому при выборе точек забора образцов крови для ФК анализа препаратов с немедленным высвобождением следует учитывать общую длительность около 24 часов. Более частый отбор образцов крови следует планировать в диапазоне времени достижения Сmах

исходного соединения около 1,5-2,5 часа и метаболита 2-4 часа. Период отмывки с учетом длительности периода полувыведения должен быть 7 дней (общепринятый минимальный период отмывки в исследованиях биоэквивалентности).

Количество субъектов, включённых в статистический анализ параметров ФК, составило

76, из которых 72% составили субъекты мужского пола (см. таблицу 32). Рассчитанные коэффициенты внутрииндивидуальной вариабельности Cmax и AUC0-t ловастатина и метаболита

– β-гидроксикислота ловастатина представлены в таблице 31. Показано, что в 2 исследованиях показана высокая внутрииндивидуальная вариабельность, по крайней мере, одного из фармакокинетических параметров. Анализ метаболита выявил высокую внутрииндивидуальную вариабельность Cmax и AUC0-t в 1 исследовании.

120