2 курс / Микробиология 1 кафедра / Доп. материалы / Mikrobiologia

1.3.2.Клиника:

–инкубационный период составляет 11-23 дня. Болезнь характеризуется лихорадкой, появлением папулезно-везику- лярной сыпи на коже туловища, шеи, лица и конечностей, иногда половых органов и полости рта;

–образовавшиеся круглые пузырьки через 1-3 дня лопаются и подсыхают. После отпадения корок рубцы не остаются (в отличие от натуральной оспы);

–у детей в возрасте от 2 мес. до 1 года и у взрослых ветряная оспа протекает тяжело, с развитием иммунодефицита; возможны пневмонии, гепатиты, энцефалиты, отиты, пиодермии и другие осложнения. Летальность при ветряной оспе составляет 0,01-0,05%; 1.4.Микробиологическая диагностика:

–исследуют содержимое элементов сыпи, отделяемое носоглотки, кровь, пораженные органы и ткани. Вирус выявляют при электронной микроскопии, в РИФ, РП, по образованию телец Гварниери. Выделяют вирус путем заражения куриных эмбрионов и культур клеток с последующей идентификацией в реакции нейтрализации (на куриных эмбрионах), РСК, РТГА. Серологическую диагностику проводят в РТГА, РСК, РИГА, реакции нейтрализации; 1.5.Лечение и профилактика:

1.5.1.Лечение:

–симптоматическое; индукторами интерферона и противовирусными препаратами;

1.5.2.Профилактика:

–прочный иммунитет создает живая оспенная вакцина. Ее готовят из соскобов сыпи телят или при культивировании вируса вакцины (осповакцины) на куриных эмбрионах. Вакцину вводят накожно;

225.Возбудители гепатитов В, С, D, G. Таксономия. Характеристика. Носительство. Микробиологическая диагностика. Специфическая и неспецифическая профилактика парентеральных гепатитов.

1.Гепатит В:

1.1.Таксономия:

-семейство Hepadnaviridae род Orthohepadnavirus;

1.2.Характеристика возбудителя:

1.2.1.Структура:

–ДНК-содержащий вирус сферической формы. Он состоит из сердцевины (построенной по икосаэдрическому типу симметрии) и липопротеиновой оболочки, содержащей поверхностный НВs-антиген. Внутри сердцевины находятся ДНК, фермент ДНК-полимераза, обладающая ревертазной активностью, и концевой белок НВе-антиген;

–геном представлен двунитевой ДНК кольцевой формы. Геном записан на минус-цепи и состоит из четырех геновтранскриптов (P, C, S, X), кодирующих структурные белки и полимеразу;

1.2.2.Резистентность:

–отличается высокой устойчивостью к факторам окружающей среды и дезинфицирующим в-вам;

–t-ру -20 выдерживает более 10 лет. При нагревании до 100 в течение 5 мин сохраняет инфекционную активность. Термоустойчивость вируса повышается, если он находится в крови, т.е. защищен белками крови. Вирус устойчив к длительному воздействию кислой среды (рН 2,3), УФ-излучению, действию спирта, фенола. Чувствителен к действию формалина, эфира, хлорамина; 1.3.Патогенез и клиника:

–инкубационный период 3–6 мес. Инфекционный процесс наступает после проникновения вируса в кровь. ВГВ из крови проникает в гепатоцит. После чего вирусный нуклеокапсид достигает ядра, где высвобождается вирусный геном;

–происходит достраивание плюс-нити ДНК ДНК-полимеразой до полноценной структуры, после чего возможно развитие 2-ух типов вирусной инфекции: интегративной и продуктивной;

1.3.1.Интегративная инфекция:

–сопровождается интеграцией кольцевой ДНК вируса в хромосому гепатоцита с образованием провируса. При этом наблюдается синтез НВs-антигена. Клинически это проявляется вирусоносительством, показателем которого служит обнаружение в крови НВs-антигена;

