Andreyanov ON
.pdfТаблица 32 – Показатель распределения личинок трихинелл естественно инвазированных животных
|
|
|
Семейства животных (Латинское название) |
|
||||||
Группы мышц |
|
псовые (Canidae) |
|
|
куньи (Mustelidae) |
|
||||
Лисица |
Енотовидная собака |
Куница лесная |
Куница каменная |
|||||||
|
||||||||||
|
лич. /г |
% |
лич. /г |
% |
лич. /г |
|
% |
лич. /г |
% |
|
Мышцы головы |
12,2±5,38 |
13,9 |
39,7±10,78 |
24,4 |
8,5±3,08 |
|
16,7 |
50,5±10,82 |
21,9 |
|
Мышцы шеи |
12,2±2,73 |
13,9 |
21,8±4,86 |
13,4 |
6,0±2,45 |
|
11,8 |
53,5±4,65 |
23,2 |
|
Мышцы |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
плечевого |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
пояса и |
23,1±3,69 |
26,4 |
37,8±11,27 |
23,23 |
14,5±5,9 |
|
28,6 |
59,7±9,71 |
25,8 |
|
передней |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
конечности |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Мышцы |
13,0±2,64 |
14,9 |
24,0±6,93 |
14,7 |
5,2±3,54 |
|
10,3 |
17,3±17,43 |
7,5 |
|
туловища |
|
|||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
Мышцы таза и |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
задней |
24,3±4,37 |
27,8 |
39,4±7,79 |
24,2 |
16,6±7,09 |
|
32,8 |
50,0±10,37 |
21,6 |
|
конечности |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Мышцы корня |
2,8±0,17 |
3,2 |
4 |
2,4 |
0 |
|
- |
11 |
4,8 |
|
хвоста |
|
|||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Многие ученые объясняют биологический смысл и физиологию расселения новорожденных личинок трихинелл тем, что ткань определенной группы мышц хорошо кровоснабжена, преимущественно сильно насыщена кислородом и миоглобином. Исследования Б. В. Ромашова и других (2006), Н.
А. Вагина и Н. С. Малышевой (2012) согласуются с данныи наших исследований. Авторы регистрировали максимальное количество личинок трихинелл T. spiralis в мышцах ножек диафрагмы кабанов, корня языка,
массетере, сгибателях и разгибателях конечностей. О.В. Масленникова (2012)
описывает максимально пораженные мышцы у лесных куниц - межчелюстные,
подъязычные мышцы, диафрагма и мышцы задних конечностей. Минимальное количество личинок, по данным автора, локализуется в жевательной,
межреберной и длиннейшей мышцах спины. Сведения по распределению личинок трихинелл в тушках животных важны для специалистов,
занимающиеся изучением их биологических особенностей, экологией гельминта рода Trichinella, а также ветеринарно-санитарных экспертов при диагностировании животных на трихинеллез.
171
Особенности распределения личинок капсулообразующих трихинелл в поперечнополосатой мускулатуре шкур (прирези) естественно зараженных плотоядных животных изучены нами на примере 6 обыкновенных лисиц и 1
лесной куницы (О.Н. Андреянов, 2013а). В таблице 33 представлены результаты оценки относительной численности личинок трихинелл в отдельных мышцах мездры шкур.
