Оглавление

1. ВВЕДЕНИЕ

В«Методическихуказаниях кпрактическимзанятиямпогистологии, цитологии и эмбриологии» последовательно изложен материал к практическим занятиям по дисциплине. Порядок тем соответствует типовой Учебной программе и Рабочей программе. «Методические указания к практическим занятиям по гистологии, цитологии и эмбриологии» — необходимый помощник студента в его работе с гистологическими микропрепаратами по всем темам дисциплины. Основное внимание в «Указаниях» уделено подробному описанию изучаемых микропрепаратов, сопровождаемому иллюстрациями. Чтобы успешно выполнить задачи практического занятия, студент должен внимательно прочитать соответствующий раздел и следовать рекомендациям «Указаний».

КОММЕНТАРИИ К РАБОТЕ НА ПРАКТИЧЕСКОМ ЗАНЯТИИ

Каждоепрактическоезанятиепогистологии,цитологиииэмбриологии складываетсяизследующихэтапов:а)предварительноесамостоятельное изучение студентом соответствующего раздела по учебнику и лекциям в соответствии с тематическим планом; б) проверка усвоения материала преподавателем (с помощью устного опроса, беседы, дискуссии, теста и т.д.); в) изучение гистологических микропрепаратов с использованием таблиц, схем, методических пособий, учебников при консультативной помощипреподавателя;г)детальнаязарисовкамикропрепаратоввцвете и с обозначением всех структур.

Нужнопонимать,чтозарисовкапрепаратов—несамоцель,аметодих изучения. Она помогает сосредоточить внимание на деталях структуры, на соблюдении пропорций, размеров изображаемых частей, которые иначе легко ускользают от внимания, развивает наблюдательность. При этомнеобходимозарисовыватьизображение,видимоеподмикроскопом, а не копировать рисунки из учебника или с учебной таблицы. Детальные цветныерисункисподробнымиобозначениями,служасвоегородаконспектом,помогаютстудентуболееэффективноподготовитьсякзачётному занятию (диагностикуму).

Нагляднымипособиямидляпрактическихзанятийслужат:1)учебные таблицы, 2) муляжи по эмбриологии, 3) атласы.

Приступая к работе с гистологическими микропрепаратами, студент должен соблюдать следующие правила. Микропрепарат устанавливается на столике микроскопа покровным стеклом вверх. Вначале следует полностью рассмотреть препарат под малым увеличением микроскопа. Отдельныедеталипрепаратаизучаютсяподбольшимувеличением.После того,какпрепаратизученполностью,можноприступатькегозарисовке. Каждый рисунок и его детали должны иметь соответствующие названия и обозначения.

ПРАКТИЧЕСКИЕ УМЕНИЯ И НАВЫКИ

При изучении дисциплины студент должен приобрести следующие практические умения и навыки:

—работать с микроскопом;

—«читать» с помощью микроскопа и диагностировать эмбриологические и гистологические препараты и рисунки, соответствующие указанным препаратам;

—идентифицировать форменные элементы на мазке крови;

—зарисоватьгистологическийиэмбриологическийпрепараты,делать подробные обозначения структур;

—составить письменное и устное описание изучаемых объектов.

ЛИТЕРАТУРА

1.Гистология (ред. Челышев Ю.А., Улумбеков Э.Г.), 1–3 издания. —

М.: ГЭОТАР–МЕД, 1997, 2001, 2007

2.Атлас по гистологии, цитологии и эмбриологии для работы на практических занятиях. — М.: ГЭОТАР–МЕД, 2007

3.КузнецовС.Л.,МушкамбаровН.Н.,ГорячкинаВ.Л.Атласпогистологии, цитологии и эмбриологии. — М.: МИА, 2002

4.ЮшканцеваС.И.,БыковВ.Л.Гистология,цитологияиэмбриология. Краткий атлас. — СПб: «Иван Федоров», 2006

2.ВВОДНОЕ ЗАНЯТИЕ. КЛЕТКА, ТКАНИ

ИГИСТОЛОГИЧЕСКИЕ ЭЛЕМЕНТЫ

Цель занятия

Знакомствоссодержаниемпредмета,требованиями,предъявляемыми кафедрой к студентам, с формами контроля. Основные положения цитологии. Понятие о тканях и гистологических элементах.

