56.Термические методы анализа: термогравиметрия, дифференциальный термический анализ, дифферинциальная сканирующая калориметрия.Применение в фармацевтическом анализе.

Термический анализ объединяет группу методов, при помощи которых определяется зависимость различных физических свойств веществ от температуры. Обычно в большинстве используемых методов определяют изменение энергии или массы испытуемого образца. Различают термогравиметрию, термометрическое титрование, дифференциальный термический анализ, дифференциальную отраженную колориметрию, дериватографию, термомикроскопию. Инструментальные методы термического анализа дают информацию о кристаллической структуре, температуре кипения, способности к сублимации, дегидратации, твердофазном взаимодействии. Эта информация может быть использована для идентификации, определения чистоты, влажности и стабильности веществ, количественного определения термонестойкихвеществ,выявления присутствия полиморфных форм, для характеристики совместимости субстанций и вспомогательных веществ в лекарственных средствах,выбора упаковки и контроля качества.

Термические методы анализа, какне требуют больших количеств веществ, непродолжительны по времени выполнения. В частности, определение потери в массе при высушивании методом термогравиметрии включают в частные статьи на дорогие субстанции. Термогравиметрия представляет собой метод, при помощи которого регистрируют изменение массы испытуемого образца от программированного изменения температуры. Прибор. Основными составляющими частями прибора являются: приспособление для нагревания или охлаждения вещества соответственно заданной температурной программы, камера для образца с контролируемой атмосферой, электровесы и регистрирующее устройство. Проверка температурной шкалы. Проверку температурной шкалы проводят в соответвии с инструкцией изготовителя с использованием никеля. Градуировка весов. Подходящее количество ФСО кальция оксалата моногидрата помещают в контейнер и регистрируют его массу. Начинают нагревание образца по программированному изменению температуры соответственно инструкции изготовителя. Термогравиметрическую кривую регистрируют в виде графика. При температуре около 230оС повышение температуры приостанавливают. На графике измеряют расстояние между начальным и конечным плато, что соответствует изменению массы образца. Полученную величину сопоставляют с величиной, указанной в маркировке кальция оксалат моногидрат ФСО. Методика. Изменение массы испытуемого образца определяют в условиях, указанных в частной статье. Потерю в массе испытуемого образца определяют измеряя расстояние между начальным и конечным плато на гравиметрической кривой и выражают в процентах (м/м).

57.Белоксвязывающие методы анализа: иммунохимические и рецепторные. Биологические методы анализа. Применение в фармацевтическом анализе.

Биологическую оценку качества ЛВ проводят по ихфармакологической активности или токсичности. 1.Иммунохимические методы основаны на селективном, обратимом нековалентномсвязывании антигенов антителами. Эти методы используются для обнаружения и количественного определения как антигенов, так и антител. Положения данного общего метода относятся к иммунохимическим методам с использованием меченых или немеченых реагентов.

Результаты, получаемые иммунохимическими методами, зависят от

реакционных условий, а также природы и качества используемых реагентов. Важно стандартизировать компоненты, используемые в ходе иммуноанализа и, по возможности, использовать для количественных определений международные стандартные препараты.

Реагенты, необходимые для многих иммунохимических методов, содержатся в составе коммерчески доступных наборов, т.е. наборов, включающих реагенты (антигены или антитела) и материалы, предназначенные для оценки invitro указанной субстанции, а также инструкции по их надлежащему применению. Наборы используются в соответствии с инструкциями производителя; важно убедиться в том, что наборы являются подходящими для анализа испытуемой субстанции с особым учетом их селективности и чувствительности.

МЕТОДЫ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ МЕЧЕНОГО АНТИГЕНА ИЛИ АНТИТЕЛАВ методах с использованием меченых веществ могут применяться подходящие метки, например, ферменты, флуорофоры, люминофоры и радиоизотопы. Если меткой является радиоизотоп, метод называют «радиоиммунологическим анализом». Рекомендации по измерению

радиоактивности, приведенные в статье «Радиофармацевтические препараты

(0125)», подходят также и для иммунологических анализов с использованиемрадиоизотопов.

