Andreyanov ON

В доказательство этого факта некоторые из авторов экспериментально инвазировали грызунов и насекомоядных животных трихинеллами в разных условиях (табл. 23). В результате опытов краснощекие суслики свободно инвазировались возбудителем трихинеллеза T. spiralis при скармливании им тушек животных, зараженных личинками трихинелл, как в лаборатории (100%

инвазирование), так и в полевых условиях (инвазирование на 4,22% и 18,75%)

(В.С. Крайняя, 1974). Исследования 628 европейских кротов в условиях заповедника в Ленинградской области дали отрицательный результат (Ю.А.

Березанцев, 1960).

Инвазирование животных трихинеллезом происходит в случае, если в кишечник попадает определенное количество личинок трихинелл, которое обеспечивает встречу самок с самцами и процесс оплодотворения. Например, у

свиньи и собаки для воспроизводства трихинеллезной инвазии минимальное количество разнополых личинок трихинелл должно составлять 50 и более (В.Д.

Зеленский, 1929), а у мышей - 6 и более. Следовательно, в природе для заражения микромаммалий от разлагающегося трупа млекопитающего или через насекомых-падальщиков (например, личинок падальных мух) животное должно проглотить мышечных личинок трихинелл или личинок гельминта,

освободившихся от капсул в пищеварительном тракте насекомых. Поедание беспозвоночных-трупоедов микромаммалиями должно происходить в большом количестве, что само по себе уже исключает частое заражение, особенно мелких зверьков (мышей, полевок, землероек). Из литературы известно, что при содержании кротов в неволе они свободно поедают инвазированную падальную мышечную ткань в земле даже при обилии дождевых червей (М.Я.

Беляева, 1957).

Из насекомоядных млекопитающих, имеющих важное значение в распространении трихинеллеза, следует отметить землероек, у которых обнаружена естественная зараженность трихинеллами (М.Я. Беляева, 1957; P. Nowosad, J. Lopaciuch, 2000). Землеройки наряду с личинками и взрослыми

151

Таблица 23 - Экспериментальные данные по участию микромаммалий в распространении трихинеллеза

152

насекомыми-трупоедами могут нападать на мелких грызунов (В.Г. Гепнер и др., 1950; Г.Г. Доппельмайер и др. 1951; С.И. Огнев, 1945; Ю.С. Лобачев ,1982).

Врагами землероек считаются многие животные, которым могут передаваться трихинеллы: ежи, кроты, кошки, ласки, горностаи, куницы, хорьки, выдры и другие хищники (В.Г. Гепнер и др., 1950; Г.А. Новиков 1956). К

полусинантропным (сезонная синантропия) видам животных относится малая бурозубка (Сrocidura suaveolens), которая обитает в надводных сельских постройках, главным образом, в холодный период года. Известно, что в природных биотопах у этого вида животного помимо трихинеллеза регистрируют различные зоонозные инфекции - туляремию, лептоспироз,

кишечный иерсиниоз, псевдотуберкулез (Н.Н. Товпинец, 2009).

Таким образом, грызуны и некоторые насекомоядные животные могут являться одним из звеньев в циркуляции трихинелл в условиях природного биоценоза. Даже при низкой экстенсинвазированности микромаммалий трихинеллами они, истребляясь в большом количестве хищниками, могут заражать последних трихинеллезом.

4.3. Резистентность циркулирующих изолятов трихинелл к температурным факторам

4.3.1. Изучение устойчивости личинок трихинелл в тушках промысловых животных при отрицательных температурах

В рамках настоящих исследований изучена резистентность к низким температурам изолята трихинелл, выделенного из мышц естественно зараженной лисицы и экспериментально инвазированных белых мышей, в

зависимости от температуры и сроков замораживания.

Совместно с Ф.К. Скворцовой (Ф.К. Скворцова, О.Н. Андреянов, 2009)

образцы мышечной ткани лисицы размером 15 грамм заложили на хранение в бытовой холодильник при температуре минус 16±2°C и минус 23±2°C, через определенный промежуток времени исследовали личинок трихинелл на

153

жизнеспособность и инвазионность (табл. 24). Для контроля эксперимента при

тех же условиях заморозили тушки лабораторных мышей, инвазированных тем

же изолятом трихинелл 45-ти дневного возраста первого и второго пассажа.

Таблица 24 - Жизнеспособность и инвазионность мышечных личинок трихинелл в тушке лисицы при различных отрицательных температурах

В результате проведенного опыта личинки трихинелл в мышечной ткани лисицы при температуре минус 16±2°C сохранили жизнеспособность 90% на

78-е сутки, к 134 дню она незначительно снизилась до 80%. На 157-е и 192-е

сутки опыта жизнеспособность личинок была 75% и 70% соответственно.

Биологическая проба, проведенная на белых лабораторных мышах, оказалась положительной на 107-е сутки.