Задачи занятия

1.Получить представление о структуре дисциплины, характере её изучения, текущего и итогового контроля знаний.

2.Ознакомитьсясосновнымиположениямигистологическойтехники изготовления микропрепаратов.

3.Повторить правила работы с микроскопом и гистологическими микропрепаратами.

4.Повторитьосновныеположенияоборганизацииклеткииеёструктур.

5.Повторитьосновныесведенияогистологическихтканях.Получить представление о гистологических элементах (клетка, межклеточное вещество, симпласт, синцитий). Изучить под микроскопом и зарисовать препараты.

Вопросы, подлежащие рассмотрению

Понятиеопредметеизучениядисциплиныиогистологическойтехнике. Представление о гистологической ткани и гистологических элементах. Основные структуры клетки.

Оснащение занятия

1.Таблицы

2.Препараты:

—мультиполярныйнейронпереднихроговсероговеществаспинного мозга (импрегнация азотнокислым серебром);

—симпласт — скелетное мышечное волокно;

—межклеточное вещество — коллагеновые и эластические волокна, основное вещество (рыхлая соединительная ткань, препарат брыжейки);

—пигментная клетка (препарат кожи лягушки).

Препараты и схемы

1. Мультиполярныйнейронпереднихроговсероговеществаспинного мозга (импрегнация азотнокислым серебром) (рис. 2-1).

Рис. 2-1. Мультиполярный нейрон спинного мозга [из: Stohr P., Mollendorf W., 1933]

При малом увеличении микроскопа на поперечном срезе спинного мозга видно серое вещество, имеющее форму бабочки. Серое вещество содержит тела нейронов, особенно крупных в передних рогах. Это двигательные нейроны (мотонейроны), имеющие несколько отростков (мультиполярные). Так как мы имеем дело со срезом, то видны только начальные участкиотростков. Крупное центрально расположенноеядро нейрона имеет вид светлого пузырька. Иногда видно ядрышко. В цитоплазме нейрона видна сеть тёмноокрашенных нитей — нейрофибрилл, составляющих основу цитоскелета нейрона. Нейрофибриллы присутствуют как вокруг ядра, так и в отростках клетки. Между телами клеток можно видеть хаотично расположенные фрагменты отростков других нейронов. Под малым увеличением микроскопа найти в передних рогах серого вещества мотонейроны. Под большим увеличением рассмотреть и зарисовать нейрон. Отметить ядро, ядрышко, нейрофибриллы, цитоплазму, отростки.

2. Симпласт (скелетное мышечное волокно мышцы языка) (рис. 2-2).

Рис. 2-2. Скелетная мышца языка: продольный срез [из: Voss H., 1957]

При малом увеличении микроскопа заметно, что мышечные волокна, организованныевотдельныепучки,проходятвтрёхвзаимноперпендикулярных плоскостях. На продольном срезе мышечное волокно (симпласт)

имеетвидленты,содержащейбольшоеколичествоудлинённыхтёмноокрашенныхядер,расположенныхуповерхностиволокна(непосредственно подплазмолеммой).Подбольшимувеличениемхорошовиднапоперечная исчерченность мышечного волокна (чередование тонких тёмных и светлых полос, или дисков, что отражает структуру миофибрилл). Между мышечными волокнами можно видеть ядра клеток, присутствующих в прослойкахрыхлойсоединительнойткани,окружающихкаждоемышечное волокно, а также сосуды, жировые клетки. Зарисовать продольные срезы мышечных волокон под большим увеличением, отметить ядра, светлые и тёмные диски, саркоплазму, сарколемму.

3. Межклеточноевещество(рыхлаясоединительнаятканьбрыжейки)

(рис. 2-3).

Рис. 2-3. Рыхлая соединительная ткань [из: Gartner L.P., 1988]

Прималомувеличенииможновидетьсетьволоконразличнойтолщины, проходящихвразличныхнаправлениях.Напрепаратеможновидетьсеть изколлагеновыхиэластическихволокон.Коллагеновыеволокнаотносительнотолстыеибледноокрашенные,волнообразноизвиваются.Тонкие тёмноокрашенные эластические волокна ветвятся и имеют прямой ход. Эластическиеволокнатакжераспределеныхаотично.Междуволокнами присутствует большое количество неокрашенного основного вещества,

в котором заметны ядра различных клеток. Зарисовать и обозначить коллагеновые волокна, эластические волокна, основное вещество.

