- •1. История туберкулёза. Роберт Кох. Открытие микобактерии туберкулёза.
- •2. Mycobacterium tuberculosis complex. Классификация, микробиологические свойства.
- •3.Пути передачи туберкулёза. Иммунитет. Патогенез туберкулёза. Латентная туберкулёзная инфекция.
- •1)Отчёт Всемирной Организации Здравоохранения 2016. Страны с высокой заболеваемостью туберкулёзом.
- •3)Эпидемиология туберкулёза в Российской Федерации.
- •4)Эидемиология туберкулеза в Архангельской области.
- •5.Стратегия воз ликвидации туберкулеза: “Непосредственное контролируемое лечение короткими курсами ” “Остановить туберкулез”, “Ликвидировать туберкулез“.
- •3. Стратегия "ликвидировать туберкулез»
- •7. Классификация туберкулеза по мкб-10.
- •8. Клинические признаки тб легких. Активное и пассивное выявление больных туберкулезом.
- •9. Факторы риска развития тб. Систематический скрининг на активный тб, рекомендации воз 2015. Санитарно-эпидемиологические правила №60 от 22.11.2013.
- •10.Рентгенологическая диагностика туберкулеза. Формы тб у взрослых (очаговый, инфильтративный, фиброзно-кавернозный … ).
- •11. Формы тб у детей (тб внутригрудных лимфатических узлов, первичный тб комплекс, милиарный тб).
- •2. Туберкулез внутригрудных лимфатических узлов;
- •12. Лабораторная диагностика тб. Микроскопия мазка мокроты – описание метода, преимущества, недостатки, ограничения.
- •13. Лабораторная диагностика тб. Культивирование на плотных и жидких питательных средах – описание методов, преимущества, недостатки, ограничения.
- •14. Лабораторная диагностика тб. Молекулярно-генетические методы (GeneXpert, tb-Lamp, проба на стрипах) – описание методов, преимущества, недостатки, ограничения.
- •15.Тест лекарственной чувствительности микобактерии туберкулёза – описание методов, преимущества, недостатки, ограничения.
- •16. Классификация противотуберкулёзных препаратов. Классификация препаратов по рекомендациям воз по лечению млу-тб 2016 года.
- •17.Механизм формирования лекарственной устойчивости. Основные генетические мутации. Первичная и приобретенная лекарственная устойчивость.
- •18.Туберкулёз, чувствительный к основным лекарственным препаратам I ряда. Диагностика, лечение, исходы.
- •19.Туберкулёз с устойчивостью к изониазиду. Диагностика, лечение, исходы.
- •20.Туберкулёз с множественной лекарственной устойчивостью (млу-тб). Диагностика, лечение, исходы.
- •21. Туберкулёз с широкой лекарственной устойчивостью. Диагностика, лечение, исходы.
- •22. Новые подходы к лечению млу-тб. Короткие курсы лечения (Режим воз 2016’), новые препараты (бедаквилин, деламанид, линезолин, клофазимин).
- •23. Пациент-ориентированный подход в оказании противотуберкулезной помощи. Цифровое здоровье.
- •24. Купирование побочных эффектов противотуберкулёзных препаратов.
- •25.Фармаконадзор противотуберкулезных препаратов.
- •26.Профилактика тб. Вакцинация, ревакцинация.
- •27. Очаг туберкулёзной инфекции. Обследование контактных лиц. Лечение латентной инфекции (специфическая химиопрофилактика).
- •28.Инфекционный контроль.
- •29.Диагностика латентного тб. Туберкулиновая проба и Диаскинтест. Igra-тесты (Quantiferon, tb spot).
- •30.Туберкулёз и вич – терапия сочетанной инфекции, основные принципы.
- •31. Внелегочный тб (менингит, спондилит, тб почек, костей и др.)
- •1. Туберкулез центральной нервной системы
- •32. Осложнения тб (кровотечение, пневмоторакс, амилоидоз почек). Диагностика и лечение.
- •33. Хирургическое лечение туберкулеза.
14. Лабораторная диагностика тб. Молекулярно-генетические методы (GeneXpert, tb-Lamp, проба на стрипах) – описание методов, преимущества, недостатки, ограничения.
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) является одним из наиболее быстрых и информативных методов выявления МБТ
Принцип метода состоит в увеличении в 106—108 раз числа копий специфического участка ДНК МБТ, катализируемого in vitroRH К-полимеразой в автоматическом режиме
В искусственных условиях воспроизведение процесса репликации специфического или определенного вида или рода возбудителей участка генома возможно при условии знания его нуклеотидной последовательности
Применение методов детекции продуктов репликации таких участков (ампликоны) позволяет констатировать наличие возбудителя в исследуемой пробе
Метод обладает высокой чувствительностью – он позволяет обнаруживать возбудитель при содержании всего нескольких сотен микроорганизмов в 1 мл исследуемого материала (мокроты, крови, плеврального выпота и т.д.)
Результат исследования можно получить в течение 5–6 ч.
