Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:

Andreyanov ON

.pdf
Скачиваний:
28
Добавлен:
25.03.2016
Размер:
7.12 Mб
Скачать

Устойчивость мышечных личинок трихинелл к низким температурам была изучена при температуре минус 12±2°С, 24±2°С и 70±2°С в бытовых холодильниках марки Liebherr (Comfort) и биомедицинском морозильнике модели MDF U-3086 S.

Трансплацентарную (вертикальную) и лактогенную передачу личинок трихинелл проводили на беременных самках лабораторных животных. В определенные сроки беременным животным вводили личинок трихинелл, а через 45 дней после рождения новорожденное потомство исследовали на наличие мышечных личинок гельминта.

Физиологическое состояние личинок трихинелл изучали по Методике определения жизнеспособности и инвазионности личинок трихинелл (Ф.К. Скворцова и др., Москва, 2009), исследуя видимые морфологические показатели личинок возбудителя и биологическую пробу на лабораторных грызунах.

Видовую принадлежность насекомых и их личинок устанавливали по определителям насекомых Европейской части России (Г.Я. Бей-Биенко, 1969; Н.Н. Плавильщиков, 1994). Для определения транзитной передачи личинок трихинелл имаго насекомых и их личинок, собранных с трупов инвазированных животных, исследовали по методическому пособию Г.А. Котельникова (1991, 1986). Практические методы сбора и учета насекомых в различных биотопах на протяжении теплого периода года проводили по учебно-полевому пособию Н.Г. Кременецкого (1959) с помощью энтомологических игл и пинцетов (рис. 13 и 14). Препарирование насекомых проводили после аутамназии хлороформом (Е.И. Лукин, 1981). Индивидуальное заражение насекомых, определение локализации и периода нахождения в кишечной трубке, выделение личинок трихинелл проводили индивидуально в пластиковых пробирках объемом 50 – 60 мл или контейнерах для переноски мелких животных (рис. 15). Сезонную активность детритофагов изучали на протяжении теплого периода года (с апреля по ноябрь или до наступления постоянных морозов).

При исследовании методом искусственного пептолиза использовали пепсины отечественного и зарубежного производства. Эффективность методов

91

определяли на охлажденной и после технологической обработки (горячее копчение) мышечной ткани экспериментально инвазированных лабораторных животных (беспородных белых крысах и свиньях крупной белой породы).

Рисунок 13. Сбор и учет личинок

Рисунок 14. Препарирование кишечной

детритофагов (оригинал)

трубки мертвоеда большого

 

(Necrodes littoralis) (оригинал)

Рисунок 15. Контейнеры с заложенными в них трупами лабораторных животных (оригинал)

92

Искусственный желудочный сок готовили по рецептуре согласно МУК 4.2.2747-10 и Методическим указаниям по лабораторной диагностике трихинеллеза животных. С каждым из пепсинов указанных наименований отдельно готовили искусственный желудочный сок по методике, предложенной В.А Владимировой (1965) и предусматривающей в весовом отношении 1% соляной кислоты (уд. вес. 1,175, «ЧДА» ГОСТ 3118-77, партия 12), 3% пепсина на 100 мл воды. Затем приготовленный ИЖС заливали в стеклянную колбу с фаршем, содержащим личинки трихинелл (мясо, пропущено через мясорубку с диаметром отверстий 3-4 мм). Соотношение сока к массе фарша брали 25:1 и выдерживали в термостате при температуре 37±2ºС и 42±2ºС в аппарате «Гельми». По истечении определенного времени проводили фильтрацию «перевара» и определяли массу непереваренного остатка мышечной ткани. Опыты проводили по известной классической методике и на усовершенствованном аппарате «Гельми». Результаты пептолиза оценивали по разнице навески мясного фарша до постановки биохимической реакции и после, а также учитывали выход мышечных личинок трихинелл из мышечной ткани.

Обезвреживание трихинеллезного материала в лаборатории проводили с помощью метода глубокого замораживания в биомедицинском морозильнике модели MDF (SANYO): закладку трупов животных проводили при температуре минус 70±2°С на протяжении 24 часов. Стерилизацию инструментов, посуды и рабочего инвентаря выполняли в вертикальном программируемом автоклаве модели MLS (SANYO) в режиме АI (при температуре в камере 120±2ºС,

времени экспозиции 45 мин. и рабочем давлении 0,11 МПа). В полевых условиях инактивацию инвазионного материала проводили путем сжигания трупов и мездры шкур на ветеринарном участке (в Нарофоминском районе Московской области) в трупосжигательной печи (крематоре) типа УД50.