Таблица 32 - Интенсивность инвазии в отдельных группах мышц мездры шкурок плотоядных животных
|
|
Вид шкурки |
|
||
Название мышцы - латинское |
Лисица обыкновенная |
Куница лесная |
|||
название мускула |
ИИ, экз. /г |
Относительный |
ИИ, |
Относительный |
|
|
показатель, % |
экз. /г |
показатель, % |
||
|
|
||||
1. Мышцы головы (мимическая мускулатура) |
|
||||
Круглая мышца рта (губ) - |
1,2±0,34 |
6,7 |
2 |
9,5 |
|
musculus orbicularis oris |
|||||
|
|
|
|
||
Подбородочная мышца - m. |
0,8±0,41 |
6,7 |
- |
- |
|
mentalis |
|||||
|
|
|
|
||
Скуловая мышца - m. |
2,2±0,80 |
13,3 |
3 |
14,3 |
|
zygomaticus |
|||||
|
|
|
|
||
Подкожная мышца губ - m. |
3,1±0,30 |
20 |
4 |
19 |
|
subcutaneus labiorum |
|||||
|
|
|
|
||
Наружная щечная мышца - m. |
2,0±0,48 |
13,3 |
2 |
9,5 |
|
malaris |
|||||
|
|
|
|
||
Всего: |
- |
60 |
- |
52,3 |
|
2. Подкожные мышцы шеи и плечевого пояса |
|
||||
Подкожная мышца шеи - m. |
1,1±0,21 |
6,7 |
3 |
14,3 |
|
subcutaneus сolli |
|||||
|
|
|
|
||
Лопаточноплечевая кожная |
|
|
|
|
|
мышца - m. subcutaneus |
2,3±0,85 |
13,3 |
- |
- |
|
scapulohumeralis |
|
|
|
|
|
Всего: |
- |
20 |
- |
14,3 |
|
3. Подкожные мышцы туловища |
|
|
|||
Большая подкожная мышца - m. |
3,0±0,92 |
20 |
7 |
33,3 |
|
subcutaneous maximus |
|||||
|
|
|
|
||
Всего: |
- |
20 |
- |
33,3 |
На основании исследования поперечнополосатой мускулатуры подкожной клетчатки шкур зверей, естественно инвазированных трихинеллами,
установлено, что личинки неравномерно распределяются в различных группах мышц. Максимальная доля личинок трихинелл сосредоточена в подкожных мышцах головы и составляет 60% у лисиц и 52,3% у куницы. Далее следуют
172
мышцы туловища – 20% и 33,3% соответственно (рис. 35 и 36). Минимальное количество личинок трихинелл отмечено в подкожных мышцах шеи и плечевого пояса, относительный показатель интенсивности их инвазии составил 20% и 14,3% соответственно.
Рисунок 35. Большая подкожная мышца |
Рисунок 36. Личинка трихинелл в |
|
срезе большого подкожного |
||
спины на шкурке лисицы (оригинал) |
||
мускула. Увеличение х80 (оригинал) |
||
|
Для сравнения интенсивности инвазии мышц тушек и мышц мездры мы определили количество личинок трихинелл в общей массе мездры шкур и в наиболее поражаемых мышцах тушек животных - мышцах задней конечности
(табл. 34). В результате исследований выяснили, что ИИ личинками трихинелл мышц задней конечности тушки лисицы немного ниже ИИ подкожных мышц мездры шкурки: 3,7 личинки против 4,2 личинок в 1 грамме мышечной ткани.
У лесной куницы показатель ИИ подкожных мышц был иной - в 7 раз меньшей по сравнению с ИИ задней конечности тушки животного.
Среднее количество личинок трихинелл в общем объеме мышечной ткани мездры шкур лисиц при вычислении составляло 207,5±190 лич. /г, а куницы –
72 лич./г.
Таким образом, в мышечном слое мездры шкурок у промысловых пушных зверей, естественно заразившихся трихинеллезом, наиболее пораженными личинками трихинелл оказались мышцы головы: скуловая мышца, подкожная
173
мышца губ и наружная щечная мышца. Наименее инвазированы личинками гельминта круглая мышца рта, подбородочная мышца, подкожная мышца шеи.
Последовательность групп мышц, отражающая снижение количества в них личинок трихинелл, меняется в следующем направлении: мышцы головы,
подкожные мышцы туловища, подкожные мышцы шеи и плечевого пояса.
Средний показатель ИИ мездры шкуры обыкновенной лисицы составил 4,2
личинки, а лесной куницы – 9 личинок в 1 грамме мышц, при ИИ мышц передней конечности тушки лисицы 3,7 лич. /г, а куницы – 63 лич. /г.
