Рекомендации по оформлению протокола.

Задание 1. Ознакомиться с особенностями серологической диагностики вирусных инфекций и провести учет РСК, поставленной с целью серологической диагностики вирусной инфекции.

Особенности серологической диагностики вирусных заболеваний.

1. Антитела выявляют в парных сыворотках, первую берут в начале болезни, вторую - через 2 недели.

2. Из сывороток удаляют вирусные ингибиторы.

3. Реакция считается положительной, если титр антител во 2-й сыворотке увеличился в 4 и больше раз.

Схема постановки РСК при вирусных инфекциях.

1:20 1:40 1:80 1:160

Разведения первой сыворотки больного

1:20 1:40 1:80 1:160

Разведения второй сыворотки больного Контроли

1 2 3 4 5 6 7 8

Содержимое пробирок: 1-4 - разведения исследуемой сыворотки (сыворотка + антиген + комплемент), 5 - контроль антигена на антикомпле-ментарность (антиген + комплемент + физраствор + гемолитическая система), 6 - контроль антигена на гемотоксичность (антиген + физраствор + гемолитическая система), 7-8 контроль антигена нормальной ткани на гемотоксичность и антикомплементарность.

Особенностью РСК в вирусологии является осуществление связывания комплемента на холоде (в течение ночи при +4⁰С), а также включение дополнительного контроля с так называемым нормальным антигеном (антигеном из клеток, в которых репродуцировался вирус).

Задание 2. Ознакомиться со схемой постановки и провести учет реакции торможения гемагглютинации, поставленной с целью серологической идентификации вирусной инфекции.

Схема постановки реакции торможения гемагглютинации (РТГА) с целью серологической идентификации вирусов гриппа

Диагностическая 1:20 1:40 1:80 1:160 1:320 КСА КЭ

гриппозная А сыворотка

титр 1:320

Диагностическая 1:20 1:40 1:80 1:160 1:320 КСА КЭ

гриппозная В сыворотка

титр 1:160

по 0,25 мл физ. раствора

по 0,25 мл выделенного вируса

по 0,25 мл 1% суспензии куриных эритроцитов

Задание 3. Ознакомиться со схемой постановки и провести учет реакции торможения гемагглютинации, поставленной с целью серологической диагностики вирусной инфекции.

Схема постановки реакции торможения гемагглютинации (РТГА) с целью серологической диагностики гриппа

1:20 1:40 1:80 1:160 1:320 1:640 КС1 КДА

Сыворотка больного

(рабочее разведение 1:10)

начало болезни

1:20 1:40 1:80 1:160 1:320 1:640 КС1 КДА

Сыворотка больного

(рабочее разведение 1:10)

Взята через 2 недели

6. Вопросы для самоконтроля.

• Какие биологические модели можно использовать для постановки реакции нейтрализации вирусов?

• Каковы особенности серологической диагностики вирусных заболеваний?

• С какой целью при серологической диагностике вирусных инфекций берутся парные сыворотки?

• Особенности постановки реакции связывания комплемента при вирусных инфекциях.

• Что такое гемолитическая сыворотка и как ее получают?

• Что такое гемолитическая система?

• Какие дополнительные контроли нужно поставить при постановке реакции связывания комплемента в вирусологии.