При температуре минус 23±2°C личинки трихинелл в мышечной ткани лисицы сохраняли жизнеспособность 90% на 8-е сутки, к 42 дню она снизилась до 80%. Далее, на 78-е, 134-е, 157-е и 192-е сутки наблюдения жизнеспособность трихинелл была 70%, 65%, 55% и 50% соответственно.

Инвазионная активность личинок трихинелл, исследуемая на лабораторных мышах, была также положительной на 107-е сутки опыта.

При контрольном измерении, проведенном при температуре минус 23±2°C

на тушках лабораторных мышей первого и второго пассажа изолята личинок

154

трихинелл от лисицы, жизнеспособность личинок резко снизилась на 8-е сутки опыта (до 30-35%). На 19-е сутки опыта жизнеспособность личинок трихинелл была 5%. Биопроба на лабораторных животных оказалась отрицательной на 19-

е сутки.

Полученные нами данные согласуются с данными И.Я. Зимороя (1963),

А.С. Бессонова (1976, 2001), Ф.К. Скворцовой (2003, 2009), В.А. Бритова (1982)

и других авторов, которые утверждают, что природные изоляты личинок трихинелл высоко устойчивы к низким температурам окружающей среды. При первом пассаже трихинелл на других видах животных, в том числе и на лабораторных, происходит биохимическая адаптация личинок возбудителя к видам хозяев (Г.А. Козлова, 1996). При последующих пассажах трихинелл на этом же животном биохимические свойства закрепляются.

Таким образом, мы установили, что при замораживании тушки лисицы при температуре минус 16±2°C и минус 23±2°C в бытовом холодильнике личинки трихинелл хорошо сохраняют жизнеспособность и инвазионность. При этом в тушках белых мышей первого и второго пассажа указанная способность сохраняется в меньшей степени. По данным литературы трихинеллы первых пассажей на лабораторных животных малоустойчивы к замораживанию,

вследствие их малой адаптивности к новому хозяину.

Трихинеллы, находящиеся в мышечной ткани животного, весьма устойчивы в отношении отрицательных температур. Долгое время считалось,

что низкие температуры не действуют губительно на личинок трихинелл. При низких температурах от минус 20±2°C до минус 30±2°C они остаются инвазионными в свинине на протяжении 40 суток. Позже установили, что лишь при длительной экспозиции инвазионного мяса низкие температуры вызывают гибель личинок (В.А. Калюс, 1952). С 1923 г. после введения в нашей стране обязательной компрессорной трихинеллоскопии, интерес к исследованиям по обезвреживанию трихинеллезной свинины при помощи низких температур резко снизился. В США и Канаде с 1945 года действуют специальные правила

155

замораживания свинины с целью ее обезвреживания от трихинелл, то есть глубокому замораживанию подвергается вся свинина, поступающая на реализацию в торговые сети (W. Varges, 1958). Учитывая вероятность использования подобной технологии в нашей стране, в дальнейшем были продолжены исследования по влиянию глубокого замораживания на личинок трихинелл в свинине. Была подтверждена надежность американских инструкций по обезвреживанию свинины от трихинелл (А.С. Бессонов, 1976). В

настоящее время, согласно рекомендациям Международной комиссии по трихинеллезу (МКТ), для инактивации личинок T.spiralis в свинине минимальное время замораживания при температуре минус 17,8±20С

составляет 106 часов, при минус 23,3±20С - 63 часа, а при минус 28,9±20С – 35

часов при условии достижения этой температуры в центре куска мяса (А.С.

Бессонов, 2001; H.R. Gamble и др., 2000). Замораживание свинины при температуре минус 15±20С в зависимости от величины кусков свинины рекомендуется проводить не менее 3-4 недель. Применение очень низких температур (минус 40±2 – минус 70±20С) используют для обеззараживания тушек, что обеспечивает полную гибель личинок в течение нескольких часов

(О.Н. Андреянов, 2011а; 2011б).

Однако некоторые виды личинок трихинелл, паразитирующих у диких животных, являются весьма устойчивыми к действию низких температур внешней среды. Эта способность позволяет им длительное время (весь охотничий сезон, составляющий 4 - 6 месяцев) сохранять инвазионность в выброшенных тушках животных – трихинеллоносителей. Высокая жизнеспособность личинок, выделенных из мышечной ткани естественно зараженной обыкновенной лисицы, сохранялась при температуре минус 16±20С

в течение 192 суток, а при минус 23±20С - 134 суток.

Инвазированные тушки промысловых зверей являются пищей другим хищным животным, грызунам, что способствует быстрому распространению гельминтоза. Жизнеспособность и инвазионность личинок трихинелл в трупах

156

диких животных полностью зависит от факторов внешней среды - температуры

ивлажности, способствующих замораживанию, гниению, высыханию.

