28.Нормативно-правовые акты регламентирующие контроль качества лс аптечного изготовления

ГФ РБ в 3 томах, носит законодательный характер.

Том 1 (2006) «Общие методы контроля качества ЛС» общие ФС и методы фарм анализа

Том 2 (2008) «Контроль качества вспомогательных веществ и ЛРС» частные ФС на субстанции…

Том 3 (2009) «Контроль качества вспомогательных веществ, ЛРС и экстемпоральных ЛС» ФС на изготовление твёрдых, жидких и других лек. Форм

Еще 35 постановление(контроль качества ЛВ приготовленных в аптеке от 14 августа 2000г) и 15(отклонения)

29Сравнительная оценка хроматографических,спектрометрических,белковосвязывающих и др методов ,применяемых для определения лв в биологических

Требованиям, предъявляемым к биофармацевтическому анализу, отвечают только чувствительные физико-химические методы. Процесс выполнения биофармацевтического анализа включает несколько последовательно выполняемых стадий: экстракцию из биологической жидкости, разделение, идентификацию и количественное определение ЛВ или его метаболитов. Процессы экстракции анализируемых лекарственных веществ и их метаболитов из биологических объектов осуществляют с помощью таких органических растворителей, как диэтиловый эфир, хлороформ, бензол, дихлорэтан, дихлорметан, метиленхлорид, этилацетат, ацетон. Экстракцию проводят в присутствии кислот, щелочей или буферных растворов, создавая рН среды, оптимальное для извлечения ЛВ или его метаболита. Вещества, содержащиеся в полученных экстрактах (реэкстрактах), определяют фотометрическим, спектрофотометрическим или флуориметрическим методом. Весьма перспективен чувствительный экстракционно-фотометрический метод, основанный на экстракции ЛВ из биологической жидкости с последующим взаимодействием с кислотными или основными красителями (бромтимоловым синим, метиловым оранжевым, бромк резоловым зеленым и др.). Образующиеся окрашенные продукты (ионные ассоциаты) нередко специфичны для ЛВ и количественно экстрагируются органическим растворителем (хлороформом, бензолом, дихлорэтаном).

Наиболее часто в биофармацевтическом анализе используют спектрофотометрию в УФ- и видимой областях спектра. Этот метод отличается простотой выполнения и достаточной точностью, не требует большого количества операций при подготовке к анализу испытуемого образца. Сравнительно невысокая чувствительность спектро

фотометрических методик (от 1 мкг/мл до 1 мг/мл) ограничивает применение данного метода для тех групп ЛВ, суточная доза которых составляет около 1 г. Чувствительность флуориметрического анализа - около 0,0! мкг/мл. По сравнению с УФ спектрофотометрией она выше в 10-100 раз. Поэтому с помощью флуориметрических методик можно подвергать биофармацевтическому анализу ЛВ, суточные дозы которых составляют несколько миллиграммов. Особенно высокой чувствительностью отличаются спектрофлуориметрические определения. Однако следует учитывать, что в биологических жидкостях организма нередко содержатся вещества, обладающие флуоресценцией. Флуоресцировать могут и метаболиты ЛВ.

ТСХ широко применяется в биофармацевтическом анализе ввиду высокой разрешающей способности и чувствительности. Повысить разрешающую способность ТСХ можно, используя метод двумерной хроматографии. Метод ТСХ позволяет обнаруживать до 0,025 мг ЛВ. Выполнение анализа занимает от 30 мин до 2 ч. ТСХ отличается простотой выполнения, однако при анализе сложных смесей, содержащих большое число компонентов, этот метод не всегда позволяет достигнуть нужного эффекта. Более перспективно использование ТСХ в сочетании с такими методами, как планиметрия и денситометрия. Биофармацевтический анализ методом ТСХ чаще всего сочетают с УФ-спектрофотометрией и флуоресцентным методом (хроматоспектрофотометрия, хроматофлуоресценция).

ГЖХ ввиду высокой чувствительности, хорошей воспроизводимости и точности стоит на одном из первых мест среди физико-химических методов, используемых для анализа ЛВ и их метаболитов в биологических жидкостях. Он позволяет определить микрограммовые и нанограммовые количества этих веществ. До выполнения анализа методом ГЖХ необходимо предварительно осуществлять многократную экстракцию (чаще эфиром, хлороформом или этилацетатом) и реэкстракцию ЛВ или его метаболитов.

ВЭЖХ отличается от ГЖХ тем, что позволяет испытывать соединения, обладающие термической неустойчивостью и молекулярной массой более 400. Для этих соединений исключается фаза перевода в летучие производные. По сравнению с ТСХ метод ВЭЖХ требует меньших затрат времени на выполнение анализа. Это обусловило широкое внедрение метода в практику биофармацевтического анализа. В последние годы созданы системы для ВЭЖХ, позволяющие из 0,5 мл мочи в одну стадию без предварительной экстракции получить до 150 пиков индивидуальных веществ.