1.3.2.Продуктивная инфекция:

–при этом происходит формирование новых вирусных частиц. Клинически это характеризуется активным инфекционным процессом в виде острого или хронического гепатита;

–клиническая картина характеризуется симптомами поражения печени, в большинстве случаев сопровождается развитием желтухи. Возможны и безжелтушные формы. В 1% случаев возникают молниеносные формы, обычно со смертельным исходом. Острый гепатит в 5-10% случаев переходит в хроническое течение с развитием цирроза и пожизненного носительства ВГВ. Вероятность возникновения пожизненного носительства ВГВ особенно велика у детей первого года жизни (50–90% случаев), заразившихся от матерей; 1.4.Микробиологическая диагностика:

–используют серологический метод и ПЦР. Методами ИФА и РНГА в крови определяют маркеры гепатита В: антигены (НВs и НВе) и антитела (анти-НВс-IgM, анти-НВс-IgG, анти-НВs, анти-НВе-IgM). ПЦР определяют наличие вирусной ДНК в крови и биоптатах печени. Для острого гепатита в преджелтушном и начальной стадии желтушного периода характерно обнаружение HBs-антигена, HBe-антигена и анти-HBcIgM антител;

1.5.Лечение и профилактика:

1.5.1.Лечение:

–используют препараты интерферона, интерфероногены и ингибиторы ДНК-полимеразы;

1.5.2.Профилактика:

–эффективная мера – исключение попадания вируса при парентеральных манипуляциях и переливаниях крови. Это достигается:

а) применением одноразовых шприцев, систем переливания крови, инструментов с последующим после их использования сбором и уничтожением; б) надежной стерилизацией инструментов в централизованных пунктах;

в) проверкой на гепатит В в крови доноров крови, органов, используемых для трансплантации;

–для предотвращения передачи гепатита В половым путем принимают те же меры, что при ВИЧ-инфекции. Специфическая профилактика осуществляется вакцинацией рекомбинантной генно-инженерной вакциной, содержащей HBs-антиген;

–вакцинации подлежат все новорожденные в первые 24 ч жизни, далее – по календарю прививок. Среди взрослого населения трехкратной вакцинации подвергаются лица, относящиеся к группе высокого риска заражения гепатитом В. Длительность поствакцинального иммунитета – не менее 7 лет;

2.Гепатит С:

2.1.Таксономия:

–относится к семейству Flaviviridae pоду Hepacivirus; 2.2.Характеристика возбудителя:

2.2.1.Морфология:

–ВГС является сложноорганизованным РНК-содержащим вирусом сферической формы. Капсид икосаэдрический, содержит структурный белок (cоre), HCc-антиген. Капсид окружен липопротеиновой оболочкой с гликопротеиновыми шипами. Геном представлен одной линейной плюс-цепью РНК, обладает большой вариабельностью;

2.2.2.Резистентность:

–чувствителен к эфиру, детергентам, УФ-лучам, нагреванию до 50 ; 2.3.Патогенез и клиника:

–инкубационный период составляет от 6 до 120 нед. Часто встречаются безжелтушные формы, выявить заболевание при которых можно по увеличению аланинтрансаминазы в крови. Но несмотря на более легкое, чем при гепатите В,

течение инфекции в острой форме, в 50% случаев процесс переходит в хроническое течение с развитием цирроза и первичного рака печени; 2.4.Микробиологическая диагностика:

–материал для исследования – кровь. Используются ПЦР и серологический метод; 2.5.Лечение и профилактика:

–для лечения применяют интерферон и рибовирин. Специфическая профилактика не разработана. Для неспецифической профилактики используют те же мероприятия, что и при гепатите В;

3.Гепатит D:

3.1.Таксономия:

–не классифицирован, является сателлитом вируса гепатита В и представляет дефектный вирус, не имеющий собственной оболочки; 3.2.Характеристика возбудителя и клиника::

