МОНОГРАФІЇ НА ВАКЦИНИ ДЛЯ ЗАСТОСУВАННЯ ЛЮДИНОЮ

ВАКЦИНА ДЛЯ ПРОФІЛАКТИКИ ГЕПАТИТУ А (ІНАКТИВОВАНА, АДСОРБОВАНА)

Vaccinum hepatitidis A inactivatum adsorbatum

ПОСІВНІ СЕРІЇ

Штам вірусу гепатиту А, використовуваний для приготування головної посівної серії, слід ідентифікувати архівними записами, що містять інформацію про його походження і подальші маніпуляції з ним.

Тільки посівна серія, що втримує наведені нижче випробування, може використовуватися для розмноження вірусу.

HEPATITISA VACCINE (INACTIVATED, ADSORBED)

ВИЗНАЧЕННЯ

Вакцина для профілактики гепатиту А (інактивована, адсорбована) — суспензія, що складається із відповідних штамів вірусу гепатиту А, вирощена в культурі клітин, інактивована валідованим методом і адсорбована на мінеральному носії.

ВИРОБНИЦТВО

ЗАГАЛЬНІ ПОЛОЖЕННЯ

Виробництво вакцин засноване на системі посівних серій вірусу та системі банку клітин. Слід підтвердити, що спосіб виробництва гарантує стабільний вихід вакцини з необхідною імуногенністю, безпекою й стабільністю.

Спосіб виробництва валідують для підтвердження того, що при тестуванні продукт витримуватиме випробування на аномальну токсичність (2.6.9) дня імуносироваток і вакцин для застосування людиною.

Якщо немає інших зазначень і дозволів, вірус у кінцевій вакцині від головної посівної серії має пройти не більше пасажів, ніж вірус, який використовувався для приготування вакцини, що в клінічних випробуваннях продемонструвала задовільні результати з безпеки та ефективності.

Стандартний препарат. Як стандартний препарат використовують частину репрезентативної партії, для якої як мінімум підтверджена аналогічна з партією, використаною в клінічних випробуваннях, імуногенність на молодих, здорових, зрілих тваринах, яка викликає не менше 95 % сероконверсію, що вважається відповідним рівню нейтралізуючих антитіл після повного курсу первинної імунізації. За захисний рівень антитіл вважають 20 мМО/мл, визначений методом імуноферментного аналізу.

СУБСТРА ТИ ДЛЯ РОЗМНОЖЕННЯ ВІРУСУ

Вірус розмножують у людських диплоїдних клітинах (5.2,3) або в безперервних клітинних лініях, дозволених компетентним уповноваженим органом.

Ідентифікація. Вірус гепатиту А, що міститься в кожній головній і робочій посівних серіях, ідентифікують із використанням специфічних антитіл.

Концентрація вірусу. Для контролю відтворюваності виробництва визначають концентрацію вірусу у кожній головній і робочій посівних серіях.

Сторонні агенти. Робоча посівна серія має витримувати вимоги до посівних серій вірусних вакцин (2.6.16). Крім того, якщо для виділення штаму були використані первинні клітини мавп, слід вжити заходів із забезпечення чистоти штамів від вірусів мавп, таких як вірус імунодефіциту та філовіруси.

РОЗМНОЖЕННЯ І ЗБІР ВІРУСУ

Усі технологічні процеси з банком клітин і далі з культурою клітин проводять в асептичних умовах на ділянці, де не обробляються інші клітини. Середовище для культивування клітин може містити підхожі сироватки тварин (але не сироватку людини). Сироватка та трипсин, використовувані для приготування клітинної суспензії та середовища для культивування, мають бути вільні від сторонніх агентів. Середовище для культивування клітин може містити індикатор рН, такий як феноловий червоний, та підхожі антибіотики в найменшій ефективній концентрації. Не менше 500 мл культури клітин для виробництва вакцин відбирають як неінфіковану культуру клітин (контрольні клітини). Декілька зборів із однієї виробничої культури клітин можуть об'єднуватися і вважатися як одиничний збір.

Тільки одиничний збір, що витримує наведені нижче вимоги, може використовуватися для приготування вакцин. Якщо у ряді одиничних зборів установлене співвідношення концентрації вірусу до вмісту антигена, що підтверджує відтворюваність виробництва, це випробування надалі можна не проводити в рутинних дослідженнях.

Ідентифікація. Випробування на вміст антигена також служить для ідентифікації одиничного збору.

Відсутність бактерій та грибів. Одиничний збір має витримувати випробування на стерильність (2.6.1) з використанням 10 мл для кожного середовища.

Мікоалаши (2.6.7). Одиничний збір має витримувати випробування на мікоплазми з використанням 1 мд для кожного середовища.

Контрольні клітини. Контрольні клітини для виробництва культури клітин мають витримувати випробування з ідентифікації та вимоги щодо сторонніх агентів (2.6.І б).