МЕТОДЫС ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ НЕМЕЧЕНОГО АНТИГЕНА ИЛИ АНТИТЕЛА

Методы иммунопреципитации.М.И включают процессы флокуляции и осаждения.При смешивании растворов антигена с соответствующим антителом в подходящих условиях реактанты образуют флокулирующие или преципитационные агрегаты. Отношение реактантов, при котором достигается минимальное время флокуляции или наиболее заметное осаждение, называют оптимальным отношением. Такое отношение обычно составляют эквив. количества антигенов и антител.Иммунопреципитация может оцениваться визуально или по светорассеянию(нефелометрическое и турбидиметрическое определение). Увеличение чувствительности может быть достигнуто использованием в качестве реактантов частиц (например, из латекса), покрытых антигенами или антителами..

2.Рецепторный метод анализа – это методы анализа, в которых в качестве связывающих агентов используются рецепторные белки. Бактериально-рецепторный, ферментативный и белково-рецепторный методы анализа относят к рецепторным методам. Бактериально-рецепторный (ферментативный и белково-рецепторный) метод анализа, как разновидность иммунологического анализа основан на связывании антибактериальных веществ с бактериальными рецепторами или рецепторными белками и применяется как для идентификации (качественное определение), так и для количественной оценки остатков антибактериальных веществ.

3.БИОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ АНАЛИЗА, методы качеств. обнаружения и количеств. определения неорг. и орг. соединений, основанные на применении живых организмов в кач-веаналит. индикаторов. Живые организмы всегда обитают в среде строго определенного хим. состава. Если нарушить этот состав, напр., исключив из питательной среды определяемый компонент или введя его дополнительно, организм через нек-рое время подаст соответствующий сигнал. В кач-ве индикаторов применяются микроорганизмы (бактерии, дрожжи, плесневые грибы), водоросли и высшие растения, водные беспозвоночные и позвоночные животные (простейшие, ракообразные, моллюски, личинки комаров, олигохеты, пиявки, рыбы и др.), насекомые, черви, а также ткани, разл. органы и системы (нервная, кровеносная, половая и др.) теплокровных. Питательная среда м. б. естественной, искусственной или синтетической.

Биологический метод исследования характеризует силу фармакологического действия лекарственного вещества.

Активность лекарственных веществ при биологическом методе исследования выражается в единицах действия (ЕД). Сила действия исследуемого вещества определяется путем срав­нения с действием стандартных веществ.

Например, для установления биологической активности гормона инсулина его действие сравнивают с действием стандарта, представляющего собой кристаллический инсулин, содер­жащий 24,5 интернациональных единиц в 1 мг (за единицу принимают специфическую активность 0,04082 мг этого препарата).

Биологический метод исследования является весьма чувствительным.

Алкалоиды, витамины, антибиотики обнаруживают активность, будучи разведенными в миллион раз.

Несмотря на ряд недостатков, присущих биологическим методам контроля, этот метод до сих пор еще находит довольно широкое применение, особенно для контроля новых лекарственных веществ еще не установленного химического строения.

58.Приготовление растворов реактивов, эталонных и буферных растворов. Титрованные растворы ( стандартные растворы), используемые для титриметрических определений. Особенности приготовления и установления титра ( стандартизации).

Растворами называют физико-химические однородные смеси переменного состава, состоящие из двух или нескольких веществ и продуктов их взаимодействия. Существует несколько способов описания количественного состава растворов:

Массовая доля растворенного вещества - ω = m в-ва/ m р-ра х 100%

Молярная концентрация - C = n/V (моль/л)

Титр раствора — масса растворённого вещества в 1 мл раствора.

Массовая концентрация – ρ = m/Vр-ра

Моляльная концентрация - растворителя. C_m = n/ 1000 г растворителя

Объемная доля – φ = V в-ва/ V р-ра

Молярная доля – χ = n в-ва/n р-ра.

Существует 2 основных способа приготовления растворов (в зав-ти от этого их называют первичными и вторичными) :

Готовят путем растворения точной навески в-ва в определенном объеме растворителя

Готовят вначале в приблизительной концентрацией , а затем определяют точную с помощью стандартного в-ва.

Титрованные или стандартные растворы должны готовиться в соответствии с обычными требованиями химического анализа. Проверяют точность используемого оборудования для того, чтобы удостовериться в его пригодности для предполагаемого применения. Титрованными растворами называются растворы точно известной концентрации, предназначенные для целей титриметрического анализа.

Концентрация титрованных растворов не должна отличаться от указанной более чем на 10%. Для уточнения концентрации титрованного раствора вводят поправочный коэффициент (отношение фактической концентрации раствора к теоретической). Титрованные растворы периодически (обычно 1 раз в месяц) перепроверяют и устанавливают новый поправочный коэффициент.