Таблица 34 - Количество личинок трихинелл у промысловых плотоядных
Видовая |
Масса |
ИИ в 1 г мышц |
Масса |
ИИ в 1 г |
принадлежность |
навески, |
задней |
мездры, |
мездры |
тушки и шкуры |
г |
конечности |
г |
шкурки |
|
4 |
2,1 |
48 |
2,3 |
|
5 |
4 |
57 |
7,4 |
Лисица |
5 |
2,2 |
32 |
1 |
обыкновенная |
4 |
2 |
38 |
1,1 |
|
6 |
7 |
76 |
6,1 |
|
3 |
5 |
24 |
7,1 |
Среднее значение |
4,5±1,05 |
3,7±2,0 |
45,8±18,9 |
4,2±3,0 |
Куница лесная |
3 |
63 |
8 |
9 |
|
|
|
|
|
Основным местом локализации трихинелл в организме хозяина является поперечнополосатая мускулатура. Инкапсулированные формы гельминта регистрируют в массетерах, мышцах глотки, языка, холки, межреберных мышцах и в других органах, имеющих мышечную ткань (Ю.В. Кушнарева,
2002). Больше всего личинки гельминта локализуются в ножках диафрагмы,
большой жевательной мышце, мышцах передней и задней конечностей.
Констатируя эту особенность в начале XX века, зарубежные ученые предложили метод компрессорной трихинеллоскопии для исследования мышечной ткани на наличие личинок трихинелл. В условиях мясного производства, полевых и секционных исследований Н.Е. Косминковым (1959),
174
А.В. Меркушевым (1955б), В. А. Калюсом (1952) были найдены личинки гельминта в других мышцах, но не обнаружены в ножках диафрагмы. На закономерное или случайное распределение личинок трихинелл в мышечной ткани указывают С. Н. Белозеров, О. Б. Жданова (2000), Н. А. Вагин, Н. С.
Малышева (2012), О. Б. Жданова, А. В. Успенский (2002), Б. В. Ромашов и др. (2006), А. Я. Сапунов и др. (1999) и иные ученые. В зависимости от стороны тела животного наблюдается и различная локализация личинок трихинелл (О.
В. Масленникова, 2012). Навески проб мышечной ткани одних и тех же конечностей (грудных или тазовых), взятых с разных сторон тела тушки лесной куницы, имели различную интенсивность инвазии (разница в 2,5 – 5,1 раза).
Необходимо отметить, что при изучении интенсивности расселения
(распределения) личинок трихинелл в мышцах разных видов животных могут быть получены неоднородные данные. Поэтому, мы считаем, что при обсуждении данного вопроса следует говорить об общем характере, а не о закономерности распределения личинок трихинелл в мышцах животных.
4.4.3. Изучение возможности интраутеринного (внутриутробного) и
лактогенного путей передачи инвазии
В экспериментальных исследованиях по внутриутробной и лактогенной передачи трихинеллезной инвазии использовали два вида возбудителя - Т. spiralis и Т. nativa, выделенные от куницы и обыкновенной лисицы, и
пассируемые в лабораторных условиях на белых беспородных крысах и мышах.
Для наработки инвазионного материала заразили лабораторных грызунов личинками трихинелл в дозе 5 экземпляров на 1 грамм живой массы животного по методике Ф.К. Скворцовой (2006). Отработка возможных путей передачи личинок гельминта была проведена на белых беспородных и инбредных мышах линий DBA (масть - серая) и C57BL6 (масть - черная), белых крысах линии
Wistar и кроликах породы Советская Шиншилла.
В начале исследований провели проверку лактогенного пути передачи трихинеллезной инвазии. Для этого взяли самок вышеперечисленных грызунов
175
на последних днях беременности (за 1 – 3 суток до появления потомства).
Личинок трихинелл обоих видов ввели через рот с помощью молочного катетера с канюлей на конце и многоразового инсулинового шприца в следующих дозах: мышам 100 ± 2 личинок на голову (лич./гол.) (табл. 35),
крысам - 5 личинок на 1 грамм веса животного, кроликам - 4050 - 4210 лич./гол. (табл. 36). Для контроля инвазирования использовали небеременных самок животных.