Лабораторные столы, предметные столики, часовые стекла, объективы микроскопа, перчатки, патологоанатомический и хирургический инвентарь протирали салфеткой, смоченной 70% этанолом. Работу с инвазионным

93

материалом проводили в спецодежде (в халате, резинных сапогах и перчатках,

хлопчатобумажных рукавицах, фартуке, марлевой повязке). Во время работы с потенциально зараженным материалом запрещалось курить, принимать воду и пищу.

Микроморфометрические исследования трихинелл и измерения с микрофотографированием объектов в препаратах проводили с помощью микроскопов модели Motic, цифрового стереоскопического микроскопа Nicon YS 100, микровизора Vizo-101 при увеличениях х10 - 2000.

Статистическую обработку результатов и полученных данных проводили общепринятыми методами (Г.Ф. Лакин, 1990). Некоторые данные были подвергнуты математической и статистической обработке по В.П. Боровикову

(2001) с использованием персонального компьютера и программного обеспечения «Statistica», «MEDSTAR», OpenOffice.org. Для обработки экспериментальных данных использовался параметрический критерий t

(Стъюдента).

94

ГЛАВА IV. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

ЭПИЗООТОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ПРИРОДНЫХ ОЧАГОВ ТРИХИНЕЛЛЕЗНОЙ ИНВАЗИИ В ЦЕНТРАЛЬНОМ РЕГИОНЕ РОССИИ

4.1. Современное состояние изученности природно-очаговых гельминтозоонозов Центрального региона России

Исследуя диких хищных млекопитающих семейства Псовых (Canidae) на территории Центрального региона нами зарегистрировано 24 вида паразитов,

из которых 13 (54,7%) являются зоонозами (О.Н. Андреянов и др., 2009; О.Н.

Андреянов, 2013в). Собаки городской популяции заражены 10 видами паразитов (у бродячих и беспородных собак обнаружено 9 видов, у

декоративных – 4, служебных – 8, охотничьих – 10), среди которых 5 видов зоонозы.

Плотоядные животные - источник опасных гельминтозоонозов,

являющихся важнейшей медико-ветеринарной и общественной проблемой Центрального региона России. Борьбу с ними необходимо вести комплексно и согласованно, объединяя усилия научно-практических центров, различных министерств и органов исполнительной власти, правопорядка и населения.

Невысокая интенсивность инвазии животных городской популяции обеспечивается проведением лечебных и профилактических противопаразитарных обработок. Следует строго соблюдать требования ветеринарного законодательства, что позволяет сохранить здоровье людей и обеспечить качество и безопасность выпускаемой продукции.

Что касается трематодозов промысловых хищников, то на исследуемой территории зарегистрировано 3 вида возбудителя гельминтозооноза семейства

Opisthorchidae: Opisthorchis felineus, Pseudamphistomum truncatum, Metorchis albidus, имеющих эпидемическое и эпизоотическое значение. Изучая карповых рыб в водоемах бассейна р. Оки (р. Пра), метацеркарии описторхид найдены у

95

речных рыб - язя и плотвы в Спасском районе Рязанской области (А.И. Новак,

М.Д. Новак, 2012).

Новые данные получены в отношении зоонозных цестодозов, обнаруженных на территории Московской и Рязанской областей. К настоящему времени отмечен опасный возбудитель цестодоза Echinococcus multilocularis у диких плотоядных, инвазионные яйца которого найдены на шкурах пушных зверей. Биологический цикл, как известно, реализуется по диксенной схеме (двуххозяинный цикл развития). В Центральном регионе России дефинитивными хозяевами являются хищные млекопитающие (лисица, енотовидная собака), промежуточными – грызуны (ондатра, лесная мышовка).

При исследовании туш пушных зверей в течение 2002 – 2013 гг. был обнаружен возбудитель Dirofilaria repens в подкожной клетчатке обыкновенных лисиц. Особую роль в циркуляции этой редкой инвазии играют трансмиссивные кровососущие двукрылые насекомые (комары родов Aedes и Culex).