Вміст антигена. Для контролю відтворюваності виробництва підхожим імунохімічним методом (2.7.1) визначають вміст антигена гепатиту А: вміст має бути в межах, установлених для конкретного продукту.

Співвідношення концентрації вірусу та вмісту антигена. Відтворюваність співвідношення концентрації інфекційного вірусу. визначеного підхожим методом на культурі клітин, і вмісту антигена встановлюють ваіідацією на відповідній кількості одиничних зборів.

ОЧИЩЕННЯ ІОЧИШЕНИЙЗБІР

Збір, який може складатися з декількох об'єднаних одиничних зборів, очищають валідованими методами. Якщо у виробництві використовують безперервні клітинні лінії, слід підтвердити, що процес очищення постійно знижує вміст ДНК клітинхазяїнів.

Тільки очищений збір, шо витримує наведені нижче вимоги, може використовуватися для приготування інакгивованого збору.

Концентрація вірусу. В очищеному зборі підхожим методом на культурі клітин визначають концентрацію інфекційного вірусу для контролю відтворюваності виробництва і як відправну точку контролю кривої інактивації.

Співвідношення антиген : загальний білок. Підхожим імунохімічним методом (2.7.1) визначають вміст антигена вірусу гепатиту А. Валідованим методом визначають загальний бііок. Співвідношення вмісту антигена вірусу гепатиту А до загального білка має бути в межах, установлених для конкретного продукту.

Альбумін бичачий сироватковий. Не більше 50 нг в еквіваленті на однудозудля людини, визначений підхожим імунохімічним методом (2.7.1). Де застосовно, виходячи з виробничих процесів, для підтвердження ефективності очищення можуть бути використані інші підхожі білкові маркери.

Залишкова ДНК клітин-хазяїнів. Якщо для розмноження вірусу використовують безперервну клітинну лінію, підхожим методом визначають вміст залишкової ДНК клітин-хазяїнів. що має бути не більше 100 пг в еквіваленті на одну дозу для людини.

Затишкові реактиви. Якщо в процесі очищення використовують хімічні реактиви, в очищеному зборі (або інактивованому зборі) слід тестувати їх наяв-

ність, доки ватідаційними дослідженнями не підтверджена їх відсутність. їх концентрація не має перевищувати межі, встановлені для конкретного продукту.

ІНАКТИВАЦІЯ ЙІ НА КТИВОВА НИЙ ЗБІР

Декілька очищених моновалентних зборів одного типу можуть бути об'єднані перед інактивацією. Щоб уникнути втручань у процес інактивації внаслідок агрегації вірусів, слід вжити заходів із запобігання утворення вірусних агрегатів, або вони мають негайно видалятися до і/або у процесі інактивації. Суспензію вірусу інактивують валідованим методом. який дозволяє інактивувати вірус гепатиту А без руйнування антигенної та імуногенної активності: для кожної процедури інактивації будують криву інактивації з концентрації залишкових живих вірусів у не менше трьох тимчасових точках (наприклад, за днями процесу інактивації: 0. 1 і 2). Якшо для інактивації використовують формальдегід, у кінці процесу інактивації перевіряють наявність надмірного вільного формальдегіду.

Тільки інакгивований збір, що витримує вимоги, наведені нижче, може використовуватися в приготуванні кінцевої нерозфасованої вакцини.

Інактивація. Проводять тест ампліфікації на залишковий інфекійний вірус гепатиту А, інокулючи в культури клітин аналогічних використаним у процесі виробництва вакцини таку кількість інакгивованого збору, яка еквівалентна 5 % партії, або. якщо збір містить еквівалентне 30 000 дозам або більше, але не менше 1500 доз вакцини. Загальний час інкубації має бути не менше 70 діб, і проводять не менше одного пасажу клітин за цей період. У кінці періоду інкубації проводять випробування з підхожою чутливістю на залишковий інфекційний вірус. Після процесу інактивації у пробі не мають виявлятися докази розмноження вірусу гепатиту А. Паралельно як позитивний контроль для підтвердження клітинної чутливості і відсутності взаємодій використовують інокулят інфекційного вірусу.

Стерильність (2.6.1). Інакгивований вірусний збір має витримувати випробування на стерильність з використанням 10 мл для кожного середовища.

Бактеріальні ендотоксини (2.6.14). Менше 2 МО в еквіваленті на одну дозу для людини.

Вміст антигена. Визначають вміст антигена вірусу гепатиту А підхожим імунохімічним методом (2.7.1).

Затишкові реактиви. Як зазначено в розділі «Очищення і очищений збір».

КІНЦЕВА НЕРОЗФАСОВАНА ВАКЦИНА

Кінцеву нерозфасовану вакцину виготовляють із одного або більше інактивованих зборів. Можуть