Потомство, полученное от мышей, в количестве 83 голов усыпили эфирным наркозом в 45-дневном возрасте. Тушки мышат подвергли компрессорному трихинеллоскопическому исследованию (для диагностики взяли только диафрагму и 1 – 2 среза массетера) и перевариванию в ИЖС (полностью тушка новорожденного). При трихинеллоскопическом исследовании новорожденных мышат не зарегистрировали личинок трихинелл. У самок, инвазированных возбудителями Т. spiralis и Т. nativa, компрессорно обнаружены от 1 до 12 трихинелл в срезе мышц. Методом искусственного переваривания из тушек самок белых беспородных мышей было выделено 18 800 личинок возбудителя Т. spiralis и 10 700 личинок Т. nativa. Из тушек мышей линии DBA выделено 26 100 и 14 700 личинок, а из тушек инбредных мышей линии C57BL6 - 21 400 и 19 700 личинок соответственно.
Потомство белых крыс было также усыплено эфирным наркозом на 47-ые сутки опыта. Тушки крысят после снятия шкур исследовали методом компрессорной трихинеллоскопии и биохимическим методом. При исследовании новорожденных крысят не зарегистрировали личинок трихинелл. В тушках самок, инвазированных возбудителями трихинеллеза Т. spiralis и Т. nativa, личинок трихинелл регистрировали от 3 до 21 личинки в одном срезе мышечной ткани методом компрессорной трихинеллоскопии. Методом искусственного переваривания из тушек крыс выделилось 124 300 личинок трихинелл вида Т. spiralis и 21 000 личинок Т. nativa.
В эксперименте с кроликами была аналогичная картина. Тушки крольчат, полученных от самок инвазированных Т. spiralis и Т. nativa, оказались свободными от личинок трихинелл. А мышечная ткань самок содержала 158000
176
Таблица 35 - Обнаружение личинок трихинелл у новорожденного потомства грызунов (исследование лактогенного пути передачи инвазии)
|
Вид и доза |
Количество |
Оценка наличия личинок трихинелл у |
Оценка наличия личинок трихинелл у |
|||
Вид беременной |
новорожденного потомства |
инвазированных самок |
|||||
введения личинок |
полученного |
||||||
самки, |
|
методом |
|
методом |
|||
трихинелл на |
потомства, |
компрессорным |
компрессорным |
||||
голов в опыте |
искусственного |
искусственного |
|||||
голову |
голов |
методом |
методом |
||||
|
переваривания |
переваривания |
|||||
|
|
|
|
|
|||
Мышь белая |
Т. spiralis, |
18 |
0 |
0 |
+ |
18 800 ± 4 380 |
|
100 ± 2 |
|||||||
беспородная, |
|
|
|
|
|
||
Т. nativa, |
|
|
|
|
|
||
6 |
22 |
0 |
0 |
+ |
10 700 ± 2 150 |
||
100 ± 2 |
|||||||
|
|
|
|
|
|
||
Мышь белая |
Т. spiralis, |
- |
- |
- |
+ |
15 300 ± 2 360 |
|
беспородная, |
100 ± 2 |
||||||
|
|
|
|
|
|||
(контроль, |
Т. nativa, |
|
|
|
|
|
|
небеременная самка), |
- |
- |
- |