Растворы с молярностью ниже 0,1 М готовят непосредственно перед использованием. Титрованные растворы хранят при комнатной температуре, защищая их, при необходимости, от воздействия углерода диоксида и влаги воздуха и от прямых солнечных лучей.

Стандартный образец-специально приготовленные материалы, состав и свойства которых достоверно установлены и официально аттестованы специальными государственными метрологическими учреждениями.

Стандартные растворы могут быть первичными и вторичными. Первичные стандартные растворы готовят путем растворения точной навески вещества( это взвешивание на аналитических весах с погрешностью +- 0,0002г.) в определенном объеме растворителя и тщательного перемешивания. Вторичные стандартные растворы готовят вначале с приблизительной концентрацией (близкой к требуемой), а затем определяют точную концентрацию по стандартному веществу. К этому приему прибегают в том случае, если вещество нельзя получить в достаточно чистом виде или его концентрация изменяется при хранении раствора.

Титрованные растворы также можно приготовить, используя соответствующие фиксаналы. Фиксанал (стандарт-титр, нормадоза) представляет собой запаянную пластиковую или стеклянную ампулу, содержащую в виде порошка или концентрированного раствора точно известное количество вещества, приготовленное и расфасованное в промышленных условиях. Для приготовления стандартного раствора вскрывают ампулу, ее содержимое через воронку переливают (пересыпают) в мерную колбу (обычно объёмом 1 л), при этом необходимо чтобы все содержимое ампулы попало в мерную колбу, саму ампулу 3-4 раза промывают растворителем. Содержимое мерной колбы перемешивают до полного растворения и затем доводят до метки растворителем.

59.Физ с-ва фарм. Субст.: агрег. С-ние, внешний вид, окр,кристалличность,полиморфизм.Р-сть. Усл. термины, обозн р-сть.

Агрегатные состояния вещества - состояния (фазы) одного и того же вещества (напр., воды, железа, серы), переходы между которыми сопровождаются скачкообразным изменением ряда физических свойств (плотности, энтропии и др.). Обычно рассматривают газообразное, жидкое и твердое агрегатные состояния (иногда еще плазменное). Существование у вещества нескольких агрегатных состояний обусловлено различиями в тепловом движении его молекул (атомов) и в их взаимодействии (Газ, Жидкость, Твердое тело, Плазма).

При изменении внешнего вида лекарственных средств должно быть подвергнуто контролю качества на соответствие стандартам ГФ или другой ПТД. Для правильного вывода о соответствии внешнего вида лекарственных средств требованиям ГФ необходимо установить связь между изменением внешнего вида и физико-химическими процессами, которые могут происходить под влиянием внешней среды с участием ЛС.

Окраска.Окраска — свойство в-в отражать, переизлучать и рассеивать свет, определяющее их визуальное восприятие - цвет, воспринимаемый человеком в определённых условиях.

КРИСТАЛЛИЧНОСТЬ- это физическое св-во в-ва, , при котором атомы или молекулы образуют правильную упорядоченную решетку. Большинство твердых веществ существует в кристаллическом состоянии, которое отличается повышенной стабильностью, но это не означает, что они имеют кристаллы в прямом смысле этого слова; например, чистая медь является кристаллической только потому, что ее атомы расположены в регулярном порядке.

Определение степени окрашивания ж-тей в ряду коричневый-желтый-красный проводят визуально путем сравнения с соотв. эталонами (р-рами сравнения) одним из двух описанных ниже методов настоящей статьи. Р-р считается бесцветным, если он выдерживает сравнение с водой или р-лем, или окрашен не более интенсивно, чем эталон В9. МЕТОД I. 2.0 мл испытуемой ж-ти сравнивают с 2.0 мл воды или р-ля, или эталона, описанного в настоящей статье, используя одинаковые пробирки из бесцв., прозр., нейтр. стекла с внешним диаметром 12 мм. Сравнение окраски проводят при рассеянном дневном отраженном освещении, просматривая объекты горизонтально (перпендикулярно оси пробирок) на белом матовом фоне. МЕТОД II. 40-мм слой испытуемой ж-ти сравнивают с 40-мм слоем воды или р-ра, или эталона, указанного в частной статье, используя одинаковые пробирки диаметр от 15 мм до 25 мм. Исходные растворы. Желтый р-р – FeCl3•6H2O,Красный р-р – CoCl2•6Н2О,Синий р-р – CuSO4•5Н2О, станд. иодометрич.