Кроме того, на территории Рязанской области зарегистрированы гельминтозы, характерные для синантропного биоценоза, но циркулирующие как природно-очаговые в условиях природы. К подобным инвазиям можно отнести аляриоз (Alaria alata), фасциолез (Fasciola hepatica), токсокароз (Toxocara canis, Toxocara mystax) и другие. Возбудители перечисленных инвазий найдены у кабанов, волков, лисиц, куниц, горностаев (О.Н. Андреянов,

2013г, 2013д).

К настоящему времени недостаточно полно изложены эпизоотологические аспекты и эколого-биологические закономерности циркуляции недавно выявленных природно-очаговых инвазий у промысловых животных в Центральном регионе России. В частности, это касается возбудителей описторхидозов (Р.Т. Сафиуллин, С.К. Шибитов, 2012), филяриозов (В.Б. Ястреб, 2005), фасциолопсидоза (Н.А. Самойловская и др., 2013), альвеококкоза (S.V. Konyaev et al., 2013), трихинеллеза и других возбудителей зоонозов.

Природно-очаговые инвазии приобретают иную форму в связи с изменением окружающей среды. Антропогенное воздействие на биосферу

96

ведет к упрощению экосистем и составляющих их компонентов (А.В. Яблоков, С.А. Остроумов, 1983). В ходе трансформации экосистемы наблюдается снижение видового разнообразия гельминтов, и формируются специализированные, в смысле экологических связей, паразитарные системы.

На фоне антропопрессии нарушаются эволюционно сложившиеся взаимоотношения в паразитарных системах и формируются новые биоценотические связи. Поэтому изменяются условия циркуляции гельминтов,

их патогенность, вирулентность и инвазионность (Б.А. Астафьев, 1983).

Пути проникновения гельминтозоонозов являются контактными. Зоонозы формируются на границах естественных (природных) и трансформированных

(антропогенных) экосистем, например, при строительстве жилых комплексов на неосвоенных земельных участках. Наиболее распространенными вариантами изменения экосистемы считаются увеличение численности природно-очаговых гельминтозоонозов за счет поступления их возбудителей из агро- и

антропогенных экосистем и вселение в природные экосистемы на фоне антропопрессии новых видов гельминтов, ранее не регистрируемых. В новых экологических условиях эти виды могут стать основателями природных очагов,

выходить за пределы функционирования паразитарных систем, из-под естественного контроля и принимать агрессивный характер. Явления,

возникающие на фоне антропопессии, именуются «паразитарным загрязнением» (М.Д. Сонин и др., 1997), то есть проникновением в окружающую среду и последующим распространением (заражением хозяев и накоплением инвазионных элементов во внешней среде) паразитических организмов.

Распространение природной очаговости гельминтозоонозов обусловлено специфическими эколого-географическими особенностями региона.

Центральный регион России расположен на Восточно-Европейской равнине и охватывает 4 природно-климатических зоны, где находятся смешанные и широколиственные леса, лесостепь и степь. В его территориальные границы входят Валдайская, Смоленско-Московская и Среднерусская возвышенности, а

97

также Мещерская и Окско-Донская низменности. Ключевым фактором в формировании зоонозной гельминтофауны региона является существование обширной гидросистемы в виде рек Волги, Оки, Дона, Воронежа, Днепра,

Десны, Сейма, Западной Двины с прилегающими поймами, болотами и озерами. Поэтому географические особенности региона обуславливают очаговую циркуляцию гельминтозоонозных инвазий.

Следовательно, в настоящее время на территории региона активно формируются, локализуются и функционируют разнообразные природные очаги гельминтозоонозов. В связи со сложившимся социально-экономическим состоянием на исследуемой территории, миграцией населения и демографической ситуацией не исключено влияние природных очагов инвазий на эпидемическую обстановку. Тем самым представляется необходимым проведение комплексных эколого-биологические исследований, направленных на изучение закономерностей циркуляции возбудителей этих гельминтозов, и

создание соответствующей информационной базы для их мониторинга на региональном уровне.

Таким образом, на территории Центрального региона России формируется многочисленная группа природно-очаговых гельминтозоонозов, тесный контакт с возбудителями, которых может происходить у охотников, лесников,

строителей, рыбаков, сельских жителей, ученых, любителей животных,

природы и других категорий граждан. Для осуществления постоянного эколого-биологического мониторинга и изучения закономерностей циркуляции возбудителей этих гельминтозов требуется создание соответствующей информационной базы на региональном уровне.

