Вопросы для самоконтроля
Какие основные колориметрические и фотометрические величины вы знаете?
Что такое яркость?
Какими методам можно проводить определение характеристик цвета несветящихся тел?
Какие типы колориметрических приборов вам известны?
Как производится измерение цвета в визуальных колориметрах?
Что измеряют на компараторах?
6.14. Микроскопия
Микроскопическое исследование основано на взаимодействии вещества исследуемого объекта с излучением различной природы в микроскопах, позволяющих получать увеличенное изображение мелких объектов или их деталей, невидимых невооруженным глазом.
Разрешающей способностью микроскопа называется способность оптического прибора давать раздельные изображения двух близких друг к другу деталей или точек.
Разрешающая способность микроскопа обусловлена длиной волны излучении, проходящего через исследуемый объект /или отлагаемого им/ и оптическую систему микроскопа.
На схеме 33 представлены методы микроскопических исследований.
МИКРОСКОПИЯ
Световая
Электронная
в проходящем свете
в отраженном свете
просвечи-вающаяся
сканирующая
светлопольная прямая
темнопольная косвенная
флуоресцентная
фазово-контрастная
Рис. 33. Методы микроскопических исследований
В зависимости от природы излучения и его длины волны микроскопия подразделяется на световую и электронную.
Световая микроскопия в свою очередь подразделяется по характеру взаимодействия излучения с веществом исследуемого объекта на микроскопию в проходящем свете по типу светлого и темного полей, микроскопию флуоресцентную /или люминесцентную/, микроскопию фазово-контрастную. Возможности световой микроскопии возрастают при использовании в блоке с микроскопом видео- и компьютерной техники.
Электронная микроскопия подразделяется на просвечивающую и сканирующую /или растровую/ электронную микроскопию.
Рабочие диапазоны светового и электронного микроскопов приведены в табл. 11.
Таблица 11
Примерные диапазоны применения различных методов исследования растительных объектов
|
Объект исследования |
Шкала размеров объектов |
Методы исследования |
|
Организмы
|
1м 10см 1см 10мм 1мм 100мкм 10мкм 1мкм 100нм 10нм 1нм 0,1нм 0,01нм 0,001нм |
Визуальные методы
Световая микроскопия
Электронная микроскопия
Рентгеноструктурный анализ |
|
Органы
| ||
|
Ткани | ||
|
Клетки | ||
|
Органоиды /органеллы/ | ||
|
Биомолекулы |
Наиболее, распространенные световые микроскопы: микроскопы биологические /МБР-1, МБИ-3, МБИ-6, «Биолам»/, бинокулярные /БМ-56, "Ортоплан»/, стереоскопический /МБС-1/.
Предел разрешения светового микроскопа определяется длиной световой волны, равной от 0,4мкм для фиолетового цвета до 0,7мкм для темно-красного цвета, и шириной конуса световых лучей в оптической системе по формуле:
Разрешение = 0,61 λ (n-Sin0) ,
где λ - длина волны света, мкм; n - рефракция среды; - угол ширины конуса световых лучей, собираемых линзами объектива с точки исследуемого объекта.