4. Пигментная клетка (неокрашенный препарат кожи лягушки).

При малом увеличении можно видеть, что для пигментных клеток характерны крупные сильно разветвлённые отростки. Клетки имеют коричневато-серый цвет, обусловленный присутствием в цитоплазме большого количества мелких гранул, содержащих пигмент. Ядро клеток плохо различимо из-за маскирующих его многочисленных гранул с пигментом. При большом увеличении рассмотреть и зарисовать клетку, обозначить ядро, отростки, пигментные включения.

3.ОСНОВНЫЕ ПОНЯТИЯ ЭМБРИОЛОГИИ. РАЗВИТИЕ ЛАНЦЕТНИКА. ПОЛОВЫЕ КЛЕТКИ, ОПЛОДОТВОРЕНИЕ И ДРОБЛЕНИЕ У МЛЕКОПИТАЮЩИХ И ЧЕЛОВЕКА

Цель занятия

Усвоить основные понятия эмбриологии на примере ланцетника. Изучить морфологию половых клеток. Разобрать особенности оплодотворения и дробления у млекопитающих и человека.

Задачи занятия

1.Используятаблицыимуляжи,изучитьизарисоватьосновныестадии развития ланцетника.

2.Изучитьпопрепаратамморфологическиеособенностиизарисовать половые клетки млекопитающих и человека.

3.Разобратьсобытияоплодотворения.Изучитьпосхемамизарисовать последовательные события дробления и образования бластоцисты.

Вопросы, подлежащие рассмотрению

Основныепонятия.Оплодотворениеиобразованиезиготы.Дробление, гаструляция, образование зародышевых листков, нейруляция у ланцетника. Первичная эмбриональная индукция. Закладка осевых структур. Строениесперматозоидаияйцеклеткимлекопитающих.Оплодотворение, дробление у млекопитающих. Строение бластоцисты.

Оснащение занятия

1.Таблицы и муляжи по эмбриональному развитию ланцетника.

2.Таблицы и схемы развития человека.

3.Препараты:

—яйцеклетка млекопитающего;

—сперматозоид человека;

—сперматозоиды млекопитающих (крыса, морская свинка).

14

Рис.3-5.Стадииразвитияланцетника.Поперечныесрезы.А—поздняягаструла, Б — начало нейруляции; В, Г — нейрула [из: Conklin E.G., 1932]

Дробление у млекопитающих и человека

У млекопитающих и человека дробление полное (голобластическое), асинхронное и несколько неравномерное. При дроблении зигота окружена прозрачной оболочкой, сохраняющейся до стадии бластоцисты

(рис. 3-6).

Первое дробление зиготы начинается примерно через 30 часов после оплодотворения. Образующиеся два бластомера несколько различны по размерам. Плоскость второго деления проходит перпендикулярно плоскостипервогоделениядробления,концептуспереходитвстадию4-х бластомеров. Дробление у человека асинхронно, поэтому при переходе от стадии 2-х бластомеров к стадии 4-х бластомеров в течение некоторого времени можно наблюдать 3-клеточный концептус. В ходе третьего

15

Рис.3-6.Компактизация и морула на ранних этапах развития [из: Dulcibella T., 1977]

дробленияобразуетсяконцептуссразличнымколичествомбластомеров; условноегоможноотнестикстадии8бластомеров.Доэтогобластомеры расположенырыхло,новскореконцептусуплотняется(компактизация), объём межклеточного пространства уменьшается. К 3-м суткам после оплодотворенияконцептусдостигаетстадииморулы(поздняя8-клеточная стадия). Центрально расположенные клетки морулы образуют щелевые контакты.Именноизэтихклетокивозникаетсобственноэмбрион.Периферическиеклеткиморулысоединяютплотныеконтакты;ониформируют барьер, обособляющий внутреннюю среду морулы. Бластоциста возникает с появлением бластоцеля (заполненной жидкостью полости) к 4-м суткам после оплодотворения (рис. 3-6). Концептус приобретает форму пузырька.Бластоцистусоставляюттрофобластивнутренняяклеточная масса(эмбриобласт).Трофобластобразованпериферическимиклетками морулы,связаннымиплотнымиконтактами.Крупныеудлинённыеклетки трофобласта соединены при помощи плотных контактов. Клетки трофобласта «накачивают» жидкость в бластоцель. Внутренняя клеточная масса (эмбриобласт) — компактная масса мелких клеток, выступающих в бластоцель. Клетки внутренней клеточной массы происходят из центральной части морулы и связаны при помощи щелевых контактов. В дальнейшем из внутренней клеточной массы образуются собственно зародыш и некоторые связанные с ним оболочки.