Вразлагающемся мясе личинки трихинелл выживают до полного растворения среды. В тушках крыс, инвазированных трихинеллами и находящихся на поверхности почвы либо прикопанных на глубину до 60 см, трихинеллы остаются жизнеспособными до полного исчезновения трупа, то есть в течение 3 месяцев в летний период. В зимний период, если тушки животного находятся на поверхности почвы под слоем снега либо на глубине 30-60 см, трихинеллы сохраняют жизнеспособность неопределенно долгое время и служат источником инвазии (Ф.К. Скворцова, 2003; 2009).

К биотическим факторам так же относят способность трихинелл выживать в разлагающемся мясе, что особенно актуально при передаче и заражении трихинеллами диких и домашних животных. В разлагающемся мясе личинки остаются живыми от 2-х до 10-ти месяцев (Трихинеллы и трихинеллез, 1978;

В.А. Бритов, 1982).

Учитывая, что заготовка, хранение и первичная обработка пушного сырья происходит в холодное время года (с ноября по март), в тушках пушных зверей, прирези и мездре шкурок длительное время сохраняются личинки трихинелл, которые служат дополнительным фактором передачи инвазии, как в природном, так и в синантропном биоценозах.

Следующим этапом работы было сравнительное изучение резистентности

мышечных личинок трихинелл изолята, полученного от естественно инвазированной лисицы, в условиях охотхозяйства Рязанской области в зимний период года (О.Н. Андреянов, 2010). Работа была проведена с ноября 2008 г. по апрель 2009 г. в условиях Шиловского охотхозяйства. Рубленые куски тушки лисицы размером 400 – 500 грамм и цельные тушки лабораторных мышей,

инвазированных этим же изолятом 45-дневного возраста, заложили на хранение в ловчую яму для грызунов. Инвазионный материал закрыли полиэтиленовыми пакетами и металлической сеткой от крупных хищников и птиц. Ежемесячно измеряли температуру под снегом, где лежали пробы, и толщину снежного покрова (табл. 25).

157

Таблица 25 - Устойчивость мышечных личинок капсулообразующих трихинелл в условиях внешней среды

158

В результате опыта установлено, что личинки трихинелл в мышечной ткани лисицы сохранялись на протяжении 5 месяцев (с ноября по март).

Жизнеспособность трихинелл в начале опыта (в ноябре) была 100%, а через 5

месяцев (в марте) 80%. После переваривания в ИЖС капсулообразующие трихинеллы оставались подвижными, при микроскопии у личинок были хорошо различимы внутренние органы. В апреле мышечная ткань трупа лисицы практически высохла. При переваривании мышечных проб личинки трихинелл в осадок не выпали.

В тушках инвазированных белых мышей жизнеспособность трихинелл была иной. Через месяц показатель жизнеспособности снизился до 80%, а через

2 месяца до 25-30%. В этот период было отмечено, что тушки мышей пропитались трупным соком, шкурки плохо отделялись от тушек животных. В

феврале жизнеспособные личинки регистрировали только в 5% случаев. У

единично выпавших личинок трихинелл было отмечено отслоение кутикулы,

вакуализация, нарушение целостности кишечной трубки.

В результате полевых исследованиях, проведенных в зимний период года на протяжении 5 месяцев (с ноября по март), установлено, что личинки трихинелл, находящиеся в мышечной ткани тушки естественно инвазированной лисицы, сохранили жизнеспособность до 80%. А в тушах белых лабораторных мышей, инвазированных личинками трихинелл первого пассажа, они оказались жизнеспособными в гораздо меньшей степени.

4.3.2. Устойчивость личинок трихинелл в мездре шкур промысловых

животных при различных температурах

Нашей целью было проверить устойчивость личинок трихинелл,

находящихся в мышечном слое мездры шкур обыкновенной лисицы, к

различным температурным режимам.

159

Жизнеспособность и инвазионность личинок капсульных трихинелл в поперечнополосатой мускулатуре шкур естественно зараженных плотоядных животных изучали на примере 11 обыкновенных лисиц, добытых охотниками в Шиловском районе Рязанской области (О.Н. Андреянов, 2013б).

На основании проведенных опытов установлено, что при положительных температурах устойчивость личинок трихинелл оказалась незначительной

(табл. 26). При температуре 20±2°C личинки трихинелл в мездре сохраняли жизнеспособность и инвазионность до 2 суток, а при 4±2°C до 4 дней (рис. 33 и 34).

Исследования при отрицательных температурах дали иной результат (табл.

27). При температуре минус 12±2°C и минус 24±2°C личинки трихинелл,

находящиеся в мездре, сохранили жизнеспособность и инвазионность в течение

14 месяцев. Далее исследования были прекращены из-за полного расходования инвазионного материала.

Кроме того, в не отмездренных свежеснятых шкурах лисицы личинки трихинелл сохранили жизнеспособность и инвазионность при 7-кратном замораживании и оттаивании (табл. 28).

Таблица 26 - Устойчивость личинок трихинелл в мездре шкур промысловых животных при положительных температурах

160