+ |
8 100 ± 1 490 |
||
100 ± 2 |
|||||||
6 |
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
||
|
Т. spiralis, |
8 |
0 |
0 |
+ |
26 100 ± 3 450 |
|
Мышь линии DBA, |
100 ± 2 |
||||||
|
|
|
|
|
|||
6 |
Т. nativa, |
11 |
0 |
0 |
+ |
14 700 ± 2 990 |
|
|
100 ± 2 |
||||||
|
|
|
|
|
|
||
Мышь линии DBA, |
Т. spiralis, |
- |
- |
- |
+ |
22 200 ± 4 120 |
|
(контроль, |
100 ± 2 |
||||||
|
|
|
|
|
|||
небеременная самка), |
Т. nativa, |
- |
- |
- |
+ |
10 900 ± 2 110 |
|
6 |
100 ± 2 |
||||||
|
|
|
|
|
|||
Мышь линии |
Т. spiralis, |
14 |
0 |
0 |
+ |
21 400 ± 2 830 |
|
100 ± 2 |
|||||||
C57BL6, |
|
|
|
|
|
||
Т. nativa, |
|
|
|
|
|
||
6 |
10 |
0 |
0 |
+ |
19 700 ± 3 480 |
||
100 ± 2 |
|||||||
|
|
|
|
|
|
||
Мышь линии |
Т. spiralis, |
- |
- |
- |
+ |
20 100 ± 2 320 |
|
C57BL6, (контроль, |
100 ± 2 |
||||||
|
|
|
|
|
|||
небеременная самка), |
Т. nativa, |
- |
- |
- |
+ |
18 900 ± 2 750 |
|
6 |
100 ± 2 |
||||||
|
|
|
|
|
177
Таблица 36 - Обнаружение личинок трихинелл у новорожденного потомства грызунов (исследование лактогенного пути передачи инвазии)
|
Вид и доза |
|
Оценка наличия личинок |
Оценка наличия личинок |
||||
|
Количество |
трихинелл у новорожденного |
трихинелл у инвазированных |
|||||
Вид беременной |
введения |
|||||||
полученного |
потомства |
|
самок |
|||||
самки, |
личинок |
|
||||||
потомства, |
|
методом |
|
|
методом |
|||
голов в опыте |
трихинелл на |
компрессорным |
компрессорным |
|||||
голов |
искусственного |
искусственного |
||||||
|
голову |
методом |
методом |
|
||||
|
|
переваривания |
|
переваривания |
||||
|
|
|
|
|
|
|||
Крыса белая |
Т. spiralis, |
26 |
0 |
0 |
+ |
|
124 300 ± 5 100 |
|
1100 ± 60 |
|
|||||||
линии Wistar, |
|
|
|
|
|
|
||
Т. nativa, |
|
|
|
|
|
|
||
6 |
21 |
0 |
0 |
+ |
|
21 000 ± 3 100 |
||
1100 ± 60 |
|
|||||||
|
|
|
|
|
|
|
||
Крыса белая |
Т. spiralis, |
- |
- |
- |
+ |
|
101 900 ± 5 100 |
|
линии Wistar, |
1100 ± 60 |
|
||||||
|
|
|
|
|
|
|||
6 (контроль, |
Т. nativa, |
|
|
|
|
|
|
|
небеременные |
- |
- |
- |
+ |
|
16 200 ± 2 400 |
||
1100 ± 60 |
|
|||||||
самки) |
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
||
Кролик породы |
Т. spiralis, |
7 |
0 |
0 |
+ |
|
158 000 |
|
Советская |
4050 |
|
||||||
|
|
|
|
|
|
|||
Шиншилла, |
Т. nativa, |
4 |
0 |
0 |
+ |
|
11 730 |
|
2 |
4210 |
|
||||||
|
|
|
|
|
|
|||
Кролик породы |
Т. spiralis, |
- |
- |
- |
+ |
|
90 000 |
|
Советская |
4010 |
|
||||||
|
|
|
|
|
|
|||
Шиншилла, |
|
|
|
|
|
|
|
|
2 (контроль, |
Т. nativa, |
- |
- |
- |
+ |
|
9 430 |
|
небеременные |
4180 |
|
||||||
|
|
|
|
|
|
|||
самки) |
|
|
|
|
|
|
|
178
личинок возбудителя Т. spiralis и 11 730 личинок Т. nativa.