Для определения малых концентраций ЛВ и их метаболитов в биологических жидкостях (крови, моче, тканях), а также для изучения метаболизма и проведения фармакокинетических исследований применяют иммунохимические методы. Они основаны на высокочувствительной и специфичной реакции антител с гаптенами (соответствующими низкомолекулярными биологически активными соединениями) и на способности гаптена, содержащего специально введенную метку, конкурировать за активный центр антитела.

30.Методы разделения и концентрирования,используемые в биофармацевтическом анализе Разделение – это операция (процесс), в результате которой компоненты, составляющие исходную смесь, отделяются друг от друга. Концентрирование – операция (процесс), в результате которой повышается отношение концентрации или количества микрокомпонентов к концентрации или количеству макрокомпонентов. Различают абсолютное и относительное концентрирование. Абсолютное концентрирование – это перевод микрокомпонента из большей массы (или объема) образца в малую массу (или объём). Относительное концентрирование – это когда микрокомпонент отделяется от макрокомпонента таким образом, что повышается отношение концентрации микрокомпонента к концентрации макрокомпонента. Относительное концентрирование можно рассматривать как частный случай разделения. Разделение и концентрирование имеют много общего как с точки зрения теории, так и в технике использования.В основе большинства методов разделения лежит один и тот же принцип – избирательное распределение компонентов анализируемой пробы между двумя разделяющими фазами. Обнаруживаемый компонент смеси переводят по возможности полностью в одну из фаз.  Методы основаны на использовании различий в свойствах компонентов анализируемой системы, таких как: растворимость, температура, скорость движения частиц во внешнем электрическом поле и др. К числу наиболее распространенных методов относятся следующие: - испарение : упаривание и выпаривание (досуха); - озоление-анализируемый материал путем термической обработки на воздухе превращается в минеральный остаток (золу); - кристаллизация; - экстракция (различие в растворимости извлекаемого компонента в двух контактирующих несмешивающихся фазах) - сорбционные (адсорбция, абсорбция и хемосорбция); - электрохимические; - хроматографические;  - осаждение и соосаждение. Соосаждение Соосаждение – одновременное осаждение обычно растворимого микрокомпонента с выпадающим в осадок макрокомпонентом из одного и того же раствора , вследствие образования смешанных кристаллов. Осадок макрокомпонента называют коллектором (или носителем микрокомпонента) Коллекторы (носители) – это малорастворимые неорганические или органические соединения, которые должны захватывать нужные и не захватывать мешающие микрокомпоненты и компоненты матрицы. Соосаждение используют для повышения полноты выделения того или иного компонента из раствора вместе с осадком.  При осаждении имеет место адсорбция, ионный обмен, изоморфное соосаждение, образование химических соединений и другие виды взаимодействия микрокомпонентов с компонентами осадка. На соосаждение микрокомпонентов оказывают влияние состояние микрокомпонента в растворе, кристаллохимические свойства осадка (структура, поверхность и др.), процесс старения осадка, кислотность раствора, порядок добавления реагентов, температура, время и другие факторы.  Осаждение.Разделение методом осаждения основано на различной растворимости соединений разделяемых ионов при действии реагентов. Для повышения селективности осаждения варьируют рН раствора, используют комплексообразование, изменение степени окисления элементов и другие. При правильном подборе осадителей и условий осаждения удаётся разделить практически любые смеси катионов и анионов.  Практически все неорганические и органические реагенты для осаждения неорганических ионов пригодны для разделения. Экстракция.Экстракция – это метод разделения и концентрирования веществ, основанный на распределении вещества между двумя несмешивающимися фазами. В качестве одной из фаз обычно используют воду, в качестве второй – органический растворитель. Метод считается универсальным, поскольку он используется практически для всех элементов. Преимущества экстракции перед другими методами связаны с большой скоростью достижения межфазного равновесия, быстрым отделением одной фазы от другой, а так же с тем, что соэкстракция мешающих элементов мала. 

Соединение ответственное за образование экстрагируемого соединения (обычно в органической фазе) называют экстрагентом. Органическую фазу, отделённую от водной и содержащую экстрагированные соединения, называют экстрактом. Перевод вещества из органической фазы в воднуюназываютреэкстракция, а раствор, используемый для реэкстракции – реэкстрагентом.  Инертные органические растворители, применяемые для улучшения физических и экстракционных свойств экстрагента, называют разбавителями. К ним относятся: хлороформ (СН Сl₃, тетрахлорид углерода (СCl₄), бензол (С₆ Н₆).