Степень окрашивания испытуемого р-ра не должна превышать степени окрашивания соотв. эталона, а цвет испытуемого р-ра должен быть максимально приближен к цвету соотв. Эталона

ЛФ по агрег. состоянию классифицируют на твердые (порошки, таблетки, драже, гранулы и др.), жидкие (истинные и коллоид. р-ры, суспензии, эмульсии, капли, линименты и др.), мягкие (мази, суппозитории, капсулы желатиновые и др.), газообразные (аэрозоли,газы).

Характеристика кристаллического состояния. Кристалличность испытуемого образца определяют для установления соответствии с требованиями по кристалличности, указанными в частной статье для данной фармацевтической субстанции. Если нет указаний в частных статьях, несколько частиц образца в минеральном масле помещают на чистое предметное стекло. Смесь исследуют с использованием поляризационного микроскопа: частицы проявляют двойное лучепреломление (интерференционная окраска) и зоны поглощения при вращении предметного столика микроскопа.

Полиморфизм— это явление, относящееся к твердым веществам; это способность вещества в твердом состоянии существовать в различных кристаллических формах при одном и том же химическом составе. Твердые вещества, находящиеся в некристаллической форме, называются аморфными. В случае если это явление наблюдается у химического элемента (например, серы), вместо термина «полиморфизм» используется термин «аллотропия». При описании сольватов (включая гидраты), в которых растворитель присутствует в кристаллической решетке в стехиометрической пропорции, используют термин «псевдополиморфизм»; этот термин также может быть применен к веществам, в которых растворитель присутствует в непостоянных пропорциях.Для изучения полиморфизма могут быть использованы следующие методы:-рентгенография порошков;–рентгенография отдельных кристаллов;–термический анализ (дифференциальная сканирующая калориметрия, термогравиметрия, термомикроскопия);–микрокалориметрия;–анализ поглощения влаги;–оптическая и электронная микроскопия;–ядерный магнитный резонанс в твердом теле;–инфракрасная спектрофотометрия;–рамановская спектрометрия;–измерение растворимости и характеристической скорости растворения;–измерение плотности. (ГФ РБ т.1)Под «растворимостью» подразумевают свойство вещества растворяться в различных растворителях, принятых в ГФ РБ. Показатели растворимости вещества в различных растворителях приводятся в частных фармакопейных статьях. Для обозначения растворимости используются описательные термины, которые в температурном интервале от 15оС до 25оС имеют смысл, обозначенный в таблице.

Термин Примерное количество растворителя(мл),необходимое для растворения 1 г вещества

1.Очень легко растворим до 1

2.Легко растворим от 1 до 10

3.Растворим от 10 до 30

4.Умеренно растворим от 30 до 100

5.Мало растворим от 100 до 1000

6.Очень мало растворим от 1000 до 10000

7.Практически нерастворим более 10000

Для определения растворимости навеску вещества вносят в отмеренное количество растворителя и непрерывно встряхивают в течение 10 минут при температуре 20+5оС. Предварительно образец может быть растерт. Для медленно растворимых образцов, требующих для своего растворения более 10 минут, допускается также нагревание на водяной бане до 30оС; наблюдение производят после охлаждения раствора до температуры 20+5оС и энергичного встряхивания в течение 1-2 минут. Вещество считают растворившимся, если в растворе при наблюдении в проходящем свете не обнаруживаются частицы вещества. Если указано, что субстанция растворима в жирных маслах, то имеется в виду, что она растворима в любом масле, относящемуся к классу жирных масел.

Растворы. Способы описания количественного состава р-ров. Приготовление р-ров.

Растворами называют физико-химические однородные смеси переменного состава, состоящие из двух или нескольких веществ и продуктов их взаимодействия. Существует несколько способов описания количественного состава растворов:

Массовая доля растворенного вещества - ω = m в-ва/ m р-ра х 100%

Молярная концентрация - C = n/V (моль/л)

Титр раствора — масса растворённого вещества в 1 мл раствора.

Массовая концентрация – ρ = m/Vр-ра

Моляльная концентрация - растворителя. Cm = n/ 1000 г растворителя

Объемная доля – φ = V в-ва/ V р-ра

Молярная доля – χ = n в-ва/n р-ра.

Существует 2 основных способа приготовления растворов (в зав-ти от этого их называют первичными и вторичными) :

1. Готовят путем растворения точной навески в-ва в определенном объеме растворителя

2. Готовят вначале в приблизительной концентрацией , а затем определяют точную с помощью с помощью стандартного в-ва.