Нами отмечено, что в контрольной группе животных у всех видов грызунов, которые были холостыми, потенциал инвазированности трихинелл обоих видов немного меньше, чем у опытных самок. Возможно, это связано со снижением иммунитета у лактирующих самок.
А.Я. Сапунов (2000), А.А. Дубницкий (1965), J. Cui с соавторами (2006)
также не регистрировали лактогенный путь передачи трихинеллезной инвазии при экспериментальном заражении беременных на поздней стадии и лактирующих самок лабораторных грызунов и домашних плотоядных животных.
С целью изучения вопроса интраутеринного (внутриутробного) заражения эмбрионов животных трихинеллами через плаценту матери плода были проведены опыты на самках лабораторных мышей, крыс и кроликов на разных стадиях беременности. Для этого исследовали самок второй половины беременности. Всем подопытным животным с помощью катетера и шприца через рот ввели личинок трихинелл: Т. spiralis и Т. nativa (мышам - 100±2,
крысам - 1100±60, кроликам – 4150 и 4010 экз.). На 2-ой недели после инвазирования трихинеллами Т. spiralis был отмечен падеж 2 самок белых крыс.
Затем, через 45 суток после рождения потомства, 35 мышат, 19 крысят и 14
крольчат усыпили и подвергли исследованию методом компрессорной трихинеллоскипии и переваривания. Личинки гельминта в пробах мышц не были выявлены, а все взрослые самки оказались интенсивно инвазированы личинками трихинелл (табл. 37).
Трансплацентраный путь инвазирования новорожденного потомства грызунов и плотоядных животных изучали А.Я. Сапунов (2000), А.А.
Дубницкий (1965), Р. Webster и C.M.O. Kapel (2000), J. Cui и другие (2006).
Отечественные авторы зарегистрировали отрицательный результат у лабораторных мышей, крыс, собак и кошек. В тоже время Р. Webster, C.M.O. Kapel (2000), J. Cui с соавторами (2006) установили трансплацентарную
179
Таблица 37 - Обнаружение личинок трихинелл у новорожденного потомства грызунов (исследование трансплацентарного пути передачи инвазии)
|
Вид и доза |
|
Оценка наличия личинок |
Оценка наличия личинок |
||||
|
Количество |
трихинелл у новорожденного |
трихинелл у инвазированных |
|||||
Вид беременной |
введения |
|||||||
полученного |
потомства |
|
самок |
|||||
самки, |
личинок |
|
||||||
потомства, |
|
методом |
|
|
методом |
|||
голов в опыте |
трихинелл на |
компрессорным |
компрессорным |
|||||
голов |
искусственного |
искусственного |
||||||
|
голову |
методом |
методом |
|
||||
|
|
переваривания |
|
переваривания |
||||
|
|
|
|
|
|
|||
Мышь белая |
Т. spiralis, |
14 |
0 |
0 |
+ |
|
18 150 ± 3 250 |
|
100 ± 2 |
|
|||||||
беспородная, |
|
|
|
|
|
|
||
Т. nativa, |
|
|
|
|
|
|
||
6 |
21 |
0 |
0 |
+ |
|
9 650 ± 3 110 |
||
100 ± 2 |
|
|||||||
|
|
|
|
|
|
|
||
Крыса белая |
Т. spiralis, |
7 |
0 |
0 |
+ |
|
117 800 ± 3 300 |
|
1100 ± 60 |
|
|||||||
линии Wistar, |
|
|
|
|
|
|
||
Т. nativa, |
|
|
|
|
|
|
||
4 |
12 |
0 |
0 |
+ |
|
18 750 ± 2 400 |
||
1100 ± 60 |
|
|||||||
|
|
|
|
|
|
|
||
Кролик породы |
Т. spiralis, |
5 |
0 |
0 |
+ |
|
131 400 |
|
Советская |
4150 |
|
||||||
|
|
|
|
|
|
|||
Шиншилла, |
Т. nativa, |
10 |
0 |
0 |
+ |
|
9 830 |
|
2 |
4010 |
|
||||||
|
|
|
|
|
|
180