Лабораторная диагностика показателей углеводного обмена.

Субстраты и продукты углеводного обмена – диагностическое значение

Галактоза – содержится в составе лактозы- молочного сахара. Сыворотка крови в норме содержит 0,11 -0,94 ммоль/л.

Повышение уровня галактозы в крови наблюдается у беременных женщин в поздние сроки беременности( молочная железа готовится к лактации, синтезированные в молочной железе галактоза и лактоза выделяю тся в кровь и подготавливает синтез фермента лактазы в кишечнике плода).

У детей с наследственным заболеванием галактоземия наблюдается высокое содержание галактозы в крови и моче после грудного кормления. Появление галактозы в моче новорожденного является патогномоничным ( главным, единственным, определяющим) признаком этой патологии.

Глюкоза - основной показатель крови, характеризует энергетический обмен, соотношение секреции инсулина и контринсулярных гормонов( уровень глюконеогенеза), способность тканей использовать( утилизовать) глюкозу.

Нормальные показатели концентрации глюкозы( ммоль/л).

пуповинная кровь 2,5 -5.3

новорожденные 1 день 2,2 -3.3

ребенок 1 месяц 2,7 -4,4

ребенок 5-6 лет 3,3 –5,5

взрослые до 60 лет 4,4 – 5,5

взрослые старше 60 лет 4,6 – 6,1

Уровень глюкозы в крови- лабильн ый показатель , он отражает ее содержание в течение 15 мин. Повторное исследование может показать другие данные из-за быстрого изменения. .( вспомните

« сахарную кривую»). Содержание глюкозы в моче характеризует ее уровень за последние 4-6 часов, а в суточной моче- за 24 часаПо данным ВОЗ( 1995) содержание глюкозы в капиллярной крови натощак в пределах 5,6 -6,1 свидетельствует о гипергликемии и нарушении толерантности к глюкозе, выше 6,1- о сахарном диабете.

Глюкозурия наблюдается при концентрации глюкозы в крови 10,0 ммоль/л.

Повышенная толерантность к глюкозе характеризуется низким уровнем глюкозы в крови утром натощак и также пониженным содержанием после нагрузки.

Пониженная толерантность к глюкозе характеризуется высоким уровнем глюкозы в крови утром натощак, высоким подъемом ( более 60-70 % от исходного уровня) и высоким содержанием( выше исходного на 15-20% ) после сахарной нагрузки.

Молочная кислота В венозной крови содержание (ммоль/л ) 0, 55-2,2, в артериальной 0,5-1,6.

Повышение наблюдается в случае тяжелой физической нагрузки, гипоксии любого происхождения, при снижении потребления печенью и миокардом

Накопление молочной кислоты сопровождается развитием лактацидоза.

Значение 3-4 ммоль/ при неотложных состояниях требует контроля ( мониторинга) каждые 2 часа,.а превышение порога 5 ммоль/л является неблагоприятным прогностическим признаком.

Пировиноградная кислота. Содержание в крови меняется в пределах 34- 102 мкмоль/л. Повышение характерно после тяжелой физической работы, при недостатке тиамина( витВ₁), поскольку при его отсутствии снижается активность пируватдегидрогеназного комплекса.

Ферменты углеводного обмена.

α-Амилаза (КФ3.2.1.1. )-секретируется поджелудочной железой, слюнными железами.. Гидролизует крахмал, и олигосахариды, содержащие между остатками глюкозы связи α-(1-4), в клетках костей расщепляет гликоген.

В крови в норме присутствуют две фракции амилазы : амилаза слюны( 1), которая составляет 45 ± 9 % и амилаза поджелудочной железы(11)- 55 ± 9 %.

Панкреатическая форма полностью отсутствует у детей до одного года.

Активность амилазы в крови повышается при остром и рецидивирующем панкреатите,

( в первые 2-3 дня от начала болевого приступа), паротите, стоматите, при нарушении фильтрующей функции почек.

Активность фермента снижается при нарушении функций слюнных желез, например, аутоиммунные заболевания ( болезнь Сьегрена, форма I), панкреонекрозе ( форма II)

( фермент амилаза также описан в Тетради 1 в теме «Медицинская энзимология» )

Глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа(Гл-6-ф-ДГ 1.1.1. 49 ) Первый и регуляторный фермент пентозофосфатного цикла ( НАДФ-зависимый).

Высокая активность обнаружена в эритроцитах, лейкоцитах, адипоцитах, молочной железе, коже, селезенке, легких , что связано с уникальным значением восстановленной формы НАДФН в синтезе жирных кислот, холестерина, антиоксидантной и антиперекисной защите, микросомальном окислении.

Обнаружено более наследственных 250 дефектов эритроцитарной Гл-6-ф-ДГ. Клинически эти дефекты в ряде случаев не обнаруживаются, но могут проявляться под воздействием некоторых лекарственных препаратов, вирусных заболеваниях (грипп, гепатит)- создается угроза гемолиза эритроцитов.

Лактатдегидрогеназа ( Лактат: НАД⁺- оксидоредуктаза ЛДГ 1.1.1.27 )- цинксодержащий фермент, катализирует обратимую реакцию превращения

пируват ↔ лактат.

Изоферментный состав имеет органную и тканевую специфичность, что широко используется в лабораторной биохимической диагностике и имеет высокую диагностическую значимость.

В среднем, содержание изоферментов в крови( в %):

ЛДГ₁ - 14-20 , ЛДГ₂ -40 – 50, ЛДГ₃ -0-2, ЛДГ_{4 , 5} - 1.2 -1,5

Содержание: ЛДГ₁ увеличивается в течение 10-20 часов и достигает максимума на 2-3 сутки после начала инфаркта миокарда , повышение активности ЛДГ₄ характерно при лейкозах, токсическом,. вирусном, травматическом поражении печени , опухолях различной локализации

Методики определения

Определение глюкозы в биологических жидкостях организма( кровь, плазма,

сыворотка, спинно-мозговая жидкость, ротовая жидкость) глюкозооксидазным

методом.

Принцип метода:

Стандартный лабораторный набор содержит ферменты глюкозооксидазу( КФ 1.1.3.4 ) и пероксидазу

( КФ )Глюкоза с участием фермента глюкозооксидазы окисляется кислородом воздуха , выделяется пероксид водорода.

β- D – глюкоза + О2 ——> D – глюконо - δ - лактон + Н2О2

Пероксид водорода далее с участие пероксидазы окисляет реактив ортотолидин с образованием окрашенного соединения, интенсивность окраски прямо пропорциональна содержанию глюкозы. Одновременно проводят определение глюкозы в стандартном растворе, который прилагается к набору. Фотометрируют с красным светофильтро

( λ=650нм)

Расчет: С ( гл. в оп.) = С( гл. в станд) ε ( оп) / ε ( ст)

ε - значение оптической плотности растворов