4.1.1. Эколого-географический анализ циркуляции возбудителя

трихинеллеза в природном биоценозе

Об интенсивной циркуляции трихинеллезной инвазии в природном биоценозе свидетельствуют результаты собственных исследований разных

видов диких, охотничье-промысловых и условно-промысловых

98

млекопитающих (табл. 5 и 6). При установлении видовой принадлежности капсулообразующих трихинелл методом ПЦР-диагностики были идентифицировано 2 вида: Trichinella spiralis у енотовидной собаки, лесной куницы (Рязанская область) и барсука (Нижегородская область), T. nativa у

обыкновенной лисицы (Рязанская область).

Таблица 5 - Трихинеллезная инвазия промысловых животных в Центральном регионе России

Район проведения

Хозяева трихинелл

Вид возбудителя инвазии

исследований

 

 

 

 

 

Владимирская

Млекопитающие

род Trichinella,

неидентифицированный

область

семейства Псовые (Canidae)

капсулообразующий вид

 

 

 

 

 

 

Млекопитающие

род Trichinella,

Московская область

семейства Куньи

неидентифицированный

 

(Mustellidae)

капсулообразующий вид

 

 

 

Нижегородская

Млекопитающие

 

семейства Куньи

Trichinella spiralis

область

(Mustellidae)

 

 

 

 

 

 

 

Млекопитающие

Trichinella spiralis,

 

отряда Хищных (Carnivora)

T. nativa,

Рязанская область

семейства Псовые (Canidae),

неидентифицированные

 

семейства Куньи

капсулообразующие

 

(Mustellidae)

виды возбудителя

 

 

 

Врезультате трихинеллоскопических исследований животных, обитающих

в3-х районах Московской области (Орехово-Зуевском, Павлово-Посадском,

Дмитровском) инвазию обнаружили в Дмитровском районе у каменной куницы. Интенсивность инвазии составила 47 личинок капсулообразующего вида трихинелл в 1 грамме икроножной группы мышц.

В Нижегородской области выявлено наличие Trichinella spiralis в

мышечной ткани барсука, отстреленного в Выксунском районе охотниками.

99

Таблица 6 - Географическая характеристика районов распространения трихинеллезной инвазии

 

Эколого-географическая характеристика

 

Исследуемый

 

 

 

 

 

 

 

Наличие

район

География рельефа

Наличие поймы

Природная зона

трихинеллезной

 

 

 

 

инвазии

 

 

 

 

 

 

Владимирская область

 

 

 

 

 

 

 

Гусь-Хрустальный

Мещерская низменность

р. Бужа, р. Ревуха

Смешанные леса

+

 

 

 

 

 

 

Московская область

 

 

 

 

 

 

 

Орехово-Зуевский

Мещерская низменность

р. Клязьма

Смешанные леса

-

 

 

 

 

Павлово-Посадский

р. Москва

Широколиственных лесов

-

 

 

 

 

 

Дмитровский

Смоленско-Московская возвышенность

р. Клязьма

 

+

 

 

 

 

 

 

Нижегородская область

 

 

 

 

 

 

 

Выксунский

Мещерская низменность

р. Ока

Смешанные леса

+

 

 

 

 

 

 

Рязанская область

 

 

 

 

 

 

 

Касимовский

Мещерская низменность

р. Ока

Смешанные леса

+

 

 

 

Клепиковский

 

оз. Великое

 

+

 

 

 

 

 

Кораблинский

Среднерусская возвышенность

р. Проня (р. Ока)

 

-

 

 

 

 

Ухоловский

 

р. Мостья (р. Ока)

 

+

 

 

 

Лесостепная

 

Сапожковский

 

р. Пара (р. Ока)

+

 

 

 

Окско-Донская равнина

 

 

 

Сараевский

р. Пара (р. Ока)

 

+

 

 

 

 

 

 

 

Спасский

 

р. Пра (р. Ока)

 

-

 

 

 

 

 

Пителинский

Мещерская низменность

р. Ока

Смешанные леса

-

 

 

 

 

 

Путятинский

Окско-Донская равнина

р. Пара (р. Ока)

 

+

 

 

Лесостепная

 

Ряжский

 

р. Пара (р. Ока)

+

 

 

 

 

 

 

 

Чучковский

Мещерская низменность

р. Мокша (р. Ока)

 

+

 

 

 

 

 

Шацкий

Окско-Донская равнина

р. Пара (р. Ока)

Смешанные леса

+

 

 

 

 

Шиловский

 

р. Ока

Лесостепная

+

 

 

 

 

 

100

Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]