–вирион ВГD имеет сферическую форму. Он состоит из однонитчатой минус-цепи РНК кольцевой формы и сердцевинного НDс-антигена (дельта-антигена), построенный из 2-ух белков, регулирующие синтез генома вируса: один белок стимулирует синтез генома, другой – тормозит. Различают три генотипа вируса;

–в качестве внешней оболочки ВГD использует НВs-антиген внешней оболочки вируса гепатита В;

–везервуаром ВГD в природе являются носители вируса гепатита В. Заражение ВГD аналогично инфицированию вирусом гепатита В. Одновременное инфицирование вирусом гепатита В и ВГD (коинфекция) приводит к развитию умеренной формы болезни. Инфицирование ВГD больных хронической формой гепатита В утяжеляет течение инфекции, приводя к развитию острой печеночной недостаточности и цирроза печени. В свободном виде ВГD в крови инфицированных им лиц не обнаруживается, РНК вируса можно обнаружить в биоптатах печени с помощью ПЦР; 3.3.Микробиологическая диагностика:

–осуществляется серологическим методом путем определения антител к ВГD методом ИФА. В биоптатах печени методом ПЦР можно обнаружить в гепатоцитах РНК вируса; 3.4.Лечение и профилактика:

–используют препараты интерферона. Профилактика гепатита D учитывает все те мероприятия, которые используют для профилактики гепатита В. Вакцина против гепатита В защищает и от гепатита D;

4.Гепатит G:

4.1.Таксономия:

–предположительно относится к семейству Flaviviridae pоду Hepacivirus; 4.2.Характеристика возбудителя:

–имеет РНК-зависимую протеиназу, поверхностный (HGs) и сердцевинный (HGc) антигены;

–в сердцевинном (core) белке имеется дефект, поэтому для его репликации требуется вирус гепатита С;

226.ВИЧ-инфекция. Таксономия, характеристика возбудителей. Микробиологическая диагностика. Серологический метод диагностики парентеральных гепатитов. Профилактика. Препараты для антиретровирусной терапии.

1.ВИЧ-инфекция:

–вирус иммунодефицита человека (ВИЧ) вызывает ВИЧ-инфекцию, заканчивающуюся синдромом приобретенного иммунодефицита (СПИД). СПИД характеризуется тяжелым поражением иммунной системы, длительным течением, полиморфностью клинических симптомов, абсолютной летальностью, быстрым эпидемическим распространением. ВИЧ-инфекция – типичный антропоноз; 1.1.Таксономия:

–лимфотропный вирус, относится к семейству Retroviridae роду Lentivirus. Выделяют два типа вируса ВИЧ-1,2, отличающиеся по структурным и антигенным характеристикам; 1.2.Характеристика возбудителя:

1.2.1.Структура:

– сложноорганизованный вирус шарообразной формы. Капсид имеет форму усеченного конуса. В капсиде хранятся 2 молекулы плюс-РНК, ферменты (обратная транскриптаза, интеграза и протеаза) и нуклеопротеины (р7, р6, р9). Он окружен матриксным белком р17;

–сверху находится двухслойная липопротеиновая оболочка, пронизанная гликопротеиновыми шипам, каждый из которых состоит из 3-ех молекул трансмембранного гликопротеина gp41 и поверхностного гликопротеина gp120. В состав оболочки входят мембранные белки клетки, в которой репродуцировался вирус;

–геном ВИЧ представлен двумя нитями РНК и состоит из 3-ех основных структурных генов (gag, pol, env) и семи регуляторных и функциональных генов (tat, rev, nef, vif, vpr, vpu, vpx);

1.2.2.Резистентность:

–ВИЧ погибает при использовании всех известных дезинфицирующих средств, под влиянием солнечных лучей, УФизлучения, 70% этилового спирта. Нагревание до 56 резко снижает инфекционность вируса, а при нагревании до 70 вирус инактивируется через 10 мин. Вирус жизнеспособен в течение нескольких лет в замороженной сыворотке крови. В высушенной плазме крови при температуре 23-27 вирусная активность сохраняется 7 дней; 1.3.Патогенез и клиника:

1.3.1.Патогенез:

–в результате взаимодействия с ВИЧ гибнут Th-лимфоциты, клетки нейроглии мозга. В-лимфоциты подвержены неспецифической поликлональной активации. При этом число CD4-лимфоцитов и соотношение CD4/CD8 ↓;

–моноциты, макрофаги, клетки островков Лангерганса, дендритные клетки в результате взаимодействия с ВИЧ действуют как резервуар инфекции для заражения других клеток, позволяя вирусу распространяться, избегая нейтрализующего действия антител;

–дендритные клетки – первые, с кем ВИЧ встречается при половой передаче. На их поверхности помимо CCR5корецептора и CD4 имеется лектиновый рецептор, способный связываться с gp120. В результате этого связывания ВИЧ не проникает внутрь дендритной клетки, а остается в инфекционной форме. Таким образом, дендритные внутриэпителиальные клетки и клетки, локализованные в слизистой оболочке, присоединяют вирус при его передаче половым путем и доставляют в инфекционной форме в лимфатический узел, передавая его Th-лимфоцитам путем межклеточного синапса, поэтому они играют важную роль в передаче вируса Т-хелперам при половых контактах;

–макрофаги служат передатчиками вируса в головной мозг, взаимодействуя с эндотелием гематоэнцефалического барьера. Поражение иммунных клеток приводит к развитию иммунодефицитов и проявлению вторичных заболеваний инфекционной и неинфекционной природы, а также к возникновению злокачественных опухолей;

1.3.2.Клиника:

–клиническая классификация ВИЧ-инфекции (по В.И. Покровскому) включает следующие стадии: 1.Инкубационный период:

–от момента заражения до клинических проявлений острой инфекции и/или выработки антител) колеблется от 3 нед. до 3 мес.; 2.Стадия первичных проявлений:

–продолжаетсяоколо года с момента появления симптомов острой инфекции или сероконверсии; 3.Субклиническая стадия:

–характеризуется медленным развитием иммунодефицита, длительностью 6-7 лет; 4.Стадия вторичных заболеваний:

–связана со значительным иммунодефицитом и заканчивающаяся через 10-12 лет после начала заболевания; 5.Терминальная стадия:

–проявляющаяся необратимым течением вторичных заболеваний (СПИД);

–основные проявления ВИЧ-инфекции и СПИД-а связаны с развитием вторичных заболеваний, к которым относятся оппортунистические инфекции (пневмония, токсоплазмоз, криптоспоридиоз, кандидоз, гистоплазмоз, герпес-вирус-

ная инфекция, гепатиты В и С, туберкулез, микобактериоз, сальмонеллез), опухоли (саркома Капоши, злокачественная лимфома), неврологические нарушения; 1.4.Микробиологическая диагностика:

–первичная постановка диагноза проводится серологическим методом;

–в связи с изменчивостью ВИЧ при первичной постановке диагноза ПЦР не используется и по результатам ПЦР диагноз не ставится. ПЦР широко применяется после установления диагноза для оценки вирусной нагрузки в целях определения прогноза и тяжести ВИЧ-инфекции; 1.5.Лечение и профилактика:

1.5.1.Лечение:

–основой лечения больных ВИЧ-инфекцией является антиретровирусная терапия с использованием препаратов, подавляющих репликацию вируса;

–для лечения ВИЧ-инфекции используют пять групп антиретровирусных препаратов: 1.Нуклеозидные ингибиторы обратной транскриптазы (азидотимидин); 2.Ненуклеозидные ингибиторы обратной транскриптазы (невирапин); 3.Ингибиторы протеазы (индинавир); 4.Ингибиторы интегразы (ралтегравир);

5.Ингибиторы слияния вирусной и клеточной мембран: блокатор хемокинового рецептора ССR5 (маривирок), блокатор gp41 (энфувиртид);

1.5.2.Профилактика:

–специфическая профилактика не разработана, т.к. попытки создать эффективную вакцину потерпели неудачу;

–профилактика ВИЧ-инфекции сводится к социальным и противоэпидемическим мероприятиям, а именно, к пропаганде безопасного секса с использованием презервативов, использованию одноразовых шприцев и других медицинских инструментов, контролю крови и кровепродуктов, созданию банков крови и др. Важное значение имеет своевременное выявление ВИЧ-инфицированных, борьба с проституцией, наркоманией, распущенностью, а также половое воспитание и просветительская работа среди населения;

227.Классификация и характеристика онкогенных вирусов.

–различают:

1.РНК-содержащие онкогенные вирусы:

1.1.Таксономия и строение:

–семейство Retroviridae включает онковирусы, вирионы которых построены из сердцевины, окруженной липопро - теиновой оболочкой с шипами. Шипов, локализация сердцевины – основа для подразделения вирусов на четыре морфологических типа (А, В, С, D), а также вирус бычьего лейкоза;

–большинство онкогенных вирусов относится к типу С, распространенный среди рыб, пресмыкающихся, птиц и млекопитающих, включая человека;

–к типу В относятся вирусы, вызывающие рак молочной железы у мышей, а некоторые онковирусы обезьян принадлежат к типу D;

–капсид онковирусов икосаэдрический. В него заключены нуклеопротеин и фермент ревертаза (обратная транскриптаза);

–геном диплоидный: представлен двумя идентичными позитивными цепями РНК. Он состоит из структурных и регуляторных генов; 1.2.Классификация:

–существуют две большие группы онковирусов: эндогенные и экзогенные;

1.2.1.Эндогенные онковирусы:

–являются составными элементами генома всех органов и тканей организма человека и животных и передаются потомству от одного поколения другому, т.е. вертикально, подобно обычным клеточным генам;

–не являются онкогенными для представителей того вида животного, в клетках которого они находятся в виде постоянного генетического элемента;

1.2.2.Экзогенные онковирусы:

–распространяются горизонтально от одной особи к другой в форме вирионов; 1.3.Онкогенез:

–механизм онкогенеза, вызываемого онковирусами, связан с функционированием onc-генов, которые имеются в геноме клеток человека. В нормальных здоровых тканях этот ген находится в неактивном состоянии, в форме протоонкогена. Известно >20 onc-генов, функционирование которых приводит к трансформации клетки. Например:

src-ген связан с развитием саркомы Рауса у кур;

ras-ген опосредует развитие саркомы у крыс;

–включение ДНК-провируса в геном клетки может приводить к активации onc-гена, результатом чего будет трансформация клетки. Активация протоонкогена может быть результатом увеличения активности вследствие действия трансактиватора, расположенного на LTR генома провируса, а также следствиеым перестройки генетического материала из-за включения провируса в геном клетки. Помимо онковирусов активацию протоонкогена могут вызвать мутагены, подвижные генетические элементы; 1.4.Резистентность:

–чувствительны к эфиру, детергентам, формалину, инактивируются при температуре 56 . Устойчивы к УФ-лучам и низким температурам;

2.ДНК-содержащие онкогенные вирусы:

–для многих ДНК-содержащих онкогенных вирусов механизмы вызываемого ими онкогенеза схожи, что связано с тем, что большинство таких вирусов вызывают трансформацию клеток, т.е. тех клеток;

–в механизм онкогенеза, вызываемого ДНК-содержащими вирусами, также вовлечены клеточные белки – продукты опухольсупрессирующих генов: р53 и Rb;

–включает 5 классов: 2.1.Семейство Papillomaviridae:

–вирус папилломы человека, собак. Вызывают инфекцию в клетках плоского эпителия. Доброкачественные папилломы в области половых органов, на коже, на слизистых дыхательных путей;

2.2.Семейство Polyomaviridae:

–вакуолизирующий вирус обезьян SV-40.Вирус полиомы человека;

2.3.Семейство Adenoviridae:

–аденовирусы, особенно серотипы 12,18,31 – индуцируют саркомы и трансформируют культуры клеток. 2.4.Семейство Poxviridae:

–вирусы фибромы-миксомы кролика, вирус Ябы, вызывающий развитие опухолей, вирус контагиозного моллюска; 2.5.Семейство Herpesviridae:

–лимфомы, карциномы. Онкогенез у человека связан с вирусом простого герпеса 2 типа (ВПГ-2) и вирусом Эпштей- на-Барр (ВЭБ);

228.Медленные вирусные инфекции и прионные болезни.

1.Медленные вирусные инфекции:

–характеризуются следующими признаками: 1.Длительным инкубационным периодом (месяцы, годы);

2.Своеобразным поражением органов и тканей, преимущественно ЦНС; 3.Медленным неуклонным прогрессированием заболевания; 4.Неизбежным летальным исходом;

–медленные вирусные инфекции могут вызывать вирусы острых вирусных инфекций. Например, вирус кори иногда вызывает ПСПЭ, вирус краснухи – прогрессирующую врожденную краснуху и краснушный панэнцефалит;

–cходные по признакам медленных вирусных инфекций заболевания вызывают прионы – возбудители прионных болезней;

2.Прионные болезни:

–группа прогрессирующих нарушений, воздействующие на ЦНС человека и животных. У людей нарушается ф-я ЦНС, наступают изменения личности, расстройства движений. Симптомы болезни продолжаются от нескольких месяцев до нескольких лет, заканчиваясь летальным исходом; 2.1.Прионы:

– белковые инфекционные частицы (сокр. англ. proteinacous infection particle). Прионный белок обозначается как PrP (от англ. prion protein), он может быть в 2-ух изоформах: клеточной, нормальной (PrPc ) и измененной, патологической (PrPsc). Патологические прионы относятся к возбудителям конформационных болезней, вызывающим диспротеиноз и нейродегенеративные заболевания; 2.2.Патогенез и клиника:

–патологический процесс может вызываться в результате мутации в гене PrPc или при попадании в организм экзогенного патологического приона. Некоторые агенты, вызывающие прионные болезни, накапливаются сначала в лимфоидных тканях. Прионы, попадая в мозг, накапливаются в нем в больших кол-вах, вызывая амилоидоз (внеклеточный диспротеиноз, характеризующийся отложением амилоида с развитием атрофии и склероза ткани) и астроцитоз (разрастание нейроглии, гиперпродукция глиальных волокон). Образуются фибриллы, агрегаты белка или амилоида и губкообразные изменения мозга с образованием вакуолей в нейронах (трансмиссивные губкообразные энцефалопатии). В результате изменяется поведение, нарушается координация движений, развиваются деменция, истощение со смертельным исходом;

–некоторые прионные болезни, «Коричневая книга», стр 694.;

2.3.Микробиологическая диагностика:

–при прионной патологии характерны губкообразные изменения мозга, астроцитоз (глиоз), отсутствие инфильтратов воспаления. Мозг окрашивают на амилоид. В цереброспинальной жидкости выявляют белковые маркеры прионных мозговых нарушений (с помощью ИФА, ИБ с моноклональными антителами). Проводят генетический анализ прионного гена; ПЦР для выявления PrP;

2.4.Лечение и профилактика:

–введение ограничений на использование лекарственных препаратов животного происхождения. Прекращение производства гормонов гипофиза животного происхождения. Ограничение трансплантации твердой мозговой оболочки. Использование резиновых перчаток при работе с биологическими жидкостями больных. Для обезвреживания инструментов и объектов окружающей среды рекомендуются автоклавирование;