4.РАЗВИТИЕ МЛЕКОПИТАЮЩИХ

ИЧЕЛОВЕКА

Цель занятия

Изучить особенности гаструляции у млекопитающих и человека. Усвоить представление об эмбриональной индукции, понять процессы нейруляцииизакладкиосевыхструктур.Разобратьиусвоитьпроизводные зародышевых и внезародышевых листков.

Задачи занятия

Сравнить строение бластоцисты с дискобластулой птиц. Обратить внимание на сходство процесса гаструляции млекопитающих и птиц. По ходу разбора материала сделать рисунки препаратов зародышей птиц с подробным указанием структур.

Вопросы, подлежащие рассмотрению

Формирование эпибласта, гипобласта, первичной полоски. Роль первичной полоски в формировании энтодермы, мезодермы, эктодермы. Нейруляция.Дорсальная,промежуточная,латеральнаямезодерма.Производные зародышевых листков.

Оснащение занятия

1.Таблицы,схемы,муляжипоразвитиюптиц,млекопитающихичеловека.

2.Препараты эмбрионов птиц:

—зародышевыйдискнастадиипервичнойполоски(тотальныйпрепарат);

—зародышевыйдискнастадиипервичнойполоскивпоперечномразрезе;

—зародыш на стадии формирования сомитов (тотальный препарат);

—зародыш на стадии формирования сомитов в поперечном разрезе.

ПРЕПАРАТЫ И СХЕМЫ

Развитие птиц

1. Эмбрион курицы на стадии первичной полоски — тотальный пре-

парат (рис. 4-1) и поперечный срез (рис. 4-2).

Зародыш расположен в пределах светлого поля (area pellucida), имеющего грушевидную форму. Оно окружено тёмным полем (area opaca).

18

Светлое поле соответствует центральной части зародышевого диска, где имеется один слой клеток эпибласта, под которым расположен узкий бластоцель, разделяющий эпибласт и гипобласт. Тёмное поле — многослойная периферическая часть зародышевого диска. Здесь (со стороны бластоцеля) к стенке бластодиска прилегают крупные клетки, богатые желтком. Первичная полоска возникает в результате формирования скопленияклеток,вытянутоговкраниально-каудальномнаправлении.По центрупервичнойполоскипроходитпервичнаябороздка.Краябороздки по обе её стороны утолщены: это первичные валики. На краниальном конце первичной полоски образуется утолщение, состоящее из плотноупакованных клеток, — хензеновский узелок. В процессе гаструляции черезпервичнуюполоскупроходятклетки,выселяющиесяизэпибласта. Через первичную полоску из эпибласта в бластоцель, полость между эпи- и гипобластом, выселяются клетки энтодермы и мезодермы. Мезодермальныеклетки,выселившиесяизэпибластавобластигензеновского узелка, образуют хорду.

2. Эмбрион курицы на стадии образования осевых зачатков органов — тотальный препарат (рис. 4-3) и поперечный срез (рис. 4-4).

Натотальномпрепаратевидныформирующиесяголовной(ввидерас- ширенийнервнойтрубки—мозговыхпузырей)испинноймозг(ввидеиду- щихпараллельнонервныхваликов,расходящихсявкаудальнойобласти). Напереднемконценервногозачаткаимеютсяпереднийнейропор(ещёне закрывшеесяотверстиенервнойтрубки)иглазныепузырьки—выросты переднегомозга,образующиесяуптицнастадиитрёхмозговыхпузырей. По длинной оси зародыша между нервными валиками можно различить хорду, имеющую вид тонкой линии. Сомиты дорсальной мезодермы расположены по обе стороны от нервной трубки. На поперечном срезе (поздняянейрула)видныэктодерма,энтодерма,нервнаятрубка,лежащая под ней хорда; по обе стороны от нервной трубки и хорды располагаются утолщённая дорсальная мезодерма, небольшой участок промежуточной мезодермы и в виде двух листков — латеральная мезодерма. Все перечисленные структуры найти на препаратах и обозначить.