Определение резус-фактора

Под определением резус-фактора у пациента подразумевается определение только Rh_о(D).Резус-отрицательными считаются лица, у которых Rh_оD не обнаружен.

В отличие от реципиентов, определение резус-принадлежности крови доноров проводится в два этапа: сначала определяется наличие Rh_о(D), а затем, при его отсутствии - rh'(C) и rh''(E).

В число резус отрицательных доноров зачисляются только лица, кровь которых не содержит всех трех доминантных антигенов системы Резус: Rh_о(D), rh'(C), rh''(E), то есть имеет фенотип Hr_o(d), hr'(c), hr''(e).

Определение резус - принадлежности при помощи стандартного универсального реагента (в пробирках без подогрева).

Реакция с ним происходит быстрее (3 мин), чем с антирезусными сыворотками, поэтому получила название «экспресс -реакции» или «экспресс-метода».

В пробирку вносят по 2 капли (0,1 мл) стандартного универсального реагента антирезус и 1 каплю (0,05 мл) исследуемой крови.

Содержимое пробирки перемешивают встряхиванием и затем медленно поворачивают по оси, наклонив почти до горизонтального положения так, чтобы содержимое растекалось по стенкам.

Через 3 минуты в пробирки добавляют по 2-3 мл изотонического раствора хлорида натрия и перемешивают 2-3-кратным переворачиванием пробирок, не встряхивая. Пробирки просматривают на свет.

При наличии агглютинации и просветлении раствора резус-фактор считают положительным, при отсутствии агглютинации и равномерном розовом окрашивании раствора — отрицательным.

Исследование других антигенов системы Резус проводится теми же способами специальными реагентами, содержащими соответствующие антитела.

Трансфузионная терапия — основное мероприятие в борьбе с гипоксией, анемией, гипопротеинемией, при травматическом шоке, при подготовке боль­ного к оперативным вмешательствам, во время и после операции. Ответствен­ность за проведение гемотрансфузии и предупреждение несовместимости несет врач, переливающий кровь и ее препараты. Главное требова­ние при переливании крови состоит в учете изосерологических свойств крови донора и реципиента. Кровь должна соответствовать определенным качественным критериям, относящимся к консервации, хранению и содержа­нию продуктов распада.

Группы крови

I группа крови 0(I) — содержит агглютиноген 0 и агглютинины a и b.

II группа крови А (II) — содержит агглютиноген А и агглютинин b.

III группа крови В (III) — содержит агглютиноген В и агглютинин a.

IVгруппа крови АВ (IV) — содержит агглютиногены А и В, агглютинины в ней отсутствуют.

Редко встречаются индивидуумы, группы крови которых отличаются от обычной схемы по системе АВО. Обнаруживаются так называемые дефектив­ные группы крови, когда обычными методами не выявляется какой-либо из ес­тественных агглютининов (А_о, Во, 0ь 0р, 0₀о) и возникает затруднение в опреде­лении группы крови. Более редким является «бомбейский» тип крови: в эрит­роцитах отсутствуют агглютиногены А, В, 0, а в плазме имеются агглютинины L, Р и анти — 0.

Агглютиногены — составная часть клеточных структур форменных эле­ментов крови и представлены полисахаридами, связанными в мембране клетки с липидами и белками. Агглютинины представляют собой молекулу гамма-глобулина и содержатся в плазме крови.

Система антигенов Rh - Нг

В настоящее время известно свыше 30 сочетаний агглютиногенов, относя­щихся к системе Rh - Нг. Практическое значение при переливании крови имеют шесть антигенов: D, С, Е, d, с, е (классификация Фишера-Рейса). Три антигена разновидности Rh-фактора и три — Нг-фактора. В отечественной и зарубеж­ной литературе одинаково широко используют две номенклатуры указанных антигенов: Виннера и Фишера-Рейса. По классификации Виннера они обозна­чаются: Rho, rh¹, rh", Hr₀, hr¹, hr". Эти антигены передаются по наследству, в течение жизни не меняются, имеются не только в эритроцитах, но и в лейкоцитах, тромбоцитах, в жидкостях организма, околоплодных водах. Наиболее антигенный и наиболее частая причина изосерологических конфликтов при гемо-| трансфузиях и беременности — антиген Rh₀ (D), менее антигенный — rh' (C)J еще менее — hr¹ (с), затем — rh" (E). Наиболее слабый — hr"(e). Случаев иммунизации по антигену Hr₀ (d) еще не обнаружено. Указанные шесть антигенов» относятся к липопротеидам.

Лица, имеющие в эритроцитах антиген D, относятся к 11 положительным, а не имеющие — к Rh-отрицательным. Все лица с Rh-отрицательной кровью] одновременно Hr-положительны, так как имеют антиген hr¹ (с). Среди имеющих Hr-положительную кровь большинство (81%) имеют антиген hr' (с) и будут также Hr-положительными, а около 19% с Rh-положительной кровью не имеют антигена hr¹ (с) и считаются Hr-отрицательными. Опасность наличия в донорской крови антигенов группы Нг заставляет предостеречь от трансфузии! Rh-отрицательной крови реципиентам с Rh-положительной кровью.

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГРУППЫ КРОВИ

1.Прямой метод: с использованием стандартных сывороток: сыворотка 1 группы содержит агглютинины а и b; сыворотка 2 группы- агглютинин b,сыворотка 3 группы агглютинин a; сыворотка 4 группы /контрольная/- агглютининов не содержит. Группу крови определяют в 2 сериях, наносят сыворотки, которые смешивают с исследуемой кровью.

2. Обратный метод с использованием стандартных эритроцитов

3. Перекрестный метод: сочетание 1 и 2 методов.

4. С использованием моноклональных антител : анти - А и анти - В.

Учет реакции агглютинации			Группа крови АВО
анти-А	анти-В	анти А+В
-	-	-	0(I)
+	-	+	A(II)
-	+	+	B(III)
+	+	+	AB(IV)

1 . В водяной бане:

В чашку Петри наносят стандартную антирезусную сыворотку , смешивают с эритроцитами исследуемой крови. Чашку Петри помещают в водяную баню на 7-10 минут при температуре 45-48 градусов. Если происходит агглютинация, то кровь резус-положительна.

2. Экспресс - метод:

На дно пробирки вносят 1 каплю антирезусной сыворотки и 1 каплю исследуемой крови, их смешивают, пробирку переворачивают так, чтобы содержимое растекалось по стенке. Спустя 3 минуты смотрят за наличием агглютинации. Для исключения ложной агрегации эритроцитов необходимо добавить 2-3 мл физиологического раствора. Наличие агглютинации – кровь резус-положительна.

3. Лабораторные методы:

Это желатиновая проба, непрямая проба Кумбса, определение резус-фактора в присутствии полиглюкина, альбумина.

5. Переливаемая кровь должна быть обязательно исследована на СПИД, гепатит, сифилис.