Этот высокочувствительный метод в ряде случаев может давать ложноположительные результаты, что ограничивает достоверность исследования
Достоинства метода ПЦР
⎯ Прямое определение наличия возбудителей
⎯ Быстрота проведения анализа ПЦР можно проводить с любым диагностическим материалом
⎯ Высокая специфичность
⎯ Высокая чувствительность
⎯ Внедрение ПЦР позволило: значительно сократить сроки подтверждения диагноза туберкулеза контролировать эффективность химиотерапии у больных туберкулезом
DNA-STRIP технология
Принцип метода
На ДНК-стрипы нанесены специфические пробы, которые комплементарны амплифицируемым нуклеиновым кислотам (ампликонам). После денатурации одноцепочечные ампликоны специфически связываются с пробами на стрипах (гибридизация) и затем визуализируются в последовательной энзиматической реакции (со стрептавидином и щелочной фосфатазой).
———————————————————————————————————————————
15.Тест лекарственной чувствительности микобактерии туберкулёза – описание методов, преимущества, недостатки, ограничения.
1. Метод абсолютных концентраций;
2. Метод соотношения резистентности;
3. Метод пропорций.
Метод абсолютных (предельных) концентраций заключается в следующем. Микобактерий выращивают на питательных средах, содержащих противотуберкулезные препараты (ПТП) в различных концентрациях. Определение лекарственной чувствительности МБТ может быть
• прямым (посев на среды с противотуберкулезными препаратами патологического материала) Позволяет значительно ускорить процесс получения результата, но им можно пользоваться только тогда, когда микобактерий обнаруживаются в исследуемом материале бактериоскопически и содержатся в нем в значительном количестве.
• непрямым (посев на среды с противотуберкулезными препаратами выделенных культур микобактерий).
Лекарственную чувствительность можно определять на плотных и жидких питательных средах. В современной лабораторной практике ее обычно определяют на среде Левенштейна-Йенсена, не содержащей крахмала. При определении лекарственной чувствительности на плотных питательных средах результат учитывают через 3 недели после посева по макроросту МБТ на поверхности среды, на жидких питательных средах — через 10-12 дней по наличию микроколоний в виде переплетающихся жгутов и кос в мазках из осадка.
Плюсы: На плотных средах можно получить более четко сравнимые результаты. Определение лекарственной чувствительности на жидких средах более трудоемко, требует микроскопии препаратов, но результат может быть получен в более короткие сроки. Недостатком этого способа является то, что больные, леченные антибактериальными препаратами, могут выделять микобактерий, лишенные корд-фактора, не дающие при размножении жгутов или паукообразных микроколоний, наличие которых служит критерием устойчивости к препарату.
Метод соотношения резистентности заключается в определении соотношения минимальных ингибирующих концентраций противотуберкулезных препаратов для тестируемого штамма и референс-штаммаH37R.V, чувствительного ко всем препаратам. Величина соотношения 2 и менее характеризует штамм как чувствительный, 8 и более — как устойчивый.
Вариантом метода минимальных ингибирующих концентраций является E-test. Лекарственная устойчивость микобактерий с использованием этого метода определяется на чашках с агаровой средой, на которые помещают полоски, содержащие градиент концентраций противотуберкулезных препаратов. Чувствительность микобактерий к препаратам оценивается по наличию зоны ингибирования роста микобактерий вокруг полоски. ИспользованиеE-test позволяет определять лекарственную чувствительность МБТ в течение 5-10 дней.
Метод пропорций заключается в определении соотношения числа колоний, выросших на среде, содержащей противотуберкулезный препарат, и числа колоний в контрольной пробирке, не содержащей препарата. Это соотношение является отражением пропорции резистентных бактерий в популяции. Метод позволяет количественно оценить степень резистентности штамма МБТ, однако широкое применение его в классическом варианте затруднено вследствие большой трудоемкости. Определение лекарственной чувствительности микобактерий методом пропорций может проводиться с использованием автоматических системВАСТЕС, MGIT, Esp Culture Systemи др.
В качестве критериев для отнесения штаммов МБТ к категории чувствительных или устойчивых используют пороговые значения минимальных ингибирующих концентраций (МИК) ПТП, избранные на основе комплекса микробиологических, фармакокинетических и клинических показателей.
Данные о величине МИК ПТП в отношении штаммов МБТ, выделенных от больных, служат микробиологическим критерием для определения величины пороговых концентраций.
Кроме того, при определении пороговых МИК учитывают данные по фармакокинетикс ПТП.
Основным показателем при этом является максимальная концентрация ПТП, которая создается в сыворотке крови после приема ПТП в среднетерапевтической дозе.
Четкая зависимость между этим показателем и величинами пороговых МИК отсутствует.
В самом общем виде можно лишь сказать, что пороговые МИК не могут быть выше максимально достижимых в сыворотке крови.
И, наконец, третьим критерием для определения пороговых значений МИК служат данные о клинической эффективности ПТП при заболевании, вызываемом микроорганизмами с различными МИК. Таким образом, предложенные в разных странах пороговые значения МИК ПТП являются плодом консенсуса между ведущими экспертами, а не результатом точных расчетов. По мере накопления опыта их периодически пересматривают. Несмотря на определенную условность рекомендованных пороговых значений МИК ПТП, они являются единственной основой для первого этапа интерпретации результатов оценки чувствительности МБТ к ПТП.
———————————